Extracto
Antecedentes
Virus del papiloma humano (VPH) es un factor causal para el carcinoma de células escamosas de amígdalas (TSCC) y los pacientes con VPH positivo (VPH
+) TSCC haber una mejor el resultado clínico que los que tienen el VPH negativo (VPH
-) TSCC. Sin embargo, dado que no todos los pacientes con VPH
+ TSCC responden al tratamiento, los biomarcadores adicionales son necesarios, junto con la condición de VPH para predecir mejor la respuesta al tratamiento y para individualizar el tratamiento. Con este fin, hemos examinado si el número de infiltrarse citotóxico tumor y las células T reguladoras en TSCC correlacionada con la condición de VPH y el resultado clínico.
Métodos
La formalina fijo parafina embebido TSCC, analizados previamente para el VPH ADN, derivado de 83 pacientes, fueron divididos en cuatro grupos dependiendo de la condición de VPH del tumor y el resultado clínico. Los tumores fueron teñidas mediante técnicas de inmunohistoquímica y se evaluaron para el número de infiltrarse citotóxicos (CD8
+) y normativo (Foxp3
+) las células T.
Resultados
Un alto CD8
+ infiltración de células T fue significativamente correlacionado positivamente a una buena evolución clínica, tanto en pacientes con VPH
+ y VPH
- TSCC pacientes. Del mismo modo, un alto CD8
+ /Foxp3
+ TIL relación se correlacionó con una supervivencia libre de enfermedad a 3 años. Por otra parte, el VPH
+ TSCC tenía en comparación con el VPH
-TSCC, un mayor número de infiltrarse CD8
+ células T
+ y Foxp3.
Conclusiones
en conclusión, existe una correlación positiva entre un alto número de infiltrarse CD8
+ y el resultado clínico indica que CD8
+ pueden contribuir a un resultado clínico beneficioso en pacientes TSCC, y potencialmente pueden servir como un biomarcador. Asimismo, el CD8
+ /Foxp3
+ proporción de células potencialmente se puede utilizar para el mismo fin
Visto:. Näsman A, Romanitan M, Nordfors C, Grün N, Johansson H, L Hammarstedt , et al. (2012) tumor infiltrante CD8
+ y Foxp3
+ Los linfocitos se correlaciona con el resultado clínico y el Virus del Papiloma Humano (VPH) Situación en el cáncer amigdalar. PLoS ONE 7 (6): e38711. doi: 10.1371 /journal.pone.0038711
Editor: Joseph Califano, Escuela de Medicina John Hopkins, Estados Unidos de América
Recibido: 7 Febrero, 2012; Aceptado: 11-may de 2012; Publicado: 12 Junio 2012
Derechos de Autor © 2012 Näsman et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyada por la Sociedad sueca del cáncer (TD, 100258), el Consejo Sueco de Investigación médica (TD, TR, K2011-56X-15282-07-6), la Sociedad del cáncer de Estocolmo (TD, 101081), la Fundación Ida y Henning Perssons (TD), el Instituto Karolinska (TD, TR) y el Ayuntamiento de Estocolmo (TD, TR, SEM, 2010067). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:. Co-autor Torbjörn Ramqvist es un miembro del Consejo Editorial PLoS ONE. Esto no altera la adhesión de los autores a todas las políticas de PLoS ONE en los datos y materiales de uso compartido.
Introducción
Estudios recientes de Europa y los EE.UU. han informado de un aumento en la incidencia de escamosas de la orofaringe El carcinoma de células (CCCA), en particular para el carcinoma de células escamosas de amígdalas (TSCC). Este incremento se ha atribuido a un aumento de la prevalencia de la infección por el virus del papiloma humano (VPH) [1], [2], [3], [4]. De acuerdo con ello, un aumento de 7 veces en el VPH-positivo (VPH
+) TSCC, en paralelo a una disminución de VPH-negativo (VPH
-) TSCC se ha demostrado en los pacientes en Estocolmo, Suecia, los tres últimos décadas [3] y una tendencia similar se ha demostrado en los EE.UU. [2]. Es importante destacar que también, HPV se ha demostrado que es un factor pronóstico favorable para los pacientes con OSCC incluyendo TSCC [5], [6], [7], [8]. Sin embargo, no todos los pacientes con HPV
+ TSCC fue bien y por lo tanto, a pesar de HPV por sí mismo es un marcador pronóstico importante, se necesitan biomarcadores adicionales en TSCC para predecir mejor la respuesta al tratamiento antes del tratamiento individualizado se puede implementar en la práctica clínica.
