Extracto
Antecedentes
Las citocinas y quimiocinas en la unidad microambiente del tumor metastásico desarrollo y sus niveles séricos podría reflejar el inflamatoria en curso reacción en el sitio del tumor. Se necesitan nuevas herramientas altamente sensibles para identificar a los pacientes con cáncer colorrectal con alto riesgo de recurrencia que se deben supervisar más de cerca durante la post-quirúrgica seguimiento. Aquí se estudia si los marcadores inflamatorios circulantes podría ser utilizado para predecir la recurrencia en pacientes con CCR.
Métodos
Los niveles circulantes de las citocinas inflamatorias IL-1, IL-6, IL-10, TNFalfa, CCL2, CXCL8, VEGF y la proteína de fase aguda Pentraxina-3 se midieron por ELISA en muestras de suero preoperatorios obtenidos prospectivamente a partir de una cohorte de sesenta y nueve pacientes sometidos a resección quirúrgica para la etapa 0-IV CRC y asociados con la recurrencia de la enfermedad después de la operación.
resultados
Cox análisis multivariado mostró que los niveles altos combinados (≥ROC cortó-valor) de CXCL8, VEGF y Pentraxin3 se asociaron con un mayor riesgo de recurrencia de la enfermedad [HR: 14.28; IC del 95%: (3,13-65,1)] con independencia de la estadificación TNM. El análisis de Kaplan-Meier mostró que CXCL8, VEGF y los niveles Pentraxin3 se asociaron significativamente con una peor supervivencia (P & lt; 0,001).
Conclusiones
circulante mediadores inflamatorios predicen de manera eficiente la recurrencia postoperatoria después de la cirugía CRC. Por lo tanto, este estudio sugiere que su validación en ensayos clínicos a gran escala puede ayudar en la adaptación de la gestión CRC post-quirúrgica
Visto:. Di Caro G, H Carvello, Pesce S, M Erreni, Marchesi F, J Todoric , et al. (2016) circulantes mediadores inflamatorios como posibles marcadores de pronóstico de cáncer colorrectal humano. PLoS ONE 11 (2): e0148186. doi: 10.1371 /journal.pone.0148186
Editor: Ken-ichi Mukaisho, Universidad de Ciencias Médicas de Shiga, Japón
Recibido: 21 Septiembre, 2015; Aceptado 14 de enero de 2016; Publicado: 9 Febrero 2016
Derechos de Autor © 2016 Di Caro et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. Todo relevante los datos están dentro del papel y su archivo de información de apoyo
Financiación:. el trabajo fue apoyado por 16230 Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro de GDC. La fuente de financiación no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer colorrectal (CCR) es la principal causa de muerte por cáncer en los países desarrollados [1]. A pesar de los avances en las pruebas de diagnóstico y procedimientos quirúrgicos que por lo general tienen intención curativa, cerca de la mitad de los pacientes sometidos a cirugía de CCR con intención curativa experimentarán metástasis metacrónico y la consiguiente muerte [2]. Hasta la fecha Sistema patológica del tumor nodal Metástasis (TNM) sigue siendo el punto de referencia para la predicción de los pacientes con CCR que experimentarán progresión de la enfermedad, a pesar del núcleo del sistema original Dukes [3] no cambia sustancialmente. De hecho, la estadificación histopatológico carece de precisión y un porcentaje importante de pacientes con mayor riesgo de recurrencia de la enfermedad aún no se detectan con esta metodología [2] [4]. nuevos biomarcadores pronósticos de CRC permitirían la identificación del subgrupo de pacientes con alto riesgo de recaída del tumor que debe ser considerado para la vigilancia frecuente, el cribado diagnóstico y la intervención terapéutica.
