Extracto
Introducción
Hasta la fecha, un estudio de microscopía electrónica de los vasos linfáticos colectores no se ha llevado a cabo para examinar las primeras etapas de linfedema. Sin embargo, tales estudios histológicos podrían ser útiles para elucidar el mecanismo de aparición de linfedema. El objetivo de este estudio era aclarar los cambios que se producen en la recogida de los vasos linfáticos después de la linfadenectomía.
Métodos
El estudio se realizó en 114 muestras de 37 pacientes que desarrollaron linfedema de las extremidades inferiores después de recibir tratamiento quirúrgico de los cánceres ginecológicos y que acudieron a la Clínica Universidad de Tokio y hospitales afiliados a partir de abril de 2009 a marzo de 2011. los vasos linfáticos que no eran necesarios para la cirugía linfatico anastomosis venosa se recorta y posteriormente examinó mediante microscopía electrónica y microscopía de luz.
resultados
Con base en los hallazgos macroscópicos, se definieron los cambios histoquímicos en los vasos linfáticos que recogen la siguiente manera:, ectasia, la contracción, la esclerosis y el tipo normal (NECST). En el tipo ectasis, un aumento en la presión endolinfático fue acompañado por un aplanamiento de las células endoteliales de los vasos linfáticos. En el tipo de contracción, las células del músculo liso se transformaron en células sintéticas y promovieron el crecimiento de las fibras de colágeno. En el tipo de esclerosis, elementos fibrosos representaron la mayor parte de los componentes, los vasos linfáticos perdieron su transporte y las capacidades de concentración, y el lumen se estrechan o bien completamente obstruidas.
Conclusiones
El aumento en la presión dentro de los vasos linfáticos que recogen después de la linfadenectomía se acompaña de cambios histológicos que se iniciaron antes de la aparición del linfedema
Visto:. Mihara M, Hara H, Hayashi Y, Narushima M, Yamamoto T, Todokoro T, et al . (2012) patológicos Pasos de linfedema asociado con el cáncer: Los cambios histológicos en los vasos colectores linfáticos después de la linfadenectomía. PLoS ONE 7 (7): e41126. doi: 10.1371 /journal.pone.0041126
Editor: Arin Greene, el Hospital de Niños de Boston, Estados Unidos de América
Recibido: 2 Enero, 2012; Aceptado 19 de junio de 2012; Publicado: 24 Julio 2012
Copyright: © Mihara et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. La subvención fue proporcionada por un programa japonés de financiación para los investigadores líderes en el mundo de la próxima generación (programa NEXT, LS039). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
linfedema del miembro, que se desarrolla después de la linfadenectomía para el tratamiento del cáncer, es un aumento en el volumen del miembro enfermo causada por la acumulación subcutánea de un líquido rico en proteínas [1], [2]. Debido a que los fluidos linfáticos ya no se pueden transportar, la presión en los vasos linfáticos de recogida en las extremidades aumenta gradualmente, el flujo de la linfa se ralentiza [3] - [5], y el linfedema se desarrolla eventualmente. Cuando se prolonga la duración de la enfermedad, el linfedema puede convertirse en linfagiosarcoma. La esperanza de vida de un paciente con esta condición se limita a unos pocos meses a 2 años [6], [7].
En la actualidad, el mecanismo subyacente a la aparición de linfedema es desconocido, y un tratamiento aún no ha sido ser establecido para la prevención de la aparición de esta enfermedad. Sin embargo, una vez que se ha establecido el linfedema, se dice que la terapia física compleja que es el estándar de oro para su tratamiento [8] - [11]. Además, los tratamientos quirúrgicos como la anastomosis venosa linfática (LVA) [12], [13] y de los ganglios linfáticos del trasplante [14] Recientemente se han desarrollado, la ampliación de las opciones de tratamiento para aquellos casos en los que la terapia física compleja por sí sola es insuficiente. Sin embargo, las indicaciones y los no-indicaciones de tratamiento quirúrgico no han sido bien definidos [15].