se ha sugerido que el VPH
+ y VPH
-TSCC son dos entidades de la enfermedad tumoral diferentes con diferentes características del tumor y del paciente. Mientras que los tumores VPH asociados, incluyendo el VPH
+ TSCC son impulsados por los oncogenes virales, por ejemplo, E6 y E7, y tienen un menor número de mutaciones celulares, VPH
-TSCC desarrollar por acumulación de cambios genéticos causados principalmente por factores ambientales como el tabaquismo [9]. Como antígenos extraños, E6 y E7 pueden actuar como dianas potenciales para una respuesta inmune contra los tumores VPH inducida y
in vitro
estudios han demostrado que las células T aisladas de HPV
+ cáncer cervical puede reconocer y matar E6 y las células tumorales que expresan E7 [10]. Por otra parte, se detectan las células T específicas de tumor en pacientes con cáncer más cervicales, aunque en niveles insuficientes baja y [11], [12] y la presencia de linfocitos infiltrantes de tumor (TIL) se ha relacionado con un mejor pronóstico [13], [ ,,,0],14]. Esto también se ha observado para otros tipos de tumores con ninguna asociación viral conocida [15], [16]. Sin embargo, los TIL puede actuar como una espada de doble filo. Mientras que una infiltración pronunciada de CD8
linfocitos + se ha relacionado con un pronóstico favorable en muchos tumores malignos, el papel de la infiltración de células T reguladoras (Tregs) (define a menudo como Foxp3
+ linfocitos) es a menudo la inversa [17] . Células T reguladoras pueden promover la progresión tumoral, y el aumento de los niveles de células T reguladoras se han observado en pacientes con una variedad de tumores y vinculada a un peor pronóstico [18], [19], aunque hay excepciones donde la infiltración de Treg se ha relacionado con un pronóstico favorable [ ,,,0],20], [21]. Sin embargo, el papel de la infiltración de células CD8
+ y Foxp3
+ linfocitos tiene, a nuestro conocimiento, no se ha investigado en TSCC en correlación con el estado de resultados y el VPH paciente.
el propósito de este estudio fue examinar la presencia de tumor infiltrante CD8
+ y Foxp3
+ T-células en TSCC en relación con el resultado clínico y el estado de VPH del tumor, y para establecer si estos TIL puede potencialmente ser utilizado en la clínica como biomarcadores ya sea solo, o junto con el estado del VPH del tumor para predecir el resultado clínico.
TSCC con (a) bajo y (B) de alta CD8
+ infiltración y (C) y baja (D) de alta Foxp3
+ infiltración.
Materiales y Métodos
Declaración de Ética
el estudio fue aprobado por el Comité Ético del Karolinska institutet, Estocolmo, Suecia, de acuerdo con los permisos éticos 2005 /431-31 /4, 2005/1330/32 y 2009/1278/31/4. escrito el consentimiento informado se obtuvo de todos los participantes en el estudio.
A) número de CD8
+ TIL, B) Número de Foxp3
+ TIL y C) los CD8
+ /Foxp3
+ proporción de células. "Bueno" y "malo" denota el resultado clínico. Además de los cuatro grupos TSCC definidos en la sección de Métodos, también se han comparado diferentes combinaciones de grupos. Por lo tanto, "el VPH
+ buena" corresponde al grupo A; "VPH
+ pobres" al grupo B; "VPH
- bueno" para el grupo C; "VPH
- pobre" para el grupo D; VPH
+ para los grupos A + B, el VPH
- a los grupos C + D; "Bueno" para los grupos A + C; y "pobres" a los grupos B + D. Con el fin de visualizar mejor los detalles en la parte inferior de la Figura 1C la parte superior del diagrama incluye el bigote superior (en una proporción de 80) se omitió.
A) HPV
+ TSCC y B) del VPH
-TSCC pacientes estratificados por el número de células CD8
+ TIL. Alta y baja denota CD8
+ TIL contar por encima y por debajo de los valores medios de 33 para el VPH
+ TSCC y 4,4 VPH
-TSCC. C) VPH
+ TSCC y D) del VPH
-TSCC pacientes estratificados por la proporción de CD8
+ /FoxP3
+ proporción de células. Alta y baja denota CD8
+ /FoxP3
+ proporción de células arriba y abajo 1.
Pacientes y material
La cohorte consistió en todos los pacientes, diagnosticados 2000- 2006 con TSCC (CIE-10 C09.0-9), que fueron tratados con la intención de curar en el hospital Universitario Karolinska, Estocolmo, Suecia, y tenía embebidos en parafina biopsias de tumores pre-tratamiento disponibles. El tratamiento consistió en radioterapia acelerada (RT) (1,1 + 2,0 Gy /día durante 4,5 semanas, la dosis total: 68 Gy) o RT convencional (2,0 Gy /día, por 6.5-7 semanas, la dosis total: 68 Gy) o, en cuatro casos, la quimioterapia de inducción seguida de RT concomitante (CRT). Después del tratamiento, los pacientes fueron seguidos por examen clínico cada 3 meses durante los primeros 2 años y cada 6 meses el 3er año.
