Extracto
invasión de las células del cáncer y la metástasis son los factores pronósticos adversos más importantes para el cáncer de páncreas. La identificación de biomarcadores asociados con el resultado de cáncer de páncreas pueden proporcionar nuevos enfoques y objetivos para la terapia contra el cáncer. El objetivo de este estudio es examinar la relación entre la expresión de RhoT1, Smad4 y p16 y la metástasis y la supervivencia en pacientes con cáncer de páncreas. El análisis mostró que los altos niveles de expresión frente al citoplasma de RhoT1, Smad4 y p16 en tejidos de cáncer de páncreas tenían correlación negativa significativa con metástasis en los ganglios linfáticos (MNV) (
P = 0,017
,
P = 0,032
,
P = 0,042
, respectivamente). Sin embargo, no se observó una asociación significativa entre la invasión perineural (PNI) y la expresión de proteínas por encima de tres (todo el
P Hotel & gt; 0,05). Además, el análisis de supervivencia mostró que los bajos niveles de expresión de RhoT1 y Smad4 se asociaron significativamente con una peor supervivencia (
P = 0,034
,
P = 0,047
, respectivamente). En conclusión, estos resultados indican que los niveles bajos de expresión de RhoT1 y Smad4 se asociaron significativamente con MNV y la supervivencia más corta. RhoT1 puede ser considerado como un potencial nuevo marcador para predecir el resultado en los pacientes con cáncer de páncreas
Visto:. Jiang H, He C, Geng S, Sheng H, Shen X, Zhang X, et al. (2012) RhoT1 y Smad4 se correlacionan con metástasis de ganglios linfáticos y la supervivencia global en el cáncer de páncreas. PLoS ONE 7 (7): e42234. doi: 10.1371 /journal.pone.0042234
Editor: H. Fazlul Sarkar, Wayne Facultad de Medicina de la Universidad del Estado, Estados Unidos de América
Recibido: December 2, 2011; Aceptado: July 5, 2012; Publicado: 31 de julio 2012
Copyright: © Jiang et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. HJ es respaldados por los principales disciplina del Proyecto de Construcción de la Oficina de Salud de Pudong de Shanghai, china (Grant No: PWZxkq2010-05). HG es apoyado por China Nacional 863 Fundación Proyecto de Genómica del Cáncer (Páncreas Genómica) (Grant No: 1006AA02A302), respectivamente. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:. HS, XS, XZ, SZ, y HG son empleadas por el Centro Nacional de Ingeniería de biochip en Shanghai. No hay consultoría, patentes, productos en desarrollo o los productos comercializados. Esto no altera la adhesión de los autores a todas las políticas de PLoS ONE en los datos y materiales de uso compartido.
Introducción
pancreático adenocarcinoma ductal (PDAC) es la forma predominante de cáncer de páncreas, que ocupa el cuarto en causas relacionadas con el cáncer de la muerte [1]. Se estimó que los estadounidenses fueron diagnosticados 43140 y 36800 pacientes murió de cáncer de páncreas en los Estados Unidos en 2010 [2]. A pesar de los grandes esfuerzos clínicos y científicos, el pronóstico de esta enfermedad letal excepcionalmente no ha mejorado significativamente en las últimas décadas [2], [3]. La mediana de supervivencia después del diagnóstico es de 3-6 meses sin tratamiento, y la cirugía de resección y la mediana de supervivencia aumentó el tratamiento adyuvante de alrededor de 23 meses [4].