Los linfáticos colectivos, que desempeñan un papel central en la aparición de linfedema, muestran una organización relativamente sencilla. Al igual que las venas, los vasos linfáticos de recogida presentan una estructura trilaminar, que consiste en una membrana interna, medial y exterior. La capa interna se compone de células endoteliales; la capa media, variando las proporciones de músculo liso; y la capa externa, una matriz extracelular que contiene haces de finos de fibras de colágeno y de elastina. Un adventicia incorporación de la microcirculación rica en grasas también está presente [16].
Un estudio de microscopía electrónica para examinar la recogida de vasos linfáticos del linfedema etapas temprana no se ha realizado. Sin embargo, estos estudios podrían ser útiles para la elucidación del mecanismo de la aparición del linfedema, el establecimiento de un método terapéutico, y el desarrollo de métodos preventivos. En este estudio, hemos investigado los cambios que se producen en la recogida de los vasos linfáticos después de la linfadenectomía mediante la realización de electrones y la luz (inmunotinción) estudios microscópicos de recogida de vasos linfáticos en el cuerpo humano.
El objetivo de este estudio era aclarar los cambios que se produjeron en pacientes 'recogida de vasos linfáticos después de la linfadenectomía hasta poco después de la aparición del linfedema.
Métodos
los pacientes
la evaluación histológica (inmunotinción y electrónica examen microscópico) de recogida de vasos linfáticos se realizó en 114 muestras de 37 pacientes que desarrollaron linfedema de las extremidades inferiores después de la intervención quirúrgica para los cánceres ginecológicos y que consultaron la Universidad de Tokio hospital y Saiseikai hospital general Kawaguchi entre abril de 2009 marzo de 2011 (Tabla 1 ). pacientes con linfedema de miembro superior fueron excluidos debido a que la tasa de progresión es diferente entre los linfedemas de miembros inferiores y superiores, como consecuencia de la gravedad. Los experimentos realizados en este estudio se llevaron a cabo con la aprobación de los comités de ética de la Universidad de Tokio y Saiseikai el Hospital General de Kawaguchi. Todos los pacientes dieron su consentimiento informado por escrito. Se examinaron 28 casos de cáncer de cuello uterino, 7 casos de cáncer de endometrio, y 2 casos de cáncer de ovario. La puesta en escena del linfedema se realizó de acuerdo al sistema de clasificación de la Sociedad Internacional de Linfología (ISL). Etapa 0 se refiere a una condición latente o subclínica, donde la inflamación no es evidente a pesar de deterioro de transporte linfático. Etapa I representa una acumulación temprana de fluido que es relativamente alta en contenido de proteínas y que cede con la elevación del miembro. Por otra parte, se puede producir picaduras en esta etapa. Etapa II significa que la elevación del miembro sola rara vez reduce la inflamación del tejido; picaduras es manifiesta. A última hora de la Etapa II, el miembro puede o no entrar en boxes como sobreviene la fibrosis tisular. Etapa III abarca la elefantiasis linfostática en el que es picaduras cambios en la piel y ausentes tróficos tales como acantosis, los depósitos de grasa y desarrollar el crecimiento verrugoso excesivo. Etapa 0 representaba el 4 casos (número de muestras: 15); Etapa I, 5 casos (18); Etapa II bis, 12 casos (36); Fase IIb, 10 casos (34); y la fase III, 6 casos (11).
El eje horizontal muestra las etapas del linfedema. El eje vertical muestra el porcentaje de cada tipo en los ejemplares muestreados en cada etapa de la enfermedad.
Recogida de muestras
Las pruebas se realizaron utilizando la recogida de vasos linfáticos que no necesitaba a anastomosar y fueron recortados durante la cirugía anastomosis venosa linfático. Se recogieron muestras de la extremidad afectada, es decir, desde los lados medial del muslo, la rodilla o el tobillo. Además, en el grupo de control normal, recogiendo los vasos linfáticos se tomaron muestras de las membranas intestinales recortados durante el trasplante libre yeyunal.
