Extracto
Antecedentes
LIM y proteínas SH3 1 (LASP-1) es una proteína de adhesión focal específico que se sabe están involucrados en numerosos procesos biológicos y patológicos. LASP-1 sobreexpresión se ha descrito en varios tipos de cáncer, pero su expresión y función en el cáncer de células renales de células claras (ccRCC) sigue siendo desconocido.
Métodos
El uso de inmunohistoquímica, se analizaron LASP- 1 la expresión de proteínas en 216 casos ccRCC clínicopatológicamente caracterizados. También se examinaron LASP-1 de expresión en 20 tejidos ccRCC pareadas y en 2 líneas celulares mediante PCR en tiempo real y Western blot. El uso de ARN de interferencia, se investigaron los efectos de LASP-1 agotamiento en el comportamiento de las células tumorales
in vitro
. Se utilizaron análisis estadísticos para determinar las asociaciones entre LASP-1 los niveles, características del tumor y los resultados del paciente.
Resultados
LASP-1 se observó sobreexpresión en tejidos ccRCC (
P
& lt; 0,0001) en comparación con los tejidos nontumorous adyuvantes, y sus niveles de expresión se correlaciona estrechamente con la supervivencia global y la supervivencia libre de recurrencia (
P = 0,044
y 0,006, respectivamente) en pacientes con ccRCC. silenciamiento del gen LASP-1 ARN de interferencia mediada por células en 786-0 ccRCC migración celular significativamente inhibido.
Conclusiones
Los resultados del presente estudio indican que la LASP-1 puede servir como una biomarcador pronóstico para los pacientes con ccRCC y puede ser un objetivo prometedor para el tratamiento de ccRCC
Visto:. Yang M, Zhou X, Du S, Zhao y, Ren W, Q Deng, et al. (2014) y LIM dominio SH3 de la proteína 1 (LASP-1) se asoció con sobreexpresión fenotipo agresivo y de mal pronóstico en la célula clara cáncer de células renales. PLoS ONE 9 (6): e100557. doi: 10.1371 /journal.pone.0100557
Editor: Anthony W.I. Lo, la Universidad China de Hong Kong, Hong Kong
Recibido: 21 Marzo, 2014; Aceptado: 23-may de 2014; Publicado: 23 Junio 2014
Derechos de Autor © 2014 Yang et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. La autores confirman que todos los datos que se basan los resultados son totalmente disponible sin restricciones. Todos los archivos están disponibles a partir cel GEO
Financiación:.. Los autores no tienen ningún soporte o financiación reportar
Conflicto de intereses:. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
Claro celular de carcinoma de células renales (ccRCC) es una neoplasia urológica común en todo el mundo [1]. Aunque inmensa mejora se ha logrado en el tratamiento de ccRCC durante los últimos años, la tasa de mortalidad de ccRCC sigue siendo alta, ya que el 40% de los pacientes sometidos a nefrectomía ccRCC desarrollará recurrencia local o metástasis [2]. Por lo tanto, se requiere que los biomarcadores de pronóstico fiables con urgencia para predecir el resultado e identificar dianas terapéuticas para el tratamiento de pacientes ccRCC
.
LIM y SH3 proteína 1 (LASP-1) se ha demostrado que desempeñan un papel importante en el desarrollo del cáncer y progresión [3], [4]. LASP-1 fue identificado inicialmente a partir de una biblioteca de ADNc de metástasis de cáncer de mama, y el gen fue mapeado en el cromosoma humano 17q21 [5], [6]. La proteína LASP-1 humano contiene 261 aminoácidos con un dominio LIM N-terminal, seguido por dos dominios de unión a la actina en el núcleo de la proteína LASP-1 que median la interacción entre LASP-1 y el citoesqueleto de actina en el lugar de extensiones de la membrana celular, pero no a lo largo de las fibras de estrés de actina [7] - [10]. El dominio SH3 en el C-terminal está implicado en interacciones proteína-proteína mediante la unión a ricas en prolina secuencias, zyxin específicamente, pallidin, lipoma-preferido pareja (LPP) y fosfoproteína estimulada por vasodilatadores (VASP) [6], [11] . LASP-1 se localiza en varios sitios de ensamblaje de actina dinámica, como los contactos focales, las adhesiones focales, ondulaciones de la membrana lamelipodia y pseudópodos [12], [13], pero las funciones exactas de LASP-1 todavía no se entienden bien.