Numerosos estudios han encontrado que el RAS regula el crecimiento y metástasis de cáncer de páncreas Células. La familia Rho GTPasas es una subfamilia de las superfamilia Ras. Rho GTPasas se han notificado a contribuir a la mayoría de las etapas de iniciación y progresión del cáncer, incluyendo la adquisición de potencial ilimitado proliferación, la supervivencia y la evasión de la apoptosis, la invasión de tejidos y el establecimiento de las metástasis [5], [6], [7], [8 ], [9], [10], [11], [12]. La familia Rho GTPasas contiene 20 miembros. La mayor parte de lo que sabemos sobre el papel de las Rho GTPasas en la invasión de células de cáncer proviene de los estudios de los miembros prototípicos de RhoA, RhoB y RhoC, Rac1 y Cdc42. Sin embargo, poco se sabe acerca de las funciones de otros miembros de la familia menos caracterizados en el cáncer. Algunos estudios previos han revelado que RhoA y expresión RhoC con frecuencia se incrementaron en los cánceres humanos, mientras que a menudo es el regulado-RhoB. RhoT1 pertenece a la familia Rho GTPasa mitocondrial [13]. Sin embargo, la proteína RhoT1 se clasifica como GTPasas atípicos, ya que no está regulado como las otras GTPasas clásicos [14], [15]. Hasta el momento se sabe poco sobre el papel de RhoT1 en la progresión del cáncer. En un estudio anterior, hemos identificado un total de 1276 genes que se expresan diferencialmente en PDAC. Entre ellos, 691 genes están regulados y 585 genes son reguladas por los genes, incluyendo RhoT1, Smad4 y p16 [16]. Por lo tanto, estamos interesados en saber si el RhoT1 está implicado de manera similar en el desarrollo del cáncer.
Además, estudios previos han informado de que la mutación de Smad4 se identifica en aproximadamente el 50% de los adenocarcinomas de páncreas [17]. Un número de estudios han demostrado que la pérdida de Smad4 se observa generalmente en la carcinogénesis pancreática, y la inactivación de Smad4 se asocia con un mal pronóstico en el cáncer de páncreas [18], [19]. Del mismo modo, se ha demostrado que la pérdida de expresión de p16 se observa en el tumor de más de páncreas [20], [21], y constituye un acontecimiento clave en el proceso de múltiples etapas de la transformación de células ductal pancreático. Sin embargo, la importancia de p16 y la inactivación Smad4 para aspectos complejos y específicos de tejido de la progresión del cáncer de páncreas, tales como la angiogénesis y la metástasis, es menos conocido [22]. Además, hay relativamente pocos estudios que han examinado el posible papel de Smad4 y p16 en la progresión de MNV y PNI en el cáncer de páncreas.
invasión de las células del cáncer y la metástasis son pasos críticos en la progresión del cáncer de páncreas, y son el principales causas de la baja supervivencia en el cáncer de páncreas. La predicción de la invasión y la metástasis en los pacientes con cáncer de páncreas puede proporcionar importantes conocimientos sobre la progresión del cáncer de páncreas y el pronóstico. La identificación de biomarcadores asociados con el resultado de cáncer de páncreas pueden proporcionar nuevos enfoques y objetivos para la terapia contra el cáncer. Por lo tanto, hemos llevado a cabo este estudio para examinar la expresión de RhoT1, Smad4 y p16 en el cáncer de páncreas, y analizar si los patrones de expresión de RhoT1, Smad4 y p16 se correlacionan con el potencial metastásico y son predictivos de la evolución clínica de los pacientes con páncreas cáncer.
Resultados
Características de los pacientes
Como se muestra en la Tabla 1, la muestra consistió en 162 pacientes con un diagnóstico de cáncer de páncreas (102 hombres y 60 mujeres). La edad media al diagnóstico fue de 59 años de edad (entre un 34 a 85 años de edad). El tamaño tumoral medio fue de 4 cm (rango 0,5 a 14 cm). La mayoría de los tumores (117/162, 72%) estaban bien diferenciados, 8 (8%) fueron moderadamente diferenciado, y 31 (19%) fueron pobremente diferenciado. 80 (49,4%), los tumores se clasificaron como Comité Americano Conjunto sobre el Cáncer (AJCC) en estadio I, 80 como (49.4%) en estadio II, ninguno como estadio III y 2 (1,2%) como en la etapa IV. 83 (51,2%) de los 162 pacientes tenían PNI. 65 (40,1%) de los 162 pacientes tenían MNV, La mediana del número de ganglios linfáticos (LN) se examinaron 7. La mediana del número de los LN evaluados en los pacientes con ganglios positivos fue de 10 comparado con una mediana de 6 ganglios linfáticos en el node- pacientes negativos (
P
= 0,007).