En el tipo de la normalidad, se encontraron redes microvasculares para nutrir las paredes en gran medida desarrolladas de los vasos linfáticos colectores. Las redes microvasculares se perdieron gradualmente con la progresión de las etapas de la enfermedad. Además, se encontró que la luz del vaso linfático que se dilatada en el tipo ectasis, que se asoció con un aumento en la presión endolinfático. Debido a los aumentos en las células musculares lisas y fibras de colágeno son las principales causas de la nubosidad y engrosamiento de la pared del vaso linfático, que se encontraron ser prominente en el tipo de contracción y el tipo de esclerosis. LE:. Linfedema
Clasificación de los tipos de recipientes de recogida del sistema linfático basa en los hallazgos macroscópicos intraoperatorios
En este estudio, se clasificaron los hallazgos macroscópicos observados bajo un microscopio quirúrgico en 4 tipos: los, ectasia, la contracción, y los tipos de esclerosis normales (NECST). Los detalles de la clasificación basada en los hallazgos macroscópicos se muestran en la Tabla 2. Se clasificaron los tipos de recolección de vasos linfáticos que se encuentran en cada etapa del linfedema y, a continuación examinamos las correlaciones entre los tipos y etapas dividiendo cada tipo por el número total de muestras recogido en cada etapa de la enfermedad
La primera fila:. Los resultados de la tinción de alfa actina de músculo liso (αSMA). En el tipo de la normalidad, de varias capas de células del músculo liso estaban presentes. En el tipo de ectasia, la capa de células del músculo liso fue moderadamente fina. En el tipo de contracción, una capa muy gruesa de músculo liso estaba presente directamente debajo del endotelio, y el lumen se redujo a un cierto grado. En el tipo de esclerosis, se redujeron los lúmenes. La segunda fila: Los resultados de la tinción podoplanin. El tipo normal fue positivo para la tinción podoplanin en el endotelio; el tipo ectasia fue muy positiva; el tipo de contracción, ligeramente positiva; el tipo de esclerosis, negativo.
Examen histológico
Los vasos linfáticos se tiñeron con hematoxilina-eosina y se examinan bajo el microscopio. Además, la inmunotinción se realizó con anticuerpo monoclonal de ratón podoplanin (Nichirei Biosciences, 413451, Tokio, Japón) y anticuerpo monoclonal de ratón α-SMA (DakoCytomation, M0851) con el fin de determinar la expresión de los marcadores histológicos vasculares correspondientes. Podoplanin, una membrana de podocitos glomerulares mucoproteina, se ha demostrado que localizar al endotelio de los vasos linfáticos [17].
Procesamiento de muestras para microscopía electrónica de barrido (SEM)
Los vasos linfáticos se fijaron en 2,5% de glutaraldehído en solución salina tamponada con fosfato a 4 ° C durante 1 semana, y después se lavó en tampón fosfato para eliminar la solución de fijación. A continuación, las muestras fueron post fija en 1% OSO
4 y se lavaron en tampón fosfato. Después, las muestras se deshidrataron en aumento en serie concentraciones de etanol (50-100%). A continuación, el etanol se sustituyó con soluciones mixtas de 100% de etanol y acetato de 3-metilbutilo. secado de punto crítico de las muestras se realizó posteriormente usando un JCPD-5 (JEOL, Tokio, Japón). Las muestras se colocaron en la muestra de bloques y se sometieron a revestimiento conductor (Pt) con un sistema de recubrimiento de precisión de grabado (Modelo 682; Gatan, CA, EE.UU.). Las muestras se examinaron con un microscopio electrónico de JSM-7001F (JEOL, Tokio, Japón).
hallazgos de microscopía electrónica de barrido (SEM). (A) células endoteliales de los vasos linfático que sobresale en el lumen linfáticos en el tipo normal. Bar = 10 micras. (B) Lymphangiectasia en sus primeras etapas. Las células endoteliales de los vasos linfáticos están ligeramente aplanados. Bar = 5 m. (C) Linfangiectasia Medio-etapa. Las células endoteliales de los vasos linfáticos son marcadamente aplanada. Bar = 10 micras. Lu; Lumen, CE; células del endotelio, SSM; células del músculo liso sintéticos, CSM; contráctiles células musculares lisas, CF; las fibras de colágeno.