LASP-1 se ha informado de que se sobreexpresa en varios tipos de cánceres y líneas celulares de cáncer metastásico, como el cáncer de mama [14], cáncer de ovario [4] y el cáncer de colon [15]. Además, LASP-1 silenciamiento en líneas celulares de cáncer metastásico dio lugar a una fuerte inhibición de la proliferación celular y la migración, y una bajada de zyxin en los contactos focales [4]. Curiosamente,
in vitro
silenciamiento de la proliferación celular LASP-1 gen reducida y la migración y muy afectada localización zyxin [3]. Además, el gen de la transfección mediada por LASP-1 sobreexpresión en células SW480 CRC resultado en las células del cáncer agresivos y promovido el crecimiento del cáncer y la metástasis [15]. Sin embargo, no se han descrito las funciones de LASP-1 en ccRCC.
En el presente estudio, se determinó la expresión de LASP-1 en muestras de tejido utilizando ccRCC ccRCC humano y líneas celulares, y se evaluó la asociación entre LASP-1 de expresión y el resultado ccRCC después de la resección. Por otra parte, se realizó un ARN de interferencia (RNAi) mediada por el silenciamiento de genes de LASP-1 en las células ccRCC para investigar el papel de LASP-1 en ccRCC invasión
in vitro
.
Materiales y Métodos
pacientes y muestras de tejidos
Doscientos dieciséis muestras de tumores renales y sus tejidos adyacentes nontumorous se obtuvieron de pacientes con ccRCC que fueron sometidos a nefrectomía radical o parcial en el Departamento de Cirugía Urología, hospital Xijing, Cuarta Universidad médica militar a partir de agosto de 2005 a septiembre de 2010. el diagnóstico fue confirmado por el análisis patológico postoperatorio. Los pacientes con antecedentes de tumores malignos y los que habían recibido previamente terapia neoadyuvante fueron excluidos del presente estudio. Ningún paciente tuvo metástasis a distancia detectable en la cirugía. La población del estudio consistió en 82 mujeres y 134 hombres (edad media, 63 años; rango de edad, 18-82 años). En el presente estudio, se registraron las características clínicas y patológicas. Utilizando el sistema de estadificación de 2010 TNM y la clasificación de grado de Fuhrman, los tumores se clasifican en los siguientes grupos para el análisis estadístico: primera etapa (TNM1 y TNM2), etapa tardía (TNM3 y TNM4), de bajo grado (grado 1 y 2) y de alto grado (grado 3 y 4). Las características clínico-patológicas de los pacientes se recuperaron a partir de los registros médicos que se resumen en la Tabla 1. Los datos de seguimiento se obtuvieron por teléfono, carta, o la base de datos clínica para pacientes ambulatorios. Todos los pacientes fueron seguidos desde la fecha de la cirugía inicial hasta la muerte o la fecha de cierre de este estudio (30 de noviembre de 2013). La recurrencia se detectó en 127 pacientes (58,7%) en el último examen de seguimiento, y 46 pacientes (31,0%) habían muerto a causa de enfermedades relacionadas con el ccRCC. El tiempo medio de seguimiento fue de 49,3 meses (rango, 1-67 meses).
Por PCR en tiempo real y análisis de Western blot, un total de 20 tejidos tumorales emparejados y tejidos adyacentes emparejados fueron nontumorous recogidos de los pacientes sometidos a tratamiento ccRCC cirugía en el Departamento de cirugía Urología, hospital Xijing, Cuarta Universidad médica Militar entre marzo y junio de 2013. Los 20 pacientes incluidos 12 hombres y 8 mujeres, con una edad media de 61 años (rango, 21-79 años). Después de la resección, los tejidos frescos se congelaron inmediatamente en nitrógeno líquido y se almacenan a -80 ° C. Tanto el tumor y los tejidos nontumourous se verificaron mediante examen histopatológico.
El estudio fue revisado y aprobado por el Comité de Ética de la Cuarta Universidad Médica Militar, y se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los pacientes antes de la cirugía. Todos los procedimientos experimentales se realizaron de conformidad con la Declaración de Helsinki.