Los datos sobre la presencia de los tipos de VPH de alto riesgo (presencia de ADN de VPH por PCR) y p16
estado INK4a (por inmunohistoquímica) se obtuvieron a partir de estudios anteriores [3], [7], [22] y los pacientes fueron divididos en 4 grupos (AD) al inicio del estudio (para más detalles, véase las Tablas 1 y 2); (A) una muestra aleatoria (n = 31) de todos los pacientes (n = 109) con el VPH
+, p16
INK4a positivo (& gt; 75% p16
INK4a células tumorales positivas) (p16
+) tumores con una buena evolución clínica (definida como ninguna recaída y vivos 3 años después del diagnóstico); (B) todos los pacientes (n = 21) con el VPH
+, p16
+ tumores con una mala evolución clínica (definida como una recaída en la enfermedad y /o muerto de la enfermedad dentro de los 3 años después del diagnóstico); (C) todos los pacientes (n = 11) con el VPH
-, p16
negativo INK4a (p16
-) Los tumores con un buen resultado clínico; (D) todos los pacientes (n = 20) con el VPH
-, p16
- los tumores con un pobre resultado clínico (Tabla 1). Una muestra de 31 de los 109 tumores originales en el grupo A fue elegido para obtener un número más similar de pacientes de cada grupo de más estudios de TIL, ya que este grupo dominado con 68% del número total de tumores. Los pacientes con VPH
+, p16
- (n = 17) y el VPH
-, p16
+ tumores (n = 4) fueron excluidos del análisis adicional para obtener grupos homogéneos ya sólo se incluyen el VPH
+ TSCC expresar VPH E6 /E7, ya que p16
INK4a expresión de VPH
+ tumores se considera una indicación de E7 expresión [23]. También se excluyeron los pacientes que mueren de otras causas que TSCC. Todo el VPH
+ TSCC fueron HPV16
+ con excepción de un tumor con HPV33 y HPV56 con uno.
La inmunohistoquímica
Se empleó un método de estreptavidina-biotina peroxidasa de serie en 4 micras fijados con formalina, embebido en parafina, secciones usando los anticuerpos monoclonales de ratón anti-CD8 (dilución, 1:40; clon 4B11; Novocastra Laboratories) y anti-Foxp3 (dilución 1:100, clon 236A /E7; eBioscience). Todas las secciones se incubaron posteriormente con un anticuerpo anti-ratón secundario biotinilado (1:200, Vector Laboratories, Burlingame, CA, EE.UU.), seguido de la incubación con la avidina-biotina-complejo-PO utilizando el kit VECTASTATIN® Elite® ABC (Vector Laboratories) y desarrollado en DAB.
El CD8
+ y Foxp3
+ infiltración de linfocitos tumor fue evaluada por dos investigadores, cegados para el resultado clínico, cada uno contando las células en 10 campos de alta potencia seleccionados al azar ( 40 ×) por muestra. Se informó que el valor medio para cada tumor. La relación de tumor infiltrante CD8
+ y + Foxp3 se calculó para cada tumor individual, la media de estas proporciones se calculó por subgrupo.
Análisis estadístico
Pruebas para la comparación de los datos continuos se realizaron utilizando modelos de regresión lineal. Los resultados se presentaron como diferencias de medias o los odds-ratios junto con el intervalo de confianza del 95%. Las comparaciones de las características del paciente y del tumor entre los diferentes grupos en las Tablas 1 y 2 se realizaron con la prueba exacta de Fisher (dos colas). Todos estos análisis se realizaron en el STATA11 (StataCorp). A p-value≤0.05 fue considerado significativo.
supervivencia libre de enfermedad (DFS) se definió como el tiempo desde la fecha de diagnóstico de la fecha de la última vez conocido que el paciente estaba libre de la enfermedad o de la fecha de la recurrencia de la enfermedad (local, regional o recurrencia distante). La muerte sin recurrencia documentada fue censurado en la fecha de la muerte. Se utilizaron las curvas de Kaplan-Meier para presentar los datos de supervivencia y se utilizó la prueba de log-rank para comparar las curvas de supervivencia. En el multivariado analizar, se utilizó un modelo de riesgos proporcionales de Cox para ajustar por covariables. se informaron los valores de p de dos caras. Estos análisis se realizaron en SPSS (IBM SPSS Statistics, v20).
Resultados
Los parámetros clínicos y patológicos de los pacientes y tumores
Los detalles de todos los pacientes y sus tumores se muestran en las Tablas 1 y 2. Como se describió anteriormente, los pacientes se dividieron en 4 grupos de estudio en función de la condición de VPH tumor y el resultado clínico dentro de los 3 años. La única diferencia significativa entre los diferentes grupos de estudio fue que los pacientes con VPH
: tumores y el buen resultado clínico tenía un estadio clínico más bajos que los pacientes con mala evolución clínica (p = 0,005).