(a) desmosomas en el tipo normal. En una estructura tridimensional, que se adhieren a las células endoteliales de los vasos linfáticos adyacentes. Bar = 2 m. (A ') imagen ampliada. Bar = 2 m. (B) Los desmosomas de las células endoteliales de los vasos linfáticos en el tipo ectasia. Las adherencias de célula a célula se han aflojado y desmontado gradualmente, de modo que las células se adhieren sólo en los puntos. Bar = 10 micras. (B ') imagen ampliada. Bar = 2 m. las células endoteliales (c) del sistema linfático en los vasos linfáticos que recogen en el tipo de esclerosis. Los desmosomas se desmontan, y las fibras de colágeno bajo el endotelio de los vasos linfáticos están expuestos en la luz del vaso linfático (flecha amarilla). Bar = 5 m. (C ') Las fibras de colágeno expuestas en la luz del vaso linfático (microscopia electrónica, SEM). las células endoteliales de los vasos linfáticos están ausentes, y fascículos de fibras de colágeno están expuestos en la luz del vaso linfático. Bar = 1 m. CE; células del endotelio, SSM; células del músculo liso sintéticos, CSM; contráctiles células musculares lisas, CF; fibras de colágeno.
Tratamiento de muestras para microscopía electrónica de transmisión (TEM)
Las muestras se procesaron de la misma manera que las de SEM de la etapa de fijación a través de las etapas de deshidratación que implican etanol. Después de que el etanol se sustituyó con óxido de propileno (PO), las muestras fueron infiltradas con resina epoxi [una mezcla de Epon812, anhídrido succínico dodecenilo, anhídrido nádico metilo, y 2,4,6-tri (dimetilaminometil) fenol] utilizando una serie de soluciones mixtas de PO y resina epoxi y, a continuación resina epoxi por sí solo. Las muestras se polimerizaron durante 3 días (35 ° C a 60 ° C). Las muestras se seccionaron a 80 nm, y las secciones ultrafinas resultantes se prepararon usando tinción convencional con acetato de uranilo y citrato de plomo. Las secciones fueron examinados con un microscopio electrónico JEM-1011 (JEOL, Tokio, Japón).
(a) el tipo normal. Están presentes en la capa media de los vasos linfáticos de recogida, como células de músculo liso contráctiles. células del músculo liso sintéticos son sólo parcialmente presentes. Bar = 10 micras. (B) cambios que afectan a las células del músculo liso en el tipo de contracción. células del músculo liso sintéticos migrar directamente debajo de las células endoteliales y proliferaron. Bar = 5 m. (C) células de músculo liso estimuladas sintéticos hiperplasia fibra de colágeno directamente debajo de las células endoteliales de los vasos linfáticos. Bar = 2 m. (D) células de músculo liso sintéticos. Un aumento en gránulos de glucógeno dentro de las células es evidente. (E) La periferia de las células musculares lisas sintéticos. gránulos de secreción están presentes en gran número. Bar = 500 nm. CE; células del endotelio, SSM; células del músculo liso sintéticos, CSM; contráctiles células musculares lisas, CF; fibras de colágeno, GG; gránulos de glucógeno (flechas verdes), SG; gránulos de secreción.