La inmunohistoquímica
Las muestras de tejido fueron fijadas en formol al 10% y de manera rutinaria procesados para su inclusión en parafina. Las secciones de tejido (5 m de espesor) se tiñeron con hematoxilina-eosina y examinados por dos patólogos para definir los tejidos cancerosos y notumorous correspondientes. La inmunohistoquímica (IHC) se realizó en secciones de tumores incluidas en parafina utilizando anticuerpos contra la LASP-1 (1:200, Abcam, Cambridge, Reino Unido) después de la recuperación de antígenos. Un control negativo sin el anticuerpo primario se preparó para todas las muestras. La LASP-1 tasa media de expresión se evaluó mediante la inspección de al menos 5 campos microscópicos a 400 × magnificación. LASP-1 de expresión se considera negativa cuando & lt; 10% de las células cancerosas en los campos microscópicos demostró inmunotinción, y los portaobjetos fueron revisados por segunda vez para reducir el error de lectura
Las líneas celulares
.
la línea celular humana 786-0 ccRCC se obtuvo del Banco de células de la Academia de Ciencias de china (Shanghai, china) y se cultivaron en medio RPMI 1640 que había sido suplementado con 10% de SFB. La línea celular humana ccRCC A498 se obtuvo de Tiancheng Tecnología Co, Ltd (Shanghai, China) y se cultivaron en medio DMEM suplementado con 10% de SFB. Las células se recogieron en la fase logarítmica de crecimiento para uso en los experimentos se indica a continuación.
PCR en tiempo real
ARN total de tejidos tumorales y nontoumorous de los 20 pacientes ccRCC se extrajo usando TRIzol reactivo (Invitrogen, Carlsbad, California, EE.UU.) de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. La transcripción inversa se realizó en un sistema de reacción de 20-l con 2 g de ARN total que había sido tratado con M-MLV transcriptasa inversa (Promega, Madison, Wisconsin, EE.UU.) para sintetizar cDNA de primera cadena de acuerdo con las recomendaciones del fabricante, seguido por amplificación de ADNc como se describió previamente. Las secuencias de los cebadores que se usaron para PCR en tiempo real para LASP-1 fueron los siguientes: (F) 5'-ATGAACCCCAACTGCGCC-3 'y (R) 5'-TCAGATGGCCTCCACGTAGTT-3'
Western Blot
.
la proteína total se aisló a partir de tejidos tumorales y nontoumorous de seis pacientes ccRCC utilizando el total equipo de extracción de proteínas (KeyGen, Nanjing, china). 30 g de proteína por carril se separó usando 12% de gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio y se transfirieron a una membrana de difluoruro de polivinilideno. La membrana se bloqueó en leche descremada al 5% durante 2 h y después se incubó con el anticuerpo contra la LASP-1 (1:1000, Abcam, Cambridge, Reino Unido) o β-actina (1:5000, Abcam, Cambridge, Reino Unido) a 4 ° C durante la noche. Después de lavar cuatro veces en solución salina tamponada con Tris con Tween-20, la membrana se sondeó con una peroxidasa de rábano picante (HRP) conjugada con anticuerpo secundario (1:2000, Proteintech Group, Chicago, Illinois, EE.UU.).
pequeños ARN de interferencia (siRNA) mediada por LASP-1 silenciamiento génico
la expresión de LASP-1 humano fue derribado utilizando ARNsi dúplex como la siguiente secuencia: 5'-AAGGTGAACTGTCTGGATAAG-3 ', 5'-3-CUUAUCCAGACAGUUCACCdTdT '. siRNAs control negativo (5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3 'y 5'-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3') dirigidos a las secuencias de ARNm desconocidas se utilizaron como controles. Todos los siRNAs se sintetizaron por GenePharma (Shanghai, China). Una búsqueda BLAST del genoma humano se verifica que las secuencias seleccionadas fueron específicos para los genes diana. Las células en la fase de crecimiento exponencial se sembraron en placas de seis pocillos a una densidad de 0,5 × 10
5 células /ml, se cultivaron durante 24 h y se transfectaron con 1 g de siRNA una vez que habían alcanzado 30 a 50% de confluencia según el protocolo recomendado por el fabricante. Fluoresceína (FAM) marcado con siRNA control negativo se utiliza para visualizar la eficiencia de transfección.