las asociaciones entre los diversos factores clínico-patológicos y la Presencia de MNV y PNI
las asociaciones entre los distintos factores clínico-patológicos y la se analizó la presencia de MNV y PNI para identificar los factores de riesgo de MNV y PNI (Tabla 2). Estos factores incluyen: sexo, edad (& lt; 60 años o ≧ 60 años), la ubicación del tumor (cabeza o el cuerpo y trasero), diámetro largo del tumor (& lt; 4,0 cm o ≧ 4,0 cm), la diferenciación del tumor (pobre o moderada /bien). Localización del tumor se asoció significativamente con MNV (
P
= 0,03). No se encontró asociación significativa entre MNV y la edad, el género, la larga diámetro de la diferenciación del tumor y el tumor (
P Hotel & gt; 0,05 para cada uno). Además, no se observó una asociación significativa entre el PNI y la edad, sexo, localización del tumor, de largo diámetro de tumor y la diferenciación del tumor (todo el
P Hotel & gt; 0,05).
Expresión de RhoT1, Smad4 y p16 en el cáncer de páncreas y tejidos los tejidos Paracancerous
RhoT1 y tinción de p16 se localizaron en el citoplasma (Figura 1). Aunque, Smad4 se expresó principalmente en el citoplasma (Figura 1), algunos Smad4 se observó en el núcleo. Los niveles de expresión frente al citoplasma de RhoT1, Smad4 y p16 fueron más bajos en los tejidos de cáncer que los tejidos paracancerous (
P Hotel & lt; 0,0001,
P Hotel & lt; 0,0001,
P = 0,002
, respectivamente). Hubo una fuerte correlación entre la expresión Smad4 citoplasmática y nuclear (coeficiente de correlación de Spearman = 0,321;
P Hotel & lt; 0,0001). Sin embargo, no se observó diferencia significativa en la expresión Smad4 nuclear entre los tejidos de cáncer y tejidos paracancerous (
P
& gt; 0,05).
Paneles D, E y F muestran, respectivamente, la expresión positiva de RhoT1, Smad4 y p16 en los tejidos paracancerous. Todas las imágenes fueron tomadas a 200 × magnificación.
Las asociaciones entre los niveles de expresión de RhoT1, Smad4 y P16 y las características clinicopatológicas
El análisis mostró que el alto nivel de expresión citoplasmática de RhoT1 era correlación negativa significativa con MNV en tejidos de cáncer (
P
= 0,003). La diferencia siguió siendo significativa incluso después de ajustar por edad, sexo, localización del cáncer y de largo diámetro del tumor (
P = 0,017
). Del mismo modo, los niveles de expresión citoplasmática de Smad4 y p16 en tejidos de cáncer también se correlacionaron negativamente con MNV (
P = 0,032
,
P = 0,042
, respectivamente). Sin embargo, no hubo asociaciones significativas entre PNI y los niveles de expresión de tres proteínas (todos los
P Hotel & gt; 0,05; Tabla 3). Desde que se observó ninguna diferencia significativa entre los tejidos de cáncer y tejidos paracancerous, la expresión nuclear de Smad4 fue eliminado de ensayos adicionales a la asociación con las características clinicopatológicas. El análisis de regresión logística mostró que el nivel de expresión citoplasmática de RhoT1 en tejidos de cáncer actuado como un factor de riesgo independiente para la MNV (
P = 0,042
). Sin embargo, de acuerdo con el análisis, los niveles de expresión frente al citoplasma de Smad4 y p16 podrían no ser utilizados como factores independientes de riesgo de MNV (
P Restaurant & gt; 0,05). Además, los resultados mostraron que no se observó una asociación significativa entre los citoplasmáticos niveles de expresión de RhoT1, Smad4, p16 y características clínico-patológicas, que incluyen la edad, sexo, localización del tumor, el tamaño, la diferenciación del tumor y estadio AJCC (todo el
P
& gt; 0,05;. Tabla 4)
Además, se establecieron las curvas ROC para evaluar el valor diagnóstico potencial de estas proteínas para predecir entre las muestras con MNV y especímenes sin MNV. El análisis descubrió que el área bajo la curva ROC (AUC) para RhoT1 fue 0.629 [95%
intervalo de confianza gratis (
IC
) 0,541-0,718], el AUC de Smad4 fue 0.551 (95 %
IC
0.461 a 0,640) y el AUC para p16 fue 0,480 (intervalo de confianza del 95% 0,3