Resultados
Se encontró una fuerte asociación entre nuestra propuesta de clasificación de los tipos de recolección de vasos linfáticos en cada etapa del linfedema (NECST) y la clasificación de la etapa de linfedema ( Figura 1). Con el avance de las etapas del linfedema, se encontró un menor número de tipos normales entre las muestras recogidas. Sin tipo normal se tomaron muestras en la etapa III, la etapa más severa de la enfermedad. En contraste, el tipo de esclerosis aumentó gradualmente en número con la progresión de la enfermedad y fue el recogido principalmente en la etapa III. El tipo ectasis se encuentra comúnmente en los casos leves, tal como en las etapas I y II de la enfermedad, mientras que se encontró el tipo de contracción a ser común en los casos graves, tales como en las etapas II y III. Por lo tanto, la recogida de vasos linfáticos transformado gradualmente de un tipo a otro.
(a) fibras de colágeno en el tipo normal. Contráctiles células de músculo liso y fibras de colágeno se mezclaron juntos en la capa media. Bar = 10 micras. fibras (b) de colágeno en el tipo ectasia. La dilatación de los vasos linfáticos fue acompañada por una elongación de las fibras de colágeno, haciendo que el aspecto ligeramente engrosada. Bar = 10 micras. fibras (c) colágeno en el tipo de contracción. Una vez que se alargaron las fibras de colágeno, se hicieron varias capas y tortuoso (línea de puntos), en asociación con la hipertrofia de las paredes de los vasos linfáticos colectores. Bar = 5 m. CE; células del endotelio, sesm; células del músculo liso sintéticos, SYSM; células del músculo liso sintéticos, CSM; contráctiles células musculares lisas, CF; las fibras de colágeno.
(a) de tipo normal. Bar = 100 micras. (A ') Tipo de ectasia. La luz del vaso linfático se dilatan y completamente cubiertas de células endoteliales de los vasos linfáticos. Bar = 10 micras. tipo (b) la esclerosis. Bar = 100 micras. (B ') la pared del vaso linfático se espesó debido a la hiperplasia de los músculos lisos y fibras de colágeno. La luz del vaso linfático se estrecharon y como la forma de un agujero de alfiler. Bar = 10 micras.
La aparición de los vasos linfáticos asociados a cada etapa de linfedema se muestra en la Figura 2. En el tipo de la normalidad, se encontraron redes microvasculares que arrollan alrededor de las paredes linfáticos para nutrir el colector vasos linfáticos. Las redes microvasculares se perdieron gradualmente con la progresión de las etapas de la enfermedad. Además, se encontró que la luz del vaso linfático que se dilatada en el tipo ectasis, que se asoció con un aumento en la presión endolinfático. Los aumentos en las células del músculo liso y fibras de colágeno se han encontrado para ser las principales causas de la nubosidad y engrosamiento de la pared del vaso linfático y se observaron a ser prominente en el tipo de contracción y el tipo de esclerosis. A medida que avanzaba el linfedema, los vasos linfáticos se hicieron más difíciles, pierden elasticidad, y parecían perder la capacidad de moverse peristálticamente para transportar el líquido linfático.
Los hallazgos microscópicos de luz
Para examinar las células endoteliales linfáticas, nos manchado de la podoplanin endotelial de la proteína (Figura 3). Se encontró que el tipo normal a ser positivo para la tinción podoplanin en una capa del endotelio de los vasos linfáticos de recogida. Se encontró que el tipo de ectasia ser fuertemente positivo; el tipo de contracción, ligeramente positiva; el tipo de esclerosis, negativo. También usamos la tinción de α-SMA para examinar las células del músculo liso. En el tipo de la normalidad, de varias capas de células del músculo liso estaban presentes en una disposición circular en las capas mediales de los vasos linfáticos de recogida. En el tipo ectasis, como una adaptación a la dilatación de los vasos linfáticos, la capa de células del músculo liso en la capa media era moderadamente fina en algunos casos. Al igual que el tipo normal de varias capas de células del músculo liso estaban presentes. En el tipo de contracción, una capa muy gruesa de los músculos lisos estaba presente directamente debajo del endotelio de los vasos linfáticos, y un aumento en el tamaño de la capa de músculo liso fue acompañado por un estrechamiento de la luz de los vasos linfáticos. En el tipo de esclerosis, los lúmenes se redujeron de tal manera que tenían la forma de pequeños agujeros. En algunos casos, eran totalmente ocluida.