No hubo diferencias en relación con cualquiera de los parámetros clínicos estudiados entre la muestra de 31 pacientes y la población total de 109 pacientes con VPH
+ TSCC y buen resultado clínico (Tabla 2).
el número de células CD8
+ TIL Se correlaciona con la condición de VPH y el resultado clínico de los pacientes con TSCC
TSCC pacientes con un buen resultado clínico tuvo un número significativamente mayor de células CD8
+ TIL en sus tumores (Figura 1), que los que tienen pobres resultados clínicos, independiente del estado de HPV tumor (media de 50,4 y 12,8 respectivamente, p & lt;. 0.001), (Tabla 3 y la Figura 2A). Por otra parte, al estratificar por el VPH, VPH
+ TSCC, de pacientes con un buen resultado clínico, tenía más CD8
+ TIL que los de los pacientes con mal resultado clínico (media de 61,4 y 21,0 respectivamente., P = 0,002 ), (Tabla 3). El número medio de células CD8
+ TIL también fue significativamente mayor en el VPH
-TSCC de pacientes con buena respuesta clínica, en comparación con el VPH
-TSCC de pacientes con mal resultado clínico (media de 19,4 y 4,7 respectivamente. , p = 0,001).
Por otra parte, el VPH
+ TSCC tenía una media significativamente mayor número de tumor infiltrante CD8
+ linfocitos en comparación con el VPH
-TSCC (media de 45,6 y 9,9 respectivamente. , p & lt; 0,001) (Figura 2A). Esta diferencia fue aún significativa cuando se ajusta por el pronóstico (p = 0,001).
Para estudiar la correlación entre CD8
+ TIL y DFS en VPH
+ TSCC pacientes, se realizó un análisis de Kaplan-Meier . VPH
+ y VPH
-TSCC pacientes se dicotomizaron basado en el valor de la mediana (33 y 4,4, respectivamente) de las células CD8
+ TIL. Como se ha demostrado en pacientes Figura 3A con el VPH
+ tumores y un alto número de CD8
+ TIL tuvieron una supervivencia acumulada de 84% comparado con el 55% de los pacientes con bajo número de células CD8
+ (p = 0,02 ). También se observaron tendencias similares de supervivencia acumulada (64% y 36%, respecitvely) para el VPH
- pacientes, aunque estas diferencias no fueron estadísticamente significativas (Figura 3B). En particular, para los pacientes con VPH
+ TSCC las curvas de Kaplan-Meier se calcularon sobre la muestra de CSET perteneciente al grupo A y todos TSCC del grupo B (Figura 3A).
El número de Foxp3
+ TIL se correlaciona con la condición de VPH en TSCC
Un número significativamente mayor de Foxp3
+ TIL (Figura 1) se observaron en el VPH
+ TSCC en comparación a la de VPH
-TSCC (media de 33,2 y 14,7, respectivamente, p & lt;. 0,001) (Figura 2B). Al ajustar para el pronóstico, esta diferencia fue todavía significativa (p = 0,001). Sin embargo, no hay diferencias en los niveles de Foxp3
+ TIL fueron observados en los tumores de pacientes con un buen o mal resultado clínico (media de 27,9 y 24,6, respectivamente.) (Tabla 3).
Una alta CD8
+ /Foxp3
+ Ratio está vinculado a un buen resultado clínico en pacientes con TSCC
Como una medida de la cantidad relativa de citotóxicos y células T reguladoras en los tumores, la relación del tumor infiltrarse CD8
+ y Foxp3
+ células se calculó para cada tumor. Un alto CD8
+ /Foxp3
+ proporción de células es una indicación de que las células T reguladoras son una minoría y por lo tanto menos propensos a eclipsar la función de las células T citotóxicas. Para los pacientes con un alto TSCC CD8
+ /Foxp3
+ relación se correlacionó positivamente con un buen resultado clínico cuando se ajusta por el pronóstico (p = 0,04) (Tabla 3). Sin embargo, la diferencia en relación con el pronóstico en CD8
+ /Foxp3
+ TIL relación no fue significativa cuando los pacientes con VPH
+ TSCC o VPH
-TSCC se analizaron por separado, aunque la tendencia fue similar a la observada en pacientes TSCC en general.
para estudiar la correlación entre una alta /baja CD8
+ /Foxp3
+ relación de TIL y DFS para TSCC, se realizó un análisis de Kaplan-Meier. VPH
- y HPV
+ TSCC pacientes se clasificó según la base de un CD8
+ /Foxp3
+ TIL proporción superior o inferior a 1. Como se ha demostrado en pacientes con VPH Figura 3D
y -TSCC un alto CD8
+ /Foxp3
+ relación TIL tenía una supervivencia acumulada del