in vitro
migración análisis
Las células en medio libre de suero (1 × 10
se añadieron 5 células /200 l) a las cámaras superiores de cámaras de tamaño de poro Transwell 8 mm (Corning Star, Cambridge, Massachusetts, EE.UU.). Las cámaras inferiores se prepararon utilizando 10% de FBS como un quimioatrayente. Las células se dejaron migrar a través de las membranas porosas durante 20 horas a 37 ° C. Las células que habían migrado a través de la membrana y adheridos a la superficie inferior de la membrana se trataron con una solución de fijación /tinción (0,1% de cristal violeta, 1% de formalina y 20% de etanol) para la visualización. Para la cuantificación, las células se contaron con un microscopio en cinco campos seleccionados al azar bajo un microscopio de Nikon ECLIPS 80i en la magnificación de 400 ×. Se analizaron un mínimo de cinco cámaras de tres experimentos independientes.
El análisis estadístico
El software de IBM SPSS Statistics 19.0 se utilizó para llevar a cabo todos los análisis estadísticos. Se analizaron las diferencias entre las variables categóricas de significación estadística utilizando una prueba de ji cuadrado, mientras que las variables cuantitativas se analizaron mediante el test de Wilcoxon pareada o no apareado
t-test
. Univariante y multivariante de Cox de riesgos proporcionales de los análisis se utilizaron para evaluar los efectos de varios factores sobre el pronóstico. Se utilizó un análisis de Kaplan-Meier para evaluar la supervivencia y el log-rank test fueron utilizados para comparar la supervivencia de los pacientes entre los subgrupos. Todos los
P
valores fueron de dos caras, y
P
. & Lt; 0,05 se consideró estadísticamente significativa
Resultados
LASP-1 sobreexpresión en tejidos RCC detectados usando IHC
Para aclarar el papel fundamental de LASP-1 en la progresión del CCR, lo primero que examinó el nivel de expresión de la proteína LASP-1 utilizando IHC 216 en los tejidos tumorales y tejidos adyacentes nontumorous emparejados. Se encontró que LASP-1 de expresión se upregulated significativamente en los tejidos tumorales en comparación con los tejidos no tumorosas adyacentes emparejados (
P
& lt; 0,0001; las figuras 1A, B y C).
LASP-1 expresión de la proteína en los tejidos incluidos en parafina ccRCC (a) y los tejidos adyacentes nontumorous (B) mediante inmunohistoquímica (ampliación, 100 ×), en la que positiva LASP-1 mostró la inmunotinción de color marrón. análisis de Wilcoxon demostró que los tejidos tumorales mostraron significativamente mayor LASP-1 de expresión que los tejidos no tumorosas (C, n = 216). Western blot (D) y PCR en tiempo real (E, n = 20) análisis confirmaron los hallazgos en el análisis de inmunohistoquímica. El análisis de transferencia Western también mostró diferencial LASP-1 de expresión en las células humanas de riñón (HEK embrynal-293) y líneas celulares ccRCC (F). T se refiere a tejidos tumorales, mientras que P se refiere a peritumoral tejidos (nontumorous) en el panel D.
Verificación del diferencial de LASP-1 de expresión mediante Western blot y análisis en tiempo real PCR en tejidos y líneas celulares
Para verificar los resultados obtenidos por IHC, detectamos LASP-1 de expresión en los tejidos ccRCC 6 y sus tejidos adyacentes nontumorous emparejados (Figura 1D). Los resultados también revelaron aumentaron LASP-1 de expresión en los tejidos tumorales en comparación con tejidos nontumorous. a continuación, PCR en tiempo real se aplicó en 20 tejidos ccRCC y vinculado tejidos no tumorosas y también se encontraron niveles de ARNm de LASP-1 que se upregulated en los tejidos tumorales (Figura 1E). Por otra parte, se determinó que LASP-1 se expresó en 2 líneas celulares ccRCC y células de riñón embrionario humano (HEK-293), utilizando análisis de Western blot. Se detectaron consistentes con los resultados obtenidos en las muestras de tejido, los niveles más altos de LASP-1 en la línea celular más agresivo (786-0) que en la línea de bajo agresiva celular (A498) o 293 HEK-células (Figura 1F).