Electron hallazgos microscópicos
En cuanto a las células endoteliales de los vasos linfáticos, los del tipo normal, se encontró que sobresalen hacia la luz del vaso linfático ( la Figura 4a). En contraste, se encontró que las células endoteliales en el tipo ectasis a ser suave y no sobresalen dentro de la luz (Figura 4 b, c). Esta condición se conoce como "linfangiectasias." Las adhesiones focales (desmosomas) entre las células endoteliales adheridas fuertemente y ampliamente en el tipo normal, pero se debilitó y se adhiere sólo en parte en el tipo ectasis (Figura 5 a, b). En el tipo de la esclerosis, la adhesión entre las células endoteliales de los vasos linfáticos se desmonta por completo, y las fibras de colágeno debajo de las células endoteliales de los vasos linfáticos fueron expuestos en la luz del vaso linfático (Figura 5c).
En cuanto a la correcta células musculares, los del tipo normal, estaban presentes en la capa media de los vasos linfáticos que recogen como células de músculo liso contráctiles, que son un tipo habitual de diferenciado de células del músculo liso (Figura 6a). Las células musculares lisas sintéticos, que han aumentado las tasas de proliferación, migración y producción de matriz extracelular [18], también estuvieron presentes en pequeñas cantidades en la capa media del tipo normal. Por otra parte, las células del músculo liso sintéticos tenían folículos presentes en el citoplasma. En el tipo de contracción, las células musculares lisas sintéticas habían emigrado directamente debajo de las células endoteliales de los vasos linfáticos y habían proliferado (Figura 6b). Además, estas células musculares también había promovido la hiperplasia de las fibras de colágeno directamente debajo de las células endoteliales de los vasos linfáticos (figura 6c, d, e). Por otra parte, las células del músculo liso sintéticas habían proliferado en la capa media, estaban presentes entre las células del músculo liso contráctiles, y había promovido la proliferación de las fibras de colágeno. gránulos de glucógeno y gránulos de secreción se incrementaron en abundancia dentro de las células del músculo liso sintéticos.
En cuanto a las fibras de colágeno, los del tipo normal, estaban presentes en la capa media (Figura 7). Mientras tanto, en el tipo de contracción, las células musculares lisas sintéticas habían emigrado directamente en el lumen debajo de las células endoteliales de los vasos linfáticos (Figura 7b). Esto condujo a la formación de una gruesa capa de fibras de colágeno en el lumen. La capa gruesa de fibras de colágeno se convirtió tortuoso y estratificado en asociación con los cambios en los vasos linfáticos de recogida, que se había desplazado de la fase de expansión de la fase de contracción y por último a la etapa de fibrosis (Figura 7c). En el tipo de esclerosis, la pared del vaso linfático se espesó debido a la hiperplasia de los músculos lisos y fibras de colágeno. Además, la luz del vaso linfático se estrecharon y la forma de un ojo de aguja (Figura 8).
Discusión
Este estudio ha revelado que la progresión de la enfermedad en linfedema del miembro está acompañado por 1) el desarrollo de un alisado de las células endoteliales en la recogida de los vasos linfáticos, 2) un desmontaje de las adhesiones focales (desmosomas), 3) un crecimiento y la transformación de las células de músculo liso, 4) un engrosamiento de la membrana basal, y 5) una proliferación de fibras de colágeno. Este es el primer estudio para informar de los cambios en las células endoteliales y la membrana basal de los vasos linfáticos de recogida, transformación de células de músculo liso, y la proliferación de las fibras de colágeno durante el linfedema.
Hasta la fecha, sólo un pequeño número de informes han examinado los cambios que afectan a los tejidos normales y la recogida de los vasos linfáticos en el linfedema del miembro, de modo que los cambios patológicos en el linfedema siguen siendo desconocidos. En 1999, en un estudio mediante microscopía electrónica, Koshima
et al.