Ha sido bien establecido que las células inflamatorias en el microambiente tumoral liberar mediadores inflamatorios que a su vez activan redes inmunes locales para promover el desarrollo y el crecimiento de las células malignas mediante el aumento de su proliferación y supervivencia, así como la angiogénesis [5] [6] [7-9]. Además, los mediadores inflamatorios, las quimioquinas es decir, junto con los factores angiogénicos son un desencadenante para el desarrollo de habilidades invasivas, ya que aumentan la motilidad células tumorales y la migración que finalmente resulta en la aparición de metástasis [8]. La interconexión entre la inflamación y la angiogénesis se explica por la capacidad de VEGF y quimioquinas tales como CCL2 y CXCL8 para reclutar leucocitos en el sitio del tumor que, a su vez VEGF productos y mediadores de la inflamación y por lo tanto amplificar la señal tumorigénico a través de un bucle autocrino y paracrino [8]. Las quimiocinas y citocinas se producen ampliamente en el microambiente tumoral, independientemente de los factores desencadenantes iniciales [8] y mediadores tales como IL-1b, TNFa e IL-6 directamente promovieron la progresión tumoral en modelos experimentales de cáncer colorrectal [8, 10].
los mediadores inflamatorios detectados en el suero de los pacientes podría reflejar la reacción inflamatoria en curso en el sitio del tumor. Consistentemente, los estudios basados en la población mostraron que los individuos con altos niveles circulantes de mediadores inflamatorios están en mayor riesgo de desarrollar CCR [11] [12, 13]. Por lo tanto, los niveles séricos de estos marcadores tienen el potencial de convertirse en un paradigma como pruebas de diagnóstico no invasivos para la detección de pacientes con CRC [14]. Sin embargo, pocos estudios sobre este tema se evaluó la capacidad de los mediadores de la inflamación que circula a identificar a los pacientes que van a desarrollar recurrencias posquirúrgicas y la metástasis metacrónico con respecto a las herramientas de pronósticos clínicos actuales para el CCR [15-17]. Por lo tanto, se necesitan estudios prospectivos bien diseñados para establecer mejor su relevancia clínica.
En este estudio, se muestrearon prospectiva de plasma preoperatoria de los pacientes sometidos a tratamiento quirúrgico de CRC en nuestra Institución y se evaluó si los niveles de citocinas y quimiocinas representados por la IL-1, IL-6, IL-10, TNF-alfa, CCL2, CXCL8, VEGF y la proteína de fase aguda Pentraxina-3 podría estar asociada con la recurrencia de la enfermedad postoperatoria en un estudio de seguimiento de 5 años.
material y Métodos
diseño de la matrícula y el estudio del paciente
69 pacientes que fueron diagnosticados con un tumor colorrectal, y se sometieron a cirugía radical consecutivamente en el hospital Humanitas Investigación con intención curativa entre abril de 2008 y agosto de 2009 se incluyeron en este estudio. Después paciente dio su consentimiento informado para la investigación, una muestra de sangre de cada paciente fue retirado en el momento del ingreso en el hospital y antes de la cirugía para ser procesado para la separación de plasma. Los investigadores que fueron cegados a los resultados de los niveles de los parámetros inmunológicos montan una base de datos clínicos mediante la recopilación de datos demográficos de los pacientes, los datos clínicos e histopatológicos que se registraron en el servidor de Intranet de la institucional. Tumoral clínica e histopatológica puesta en escena el momento del diagnóstico se determinó en todos los pacientes mediante la combinación de los hallazgos histopatológicos con los registros quirúrgicos y de imagen perioperatorio. La estadificación del tumor se clasifica de acuerdo con el American Joint Committee on directrices AJCC Cancer. Todos los grupos demográficos las variables del paciente, clínicas e histopatológicas se ensayaron para covarianza con niveles de mediadores inmunes (Tabla 1). Estas variables, junto con la cantidad de IL-1, IL-6, IL-10, TNF-alfa, CCL2, CXCL8, VEGF y de la proteína de fase aguda pentraxina 3, se ensayaron como predictores del resultado del paciente, para evaluar la probabilidad de tumor recae con respecto a la medida de los niveles sanguíneos de mediadores