Las células primarias proporcionan una información muy precisa y resultados relevantes en la investigación, sirviendo como los modelos celulares más ideales para una amplia variedad de investigaciones, desde la biología celular y la fisiología fundamental, biología del desarrollo, mecanismos de la enfermedad, para la detección de drogas y terapéutica desarrollo. Sin embargo, las células primarias no crecen indefinidamente en cultivo y son muy difíciles de cultivar. Por lo tanto, los investigadores tienden a utilizar las células inmortalizadas por su programa de investigación.
Las células inmortalizadas permiten a los investigadores a utilizar el mismo material constante a través de un proyecto de investigación, sin necesidad de establecer nuevas culturas, debido a que estas células inmortalizadas tienen una mayor vida útil envergadura y mantener el genotipo y el fenotipo marcadores del tejido de origen. La utilización de un servicio de inmortalización celular ayuda a los investigadores a evitar este problema y les ofrece la posibilidad de un suministro casi ilimitado de células que se pueden utilizar durante toda la duración de un proyecto de investigación de todo.
La inmortalización exitosa de varias células primarias se implementa mediante el uso de diferentes genes y agentes. inmortalización celular se puede hacer de muchas maneras; y el servicio personalizado está disponible en el mercado para ayudar a generar líneas celulares inmortalizadas. Hay muchos métodos de inmortalización de células de mamíferos dentro de los entornos de cultivo. Algunos de estos métodos son los siguientes:
La expresión de hTERT
hTERT el único que puede inmortalizar las células sin causar cambios asociados con el cáncer o la alteración de las propiedades fenotípicas. células humanas primarias que hasta ahora han sido establecidos por la expresión forzada de hTERT solo incluyen fibroblastos, células epiteliales pigmentadas de la retina, células endoteliales, células escamosas esofágicas, células epiteliales mamarias, queratinocitos, osteoblastos y células nestina positivas del páncreas.
Un obstáculo importante para la inmortalización de células humanas primarias y el establecimiento de líneas celulares humanas es la senescencia de los telómeros controlado. senescencia Telomere controlado es causada por el acortamiento de los telómeros que se produce cada vez que las células humanas somáticas se dividen. Pero los investigadores han demostrado que la transferencia de un ADNc de hTERT exógeno, que codifica la subunidad catalítica de la telomerasa humana, se puede utilizar para prevenir acortamiento de los telómeros, superar la senescencia de los telómeros controlado, e inmortalizar células humanas primarias
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La transformación viral
método de transformación viral es otra manera de eludir la senescencia celular. El más utilizado y el mejor entendido de esta clase de genes virales es Simian Virus 40 antígeno T grande (SV40). el antígeno T grande de SV40 se une a una serie de proteínas (más importantes son p53 y Rb) que, cuando funciona normalmente, son reguladores negativos de la división celular. Del mismo modo, el uso de siRNA a inactivo p53 y /o Rb también puede iniciar duración de la vida celular ilimitado. Otros oncogenes incluyen c-Myc, Ras y el VPH 16 E6 /E7 y su introducción, del mismo modo, se puede inmortalizar eficazmente genes cells.Viral primarias, incluyendo el virus de Epstein-Barr (EBV) y el virus 40 (SV40) antígeno Simian T puede inducir inmortalización. genes virales alcanzar la inmortalización mediante la inactivación de los genes supresores de tumores que ponen las células en un estado senescente replicativa.
inactivación de genes de supresión tumoral
descubrimientos recientes han encontrado que la co-expresión de hTERT subunidad catalítica combinada con p53 o RB siRNA, pueden inmortalizar con éxito las células epiteliales de ovario humano. Al mismo tiempo, la sobreexpresión de Ras o Myc T58A mutantes también se han encontrado para ser capaz de inmortalizar algunos tipos de células primarias. Este método permite un modelo de célula más auténtica con un fondo genético más definido.
Servicios inmortalización celular personalizada
Creative Bioarray puede proporcionar servicios de inmortalización celular personalizados. Con años de experiencia en la inmortalización celular, la compañía es ahora capaz de inmortalizar con éxito células de humano, ratón, bovino y el perro, el uso de diferentes agentes de inmortalización o genes. El servicio personalizado inmortalización puede extender significativamente la capacidad replicativa de las células diana, lo que ayuda a ahorrar tiempo y dinero laboratorio.