el aumento de expresión de LASP-1 se correlacionó con la progresión tumoral y mal pronóstico en pacientes ccRCC
las correlaciones entre LASP-1 de expresión y las características clínico-patológicas se analizaron mediante la prueba de chi-cuadrado. Como se resume en la Tabla 1, se encontraron correlaciones significativas entre LASP-1 de expresión y de cuatro parámetros clínicos, incluyendo el tamaño del tumor (
P
= 0,002), el estadio TNM (
P
= 0,005), la recurrencia estado (
P
= 0,006) y la muerte de estado (
P = 0,026
). La relación entre el grado de Fuhrman y LASP-1 de expresión mostró significación marginal (
P = 0,081
). Sin embargo, no hubo asociaciones estadísticas entre LASP-1 de expresión y el resto de parámetros, tales como la edad y el género.
A continuación, utilizando modelos de regresión de Cox univariante y análisis multivariados para evaluar la asociación entre la LASP-1 de expresión y el resultado en ccRCC pacientes. En el análisis univariante (Tabla 2), el tamaño del tumor, grado de Fuhrman, estadio TNM y LASP-1 upregulation se correlacionaron significativamente con una mala supervivencia global (
P
= 0,034, & lt; 0,0001, & lt; 0,0001 y = 0,003 , la supervivencia, respectivamente) y libre de recidiva (
P = 0,005
, & lt; 0,0001, & lt; 0,0001 y & lt; 0,0001, respectivamente) en pacientes con ccRCC. Entonces, los cuatro factores que se asociaron significativamente con el resultado (
P Hotel & lt; 0,05) en el análisis univariado fueron sometidos a un análisis multivariado. El análisis multivariado reveló que el grado de Fuhrman, estadio TNM, y LASP-1 regulación al alza fueron factores pronósticos independientes para la supervivencia global (
P = 0,001
, & lt; 0,0001 y 0,044, respectivamente) y la supervivencia libre de recurrencia (
P
= 0,002, 0,010 y 0,006, respectivamente) en pacientes ccRCC (Tabla 3). Por otra parte, el análisis de la curva de Kaplan-Meier indicó también que la regulación positiva de LASP-1 se asoció significativamente con peor pronóstico en pacientes con ccRCC (Figura 2 A y B).
LASP-1 silenciamiento la migración celular inhibida ccRCC
in vitro
se empleó
siRNA transfección para derribar LASP-1 de expresión en las células 786-0, que muestran alta endógena LASP-1 de expresión. Los efectos de los siRNA transfección en LASP-1 de expresión se confirmaron mediante análisis de transferencia Western. La cantidad de proteína LASP-1 se redujo obviamente en comparación con el que en las células de control negativo (Figura 3A). Además, transwell ensayo de invasión reveló que el silenciamiento LASP-1 de expresión se redujo drásticamente la movilidad celular en comparación con la de las células control (Figura 3C). Un desapareado
t-test
se utilizó para evaluar la diferencia entre 786-0 y células si786-0 en el número de células invadidas por campo (Fig. 3B), que reveló que el número de células invadidas por campo se redujo significativamente después de la caída de LASP-1 de expresión (
P Hotel & lt; 0,0001).
Western Blot se utilizó para verificar knock-down de LASP-1 de expresión en las células 786-0 de siRNA transfección (A). Se utilizó una prueba t no pareada para evaluar las diferencias en el número de células invadidas por campo entre las líneas 786-0 y si786-0 celulares (B). Transwell resultados para las líneas celulares 786-0 y si786-0 se muestran (C).
Discusión
En el presente estudio, se investigó LASP-1 de expresión en una serie de 216 tejidos ccRCC y comparación de estos datos con los obtenidos en ccRCC clínicamente establecida por primera vez. Los resultados revelaron que los niveles de expresión de proteínas de LASP-1 fueron más elevados en los tejidos ccRCC que en los tejidos no tumorosas emparejados, como se indica por IHC y validado mediante Western blot y PCR en tiempo real. Los análisis de asociación reveló que LASP-1 regulación positiva se asoció significativamente con mayor tamaño del tumor y el estadio TNM peor. En conjunto, estos resultados indicaron que la LASP-1 puede desempeñar un papel importante en la progresión ccRCC. Otros análisis pronósticos indicaron que la sobreexpresión de LASP-1 puede ser un factor pronóstico independiente en ccRCC. Sin embargo, se necesitan más estudios con muestras de gran tamaño para confirmar estos hallazgos y establecer el papel de LASP-1 para predecir el pronóstico de los pacientes con ccRCC.