inmunes. Se definió el resultado de los pacientes con CCR como una variable incluyendo cualquier evento (n = 9) de las recurrencias locales del tumor (n = 1) o cualquier metástasis distante órgano-metacronos (n = 8), que se nombra supervivencia libre de enfermedad (DFS). La supervivencia de los pacientes se calculó como la supervivencia específica de la enfermedad (DSS) y se refería a ninguna muerte relacionada con la enfermedad sólo para CRC (n = 5). Para detectar o excluir cualquier recurrencias tumorales postquirúrgicos, los pacientes fueron sometidos toracoabdominal computarizada-tomografía, ecografía abdominal y radiografía de tórax que se realiza de acuerdo con los protocolos comunes para la vigilancia. El período de observación comenzó inmediatamente después de la intervención quirúrgica y la detección de la recurrencia del tumor o muerte relacionada con el tumor se calcula desde el diagnóstico hasta que fueron censurados datos. El tiempo medio de seguimiento de la cohorte estudiada fue de 56,33 meses (DE = 15,74 meses). Si el evento de la muerte no estaba relacionada con la enfermedad de CRC, tiempo de seguimiento fue detenido en el momento de la muerte del paciente que no fue considerado un evento de resultado. vigilancia tumoral postquirúrgico datos de seguimiento no han estado disponibles en 6 de cada 69 pacientes (8,7%) participaron en el estudio y por lo tanto se excluyeron del análisis de los resultados según las directrices anteriores [18]. Comité de Ética de la Investigación Clínica y Centro Humanitas aprobó el estudio, y el consentimiento informado por escrito médico de referencia obtenida de cada paciente antes de la cirugía.
Ensayos
Las muestras de plasma se centrifugaron a 3000 rpm durante 10 minutos y después se mantuvo a -80 ° C hasta que la evaluación de ELISA. Los niveles plasmáticos de IL-1, IL-6, IL-10, TNF-alfa, CCL2, CXCL8, VEGF fueron determinadas por kit disponible comercialmente sándwich inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) según las instrucciones del fabricante. PTX3 en plasma se ensayó con una "en casa" sándwich ELISA basado en la MNB4 anticuerpo monoclonal (anticuerpo de captura) y el conejo anti-suero (anticuerpo de detección) como se describe anteriormente [19]. El límite de detección es 100 pg /ml y interensayo variabilidad es 8% -10%. Los valores normales de PTX3 son & lt; 2 ng /ml. Los niveles de mediadores inmunes en las muestras de plasma de pacientes se determinaron mediante la correlación de cada uno de los duplicados de valor con una curva estándar sobre la base de una dilución en serie de 2 veces de IL-1 recombinante, IL-6, IL-10, TNF-alfa, CCL2, CXCL8, VEGF y PTX3 con concentración conocida.
El análisis estadístico
El análisis estadístico se realizó mediante el programa Epi Info (versión 3.4.3), el software estadístico StatsDirect (versión 2.5) y el software GraphPad Prism (versión 4.1). La asociación entre los valores inmunes mediador y Base de datos demográficos del paciente, las características clínicas e histopatológicas y características del tumor se estimó mediante análisis de regresión lineal. Para determinar mejor la asociación de cada mediador inmune y el pronóstico del paciente, se realizó un análisis de la curva operativa del receptor (ROC). Se definió el valor de corte de cada ROC distribución continua para predecir la aparición de recaídas de los pacientes. Un modelo de riesgos proporcionales de Cox se desarrolló para evaluar la ROC valor de corte de IL-1, IL-6, IL-10, TNF-alfa, CCL2, CXCL8, VEGF y PTX3 y otras características demográficas, clínicas e histopatológicas, en la predicción de la aparición de DFS. Para evaluar los factores de confusión, el análisis multivariante de Cox se realizó mediante la introducción de todas las variables con un valor de p inferior a 0,20 en el análisis univariado. Por un enfoque por pasos hacia atrás eliminación, las variables no significativas y sus interacciones no significativas, fueron retirados del modelo. Las curvas de Kaplan-Meyer de DSS se representaron, mientras que se utilizó la prueba de log-rank para comparar las curvas de cada subgrupo de pacientes con CRC. Para cada prueba sólo de p bilateral valores inferiores a 0,05 fueron considerados estadísticamente significativos.