Informaron haber encontrado la atrofia de células del músculo liso en los vasos linfáticos colectores de pacientes con linfedema terminal [19]. En un estudio usando análisis de inmunotinción, Ogata
et al.
Informó la posibilidad de la transformación de células de músculo liso en la recogida de vasos linfáticos [20]. Nuestro informe es el primero de ellos con respecto a los cambios progresivos que se producen en la recogida de vasos linfáticos en el linfedema leve o moderada después de la linfadenectomía.
La luz de un canal linfático de recogida está normalmente cubierta por una capa de células endoteliales. Las células endoteliales están completamente envueltos por la membrana basal, que está rodeado por células de músculo liso y elementos fibrosos. Un gran número de vasos de nutrientes y los nervios no mielinizados penetrar en el vaso linfático desde el lado de la adventicia y hasta los músculos lisos directamente debajo del endotelio. Además, un número de válvulas tricúspide están presentes y formar un flujo unidireccional dirigido hacia el ángulo venoso [21], [22].
Recientemente, las contracciones espontáneas lentos se ha encontrado que se producen en los vasos linfáticos en una frecuencia de 2-4 veces por minuto; y estas contracciones activas se han encontrado para servir como la fuerza motriz para el transporte linfático [23] - [25]. Las condiciones que facilitan la aparición de contracciones activos incluyen un contenido muy alto de músculo liso en la pared del vaso linfático, la presencia de grandes cantidades de mitocondrias y glucógeno gránulos alrededor del núcleo, y la penetración de vasos de alimentación en la capa de músculo liso directamente debajo de la endotelio. Las funciones de los vasos linfáticos colectores están relacionados con el transporte y la capacidad de concentración. En este estudio, hemos clasificado los cambios en la recogida de los vasos linfáticos en 4 tipos diferentes.
El tipo normal consiste en la recogida de los vasos linfáticos sanos. Los vasos linfáticos de recogida se dividen en 3 capas, y las células endoteliales linfáticas rodean toda la circunferencia de la luz del vaso linfático. Las fibras de colágeno y los músculos lisos están presentes en la capa media.
El tipo ectasia es una condición que se encuentra poco después de la linfadenectomía. En la recogida de vasos linfáticos que han perdido su agujero situado hacia abajo después de la linfadenectomía, la presión aumenta notablemente endolinfático, y el flujo linfático se vuelve lento. Histológicamente, el aumento de la presión endolinfático fue acompañado por una dilatación en el lumen de los vasos linfáticos de recogida y por un aplanamiento de las células endoteliales de los vasos linfáticos. Los archivos adjuntos intercelulares (desmosomas) entre las células endoteliales también cambiaron gradualmente de fuerte a débil. Con el tiempo, estos archivos adjuntos intercelulares se perderán, y los elementos fibrosos estarán expuestas en el lumen del canal linfático recoger. Además, los músculos lisos en la capa media se sometieron a una transformación, con la diferenciación de células de músculo liso gradualmente cambiando en células musculares lisas sintéticos. A medida que la pared del vaso linfático dilatado, las fibras de colágeno se vuelven delgados y alargados.
En el tipo de contracción, el aumento constante de la presión endolinfático conduce a cambios compensatorios histológicos que afectan principalmente a las células del músculo liso. Debido a la elevación sostenida de la presión endolinfático, las células endoteliales de los vasos linfáticos siguen siendo suave. En términos de las células musculares lisas, algunas de las células del músculo liso sintéticos transformadas migrar directamente debajo de las células endoteliales, promoviendo la proliferación de las fibras de colágeno. Esto dio lugar a la formación de fibras gruesas de colágeno que se mezclen con las células del músculo liso en la capa media. En consecuencia, las células musculares lisas contráctil tendrían dificultades para contratación debido al impedimento por las fibras gruesas de colágeno, resultando en una disminución funcional en los vasos linfáticos de recogida. Lo mismo se aplica para las células musculares lisas de síntesis, ya que las cantidades crecientes de células de músculo liso y fibras de colágeno fueron acompañados por un aumento en la cantidad de fibras elásticas entre las células musculares lisas.