Los datos recientes han demostrado que la alta LASP-1 de expresión en los cánceres es esencial para la proliferación de células de cáncer, la progresión y la metástasis [16]. Las células con alta expresión de LASP-1 muestran la vitalidad más fuerte y eran más susceptibles a la formación de lesiones metastásicas debido a su mayor capacidad para formar clones [17]. Estudios previos han informado que el silenciamiento LASP-1 expresión en mama, líneas celulares de cáncer de ovario y colorrectal conduce a la proliferación celular y la migración reducida [4], [14], [15]. Consistente con los resultados de dichos estudios, los resultados de la presente
in vitro
experimentos en líneas celulares ccRCC indican que LASP-1 de expresión es necesaria para la migración celular.
El mecanismo por el cual LASP- 1 afecta a la proliferación de células cancerosas y la migración sigue siendo poco clara. La migración celular y la asamblea controlada y desmontaje de las adhesiones focales son procesos de varios pasos y las características centrales muy integradas en la patología molecular del cáncer [18]. Hasta la fecha, más de 50 diferentes proteínas de adhesión que regulan la velocidad y la organización de la polimerización de actina y la rotación de adhesión focal en salientes han sido identificadas [19], [20]. LASP-1 se ha demostrado que interactúan con lipoma socio preferido (LPP) y zyxin, ambos de los cuales pueden influir en la dinámica de filamentos de actina [21]. Se produce la unión entre el dominio C-terminal SH3 de LASP-1 y los dominios ricos en prolina N-terminal de zyxin y LPP [4]. Zhao
et al
. ha informado de que mediada por transfección de genes LASP-1 sobreexpresión en células SW480 resultó en CRC fenotipos agresivos en las células cancerosas y promueve el crecimiento del cáncer y la metástasis [15]. Esta observación pone de relieve la importancia de LASP-1 en el cáncer
.
Los estudios recientes han demostrado que la LASP-1 está regulada positivamente transcripcionalmente en respuesta a la morfógeno Sonic Hedgehog [22]. La interrupción de la cascada de señalización Hedgehog conduce a una serie de trastornos del desarrollo y desempeña un papel clave en la formación de una variedad de cánceres humanos. En este contexto, es interesante observar que zyxin también ha sido identificado como un gen diferencialmente transcrito en varios tipos de cánceres que utilizan la tecnología de microarrays [15]. Grunewald
et al
. ha informado de que LASP-1 sobreexpresión media la migración humana de ovario de células de cáncer y la proliferación y las influencias zyxin localización [4]. Zyxin se localiza principalmente en las placas de adhesión focal y juega un papel central en la polimerización de filamentos de actina en células de mamífero. Zyxin silenciamiento en células HeLa resultados en forma significativa reducción en la formación de fibras de estrés de actina, mientras que bajo estiramiento cíclico, zyxin solamente se disocia de contactos focales y se acumula en el núcleo, sin afectar vinculin o filamentos de actina [6]. La disminución de la motilidad celular después de LASP-1 silenciamiento puede explicarse por la pérdida funcional de zyxin como una proteína de andamiaje que facilita la formación de complejos moleculares, promoviendo así la actina específica de sitio [8]. En el presente estudio, hemos derribado LASP-1 de expresión en la línea celular 786-0 y observó una mala capacidad de migración in vitro, que era consistente con los resultados de estudios anteriores.
Conclusiones
en resumen, se observó por primera vez que la LASP-1 fue aumentada en ccRCC, lo que implica que su importante papel en el desarrollo de ccRCC. LASP-1 sobreexpresión se asocia con tumores más grandes y fenotipos agresivos en ccRCC, y el silenciamiento de LASP-1 de expresión inhibió la migración de células de cáncer
in vitro
. Por lo tanto, LASP-1 puede ser un nuevo biomarcador de pronóstico y un objetivo terapéutico prometedor para ccRCC.