Resultados
Demografía y características histopatológicas de pacientes con CRC incluidos en este estudio y su correlación con la evaluación cuantitativa de la preoperatoria los valores plasmáticos de mediadores inmunes se muestran en la Tabla 1. el análisis de subgrupos reveló que entre todos los mediadores inmunes solamente valores de VEGF IL-1b y un ligero aumento en avanzado estadificación TNM (P = 0,06 y P = 0,04, respectivamente) (Tabla 1). Curiosamente, sólo valores TNFa IL-1b y el aumento en los pacientes con altos niveles en sangre de CEA (≥5ng /ml) a la línea de corte generalmente empleado para este biomarcador, mientras que otros mediadores inmunes no estaban asociados con los niveles de CEA (tabla 1). A continuación, probamos los coeficientes de correlación lineal entre los valores plasmáticos continuos de marcadores inflamatorios tal como se muestra en la Tabla 2. El análisis de regresión lineal mostró que la IL-1b correlaciona en gran medida con el TNF-a (r = 0,94, P & lt; 0,001) de forma independiente de otro mediadores inmunes (Tabla 2). Además, los valores de CXCL8 independientemente linealmente correlacionados con los de IL-6, CCL2 y VEGF (r = 0,34, P = 0,006; r = 0,31 P = 0,01; r = 0,36 P = 0,003, respectivamente), mientras que IL-10 valores linealmente correlacionada solamente con las de VEGF (r = 0,39, P & lt; 0,001) de forma independiente de los otros marcadores inmunes (Tabla 1). Curiosamente, los niveles de PTX3 proteína de fase aguda no se correlacionaron con cualquiera de los marcadores inmunológicos estudiados (Tabla 1), lo que sugiere que PTX3 podría seguir diferentes vías de activación en pacientes con CCR en comparación con otros mediadores inmunes.
posteriormente, se investigó la conexión entre la línea de base (preoperatorio) los niveles plasmáticos de los mediadores inmunes y el riesgo de desarrollar recurrencias posquirúrgicas CRC. distribuciones continuas de los niveles plasmáticos de los pacientes de circulación de mediadores de la inflamación de acuerdo con posquirúrgica recurrencia de la enfermedad CRC se muestran en la Fig 1. Se encontró que los pacientes que no recayeron (n = 54) tenían concentraciones en plasma significativamente más bajos de IL-1 (P = 0,008), IL-6 (P = 0,01), IL-10 (P = 0,04), CXCL8 (p≤0.001), VEGF (p≤0.001) y TNF-alfa (P = 0,02) en comparación con aquellos que experimentaron recurrencia de la enfermedad CRC (n = 9) (Fig 1). Por el contrario, los valores CCL2 no cambiaron de acuerdo con el pronóstico de los pacientes con CRC y la proteína de fase aguda Pentraxina-3 sólo tenía una tendencia a aumentar (P = 0,11) entre los pacientes que experimentaron recurrencia de la enfermedad posquirúrgica (figura 1).
La cantidad de IL-1 (a), IL-6 (B), IL-10 (C), TNF-a (D), IL-8 (F), VEGF (G) aumentó significativamente en los pacientes que experimentado recaída de la enfermedad, mientras que la proteína de fase aguda Pentraxina-3 (H) mostró una tendencia a asociarse con un peor pronóstico. (E) los niveles de CCL2 no se asociaron con recaída de la enfermedad.
De acuerdo con estudios anteriores [20], para obtener un método reproducible y fiable para referencia el valor pronóstico de los biomarcadores, nosotros curvas ROC calculados para cada los marcadores inmunológicos de pacientes con CRC que tenían buen pronóstico (n = 54) frente a los que experimentaron recurrencia de la enfermedad (n = 9) durante el seguimiento (Fig S1). análisis del modelo gráfico ROC reveló mediadores inflamatorios con mejor sensibilidad que la especificidad tales como IL-1b (0,88 y 0,68), IL-6 (0,88 y 0,59), IL-10 (1 y 0,40), TNF-a (1 y 0,05), CCL2 (0,77 y 0,5), CXCL8 (1 y 0,64) y VEGF: (1 y 0,66) en los puntos de corte óptimos identificadas por el modelo (S1 Fig), mientras que PTX-3 tenía una mayor especificidad que la sensibilidad (0,55 y 0,90) (S1 Higo). Para mejorar nuestra comprensión de la importancia pronóstica de mediadores inmunes, se diseñó un modelo de Cox univariante pronóstico (Tabla 2) en base a los valores de umbral identificados por la curva ROC para cada marcador inflamatorio. En este modelo, los pacientes de CRC que tenían niveles más altos en plasma (valor ≥ROC) de IL-1 (P = 0,01), CXCL8 (P & lt; 0,001), IL-10 (P = 0,01), PTX3 (P = 0,002), IL -6 (P = 0,06) y VEGF (P & lt; 0,001) asociado con un peor pronóstico (Tabla 3), mientras que los niveles más altos de CCL2 (P = 0,31) y TNF-a (P = 0,89) (Tabla 3) no lo hicieron. Además, la prueba de la independencia de estos biomarcadores. Para evitar el sobreajuste del modelo de Cox [21, 22] debido a la cantidad relativamente baja de eventos (n = 9) en nuestra cohorte, cada una de mediadores inflamatorios se ha introducido por separado en un modelo multivariado incluyendo el estadio TNM o uno de otros mediadores inflamatorios (no datos mostrado). En estos modelos, se encontró que entre todos los mediadores inflamatorios que fueron significativas en el análisis univariado solamente CXCL8, los valores de CCL2 y VEGF se independiente y significativamente asociada con el pronóstico (datos no mostrados). En detalle, los altos niveles de CXCL8, VEGF y PTX-3 (valor ≥ROC) identificaron los subgrupos de pacientes con CRC [44,4% (28/63); 42,8% (27/63); 15,8% (10/63), respectivamente] que detecta de manera eficiente recidivas de la enfermedad [47,3% (9/19); 50,0% (9/18); 50,0% (5/5)]. Por lo tanto, según estos resultados se combinaron los niveles de CXCL8, VEGF y PTX-3 (valor ≥ROC de marcadores combinados) (Tabla 4) y para ajustar los factores de confusión y poner a prueba su independencia de pronóstico, se realizó un análisis multivariante de Cox, con respecto a los datos demográficos, clínicos y características histopatológicas (Tabla 4). Cox análisis multivariado mostró que los niveles más altos de (los valores) ≥ROC CXCL8, VEGF y PTX-3 combinados asociados con un peor pronóstico [HR: 14,28; IC del 95% (3,13 a 65,1), P & lt; 0,001] con independencia de la clasificación TNM y otras variables incluido en este modelo (Tabla 4). Combinado corte alto de CXCL8, VEGF y PTX-3 valores sólo estaba presente en el 11% (7/63) de los pacientes con CRC, pero este subgrupo identificado de manera eficiente el 71,4% (5/7) de los casos de recaída. Por el contrario, un corte bajo de los valores combinados de CXCL8 inflamatorias, VEGF y PTX-3 identificó un 38% (24/63) de los pacientes con CRC 0% (0/24) de los casos de recaída. En general, el valor predictivo para detectar recurrencias de la enfermedad de la puntuación combinada de CXCL8, VEGF y PTX-3 fue mejor en comparación con cada uno de sus valores independientes (todos P £ 0,05).
figura la figura 2 muestra las curvas de DSS de todos los pacientes investigados sub agrupan por los valores plasmáticos de CXCL8, VEGF, PTX-3 (valores ≥ROC) y el marcador inmunológico. Encontramos una asociación con una peor supervivencia entre los pacientes con CRC, con valores de CXCL8 (p = 0,008), el VEGF (p = 0,001), PTX-3 (P = 0,005) por encima del umbral de la República de China (valores ≥ROC). La puntuación inmunológico representado por valores de ROC combinados de CXCL8, VEGF y PTX-3 (baja, media, alta corte) tenía la capacidad de predecir significativamente peor supervivencia (P & lt; 0,001). Con una mejor eficiencia en comparación con los mediadores inmunológicos individuales
los valores de umbral ROC de IL-8, PTX3 y VEGF se calcularon en toda la cohorte (6,79 pg /ml, 31.97pg /ml, 6.29pg /ml, respectivamente) y se usaron como punto de corte para seleccionar alta y baja IL-8, PTX-3 y VEGF en pacientes con cáncer colorrectal. El marcador inmunológico baja fue definida por los valores lowIL-8-lowVEGF-lowPTX3 combinados. El marcador inmunológico alta fue definida por los valores highIL-8-highVEGF-highPTX3 combinados. puntuación intermedia se define por cualquier otro valor. Los valores por encima del punto de corte ROC se asociaron con peor supervivencia del paciente para CXCL8 (P = 0,008), PTX3 (P = 0,001), VEGF (P = 0,005) y la puntuación inmune (P & lt; 0,001)., En comparación con los de abajo ROC de corte
Discusión
en este estudio, se demostró que los mediadores inflamatorios en la sangre de pacientes con CRC recogidos antes de la resección quirúrgica podrían ser candidatos a biomarcadores para predecir la progresión del CCR postquirúrgica. Al caracterizar una serie de diferentes citoquinas que tuvimos la posibilidad de evaluar su relevancia pronóstica. Demostramos que CXCL-8, VEGF y el largo Pentraxina 3 fueron los mejores predictores de pronóstico en nuestro estudio CRC. Además, una puntuación de citoquinas basado en la combinación de los niveles de estos mediadores inmunes era independiente de la estadificación TNM convencional en la identificación de recidivas de la enfermedad post-operatorias.
En el presente estudio siguió las directrices de observación de la evaluación pronóstica marcadores tumorales [23]. Sin embargo, reconocemos algunos puntos débiles con el diseño del estudio. En primer lugar, se cuantificaron los niveles de mediadores inflamatorios antes de la cirugía, pero no durante el seguimiento. Sin embargo, estudios anteriores mostraron que los niveles de un marcador inflamatorio sistémico común y no específica como la PCR no cambiaron en los individuos a lo largo de los años [24, 25]. Además, se cuantificaron los niveles basales de mediadores de la inflamación el día antes de la cirugía y por esta razón el tipo de tratamiento quirúrgico no representa una variable de confusión, ya que no puede afectar los niveles de mediadores inflamatorios en nuestro estudio. En segundo lugar, no examinamos control pareado de donantes de sangre sanos ya que esto estaba más allá del objetivo de este estudio. En tercer lugar, reconocemos la cantidad limitada de pacientes con CRC incluido en nuestro estudio podría crear el sobreajuste los modelos de pronóstico. Sin embargo, el número de eventos requeridos para probar la independencia de los biomarcadores es todavía objeto de debate [22] y depende de la extensión del efecto pronóstico. número de nuestra cohorte del paciente limitada dependen de su diseño prospectivo y el corto espacio de tiempo de la inscripción del paciente, lo que disminuye los sesgos de selección e inconsistencias metodológicas por lo general asociados con grandes cohortes retrospectivos [26]. Además, se emplearon modelos de curvas ROC para generar datos reproducibles mediante la medición de la especificidad y sensibilidad que son útiles para comparar el capacidad diagnóstica de los marcadores biológicos en todos los estudios [14].
Para nuestro conocimiento, este es el primer estudio que abordar la relevancia pronóstica posquirúrgica de Pentraxina 3 en el CCR. PTX3 es un mediador inmune que pertenece a la familia altamente conservada de pentraxinas, así como la proteína C reactiva (PCR) [27]. Tiene un papel importante en los procesos homeostáticos tales como la remodelación tisular, la angiogénesis y las respuestas inflamatorias ([28], [27], [29] y se ha relacionado con la inflamación relacionada con el cáncer [30]. En los estudios clínicos previos, PTX3 era encontrado que aumentarse en otros tumores, como liposarcomas [31], glioma [32], de pulmón [20] y el cáncer de próstata [33] en comparación con los controles sanos emparejados [20, 33] o a hiperplasia benigna [33]. Sin embargo, ninguno de estos estudios vinculados niveles de PTX3 con recaídas tumorales posquirúrgicas. Además, nuestra gama de citoquinas era útil para investigar si mediadores inmunes se correlacionan entre sí en el plasma de pacientes con CRC humanos. la ausencia de covarianza entre Pentraxina-3 y otros mediadores inflamatorios explican su impacto independiente en el pronóstico, y sugiere además que la puntuación inflamatoria combinada podría aumentar el rendimiento de la detección de recurrencias posquirúrgicas. pesar de la fuerte correlación entre el TNF-a y IL-1b, estos mediadores asociados con el pronóstico del paciente en menor medida que los niveles de PTX3, que sugiere que estas citoquinas podrían tener un menor nivel de participación en la recidiva metastásica de CRC en comparación con PTX3. En otros estudios, PTX3 ha demostrado ser altamente inducida por LPS /TLRs [34, 35], que también puede inducir la expresión de CXCL8. En este contexto, es importante reconocer que el aumento de la PTX3 y sangre CXCL8 niveles en pacientes con recurrencia de la enfermedad en este estudio representan una mera evidencia fenomenológica de la reacción inflamatoria en el sitio del tumor. Si estos mediadores apoyan el proceso metastásico local y su focalización afectaría el crecimiento CRC fue más allá del objetivo de este estudio. Por lo tanto, nuestros datos muestran la regulación al alza de la PTX3 en suero en pacientes metastásicos CRC no está en conflicto con los informes mecanicistas anteriores [36] y, de hecho proporcionar evidencia adicional de que este mediador de alguna manera está involucrado en la reacción tumorigénico.
Junto con el VEGF, que inhibidor se utiliza actualmente como un factor antiangiogénico para el tratamiento de CRC en la etapa IV, CXCL8 es también un potente promotor de la angiogénesis que puede promover la vascularización en el sitio tumoral, la proliferación y la metástasis de las células cancerosas y mediar reclutamiento de leucocitos infiltrantes de tumores [37- 39]. Además, nuestros datos confirman los hallazgos anteriores sobre las capacidades de pronóstico de los niveles de VEGF [40, 41] y CXCL8 [42] que circula en pacientes con CRC que demuestra que este tipo de metodología es altamente reproducible.
Nuestros datos sugieren que la introducción de circulación de mediadores de la inflamación para la detección de la progresión de CRC post-quirúrgica sería identificar eficazmente individuos con alto riesgo de recurrencia de forma independiente de predictores de riesgo convencionales. CRC pacientes identificados por los altos niveles de los niveles plasmáticos de mediadores inflamatorios deben ser controlados más de cerca en el seguimiento, independientemente de su estado TNM que proporcionaría una herramienta adicional en el proceso de toma de decisiones para la proyección posquirúrgica. Para concluir, la PTX3 y CXCL8 cuantificación de plasma podría acoplarse con los niveles de VEGF para conseguir el mejor rendimiento de detección de recurrencia posquirúrgica de las muestras de sangre. Estos hallazgos, proporcionan el fundamento para el diseño de estudios clínicos a gran escala con el fin de confirmar la capacidad pronóstica de estos mediadores inflamatorios.
Apoyo a la Información
S1 Fig. curvas de análisis ROC-trama que comparan los pacientes en función de su recidiva posquirúrgica en los puntos de corte óptimos identificados por el modelo ROC para todos los mediadores inmunes solubles estudiados.
curvas ROC parcela en los puntos de corte óptimos para cada mediador inmune fueron calculados y probados por su capacidad de detectar recurrencias tumorales postquirúrgicos en función de su sensibilidad y especificidad. Sensibilidad y especificidad: IL-1 (0,88 y 0,68); IL-6 (0,88 y 0,59); IL-10 (1 y 0,40); TNF-a (1 y 0,05); CCL2 (0,77 y 0,5); CXCL8 (1 y 0,64); VEGF: (1 y 0,66); PTX-3: (0,55 y 0,90). de corte valores ROC: IL-1 (0,81 pg /ml), IL-6 (5,86 pg /ml), IL-10 (4,14 pg /ml), TNFa (49,72 pg /ml ), CCL2 (38,03 pg /ml), CXCL8 (7,01 pg /ml), VEGF (39,03 pg /ml), PTX3 (13,68 pg /ml)
doi:. 10.1371 /revista .pone.0148186.s001 gratis (PDF)
Reconocimientos
Giuseppe Di Caro es apoyado por iCare beca de Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro (AIRC).
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.