En el tipo de esclerosis, el adjuntos intercelulares entre las células endoteliales linfáticas se perdieron, provocando que el líquido linfático que fluye dentro de los vasos linfáticos colectores de escape exterior. La presión en los vasos linfáticos de recogida se mantiene en altos niveles en algunos casos, pero es baja en otros a causa de la fuga del fluido linfático. Este tipo se caracteriza por un aumento notablemente células de músculo liso y fibras de colágeno. Sin embargo, como la celulitis desarrollado, la cantidad de células del músculo liso en los vasos linfáticos de recogida disminuye, y los elementos fibrosos se convierten en los componentes principales. Como consecuencia, tanto la capacidad de transporte y la capacidad de concentración se pierden. El lumen de los vasos linfáticos era o bien se estrecharon notablemente o completamente ocluido, causando un empeoramiento adicional de la linfedema.
en respuesta al estrés exógeno debido al aumento de la presión endolinfático, las células del músculo liso en la recogida de vasos linfáticos se someten a una transformación de células del músculo liso "contráctiles" especializadas en funciones contráctiles a células de músculo liso "sintéticos", que desempeñan un papel importante en la remodelación de la estructura tridimensional de las paredes de los vasos linfáticos colectores. Las células de músculo liso que se someten a transformación proliferarán y migrar de nuevo y producirán factores de crecimiento, así como enzimas que degradan sustratos en la matriz extracelular. Tales funciones musculares lisas se consideran importantes en el mecanismo de curación contra el daño de los vasos linfáticos. Sin embargo, si este proceso continúa y se convierte en crónica, tiende a conducir a la patogénesis de enfermedades tales como el endurecimiento de los vasos linfáticos y a una disminución de su fuerza de contracción.
Las células musculares lisas "sintéticos" migran directamente por debajo del endotelio de los vasos linfáticos, donde proliferan y promueven la formación de lesiones que se caracterizan por el engrosamiento de la pared del vaso linfático. En este punto, los cambios son reversibles, y la fibrosis se desarrolla a menudo cuando la enfermedad continúa y se vuelve crónica o cuando las respuestas inflamatorias considerables se producen debido a la linfangitis y celulitis. Estos cambios en la recogida de los vasos linfáticos se denominan lymphosclerosis (Figura 8)
.
Las limitaciones de este estudio consisten en la posibilidad de que las diferencias en el proceso de la enfermedad entre el linfedema del miembro superior e inferior linfedema del miembro. Será necesario un examen más detenido de esta cuestión en el futuro. Además, la asociación entre los resultados de este estudio y la eficacia del tratamiento también podría ser utilizado como un tema en estudio. Por otra parte, el punto en el que un cambio es reversible o irreversible todavía no está claro.
Este estudio ha revelado que 1) el aumento de la presión endolinfático que se desarrolla después de una linfadenectomía se acompaña de cambios histológicos en la recogida de vasos linfáticos y 2 ) estos cambios se producen antes de la aparición del linfedema. Es importante para prevenir el agravamiento de linfedema por la supresión de los cambios degenerativos irreversibles en la recogida de vasos linfáticos comenzando intervenciones terapéuticas en las fases relativamente tempranas, tales como en las fases de dilatación y contracción. Los resultados de este estudio podrían conducir al esclarecimiento de la fisiopatología de la aparición de linfedema del miembro después del tratamiento del cáncer y para el desarrollo de un tratamiento radical.
Reconocimientos
Agradecemos a Makiko Haragi para la preparación de la ilustración en el presente informe y Takashi Takaki de JEOL Co., Makoto Enomoto, Suaki Kobayashi, Masami Hashidume, Tsuyoshi Oka de Histo Ciencia Laboratory Co., por su apoyo en el análisis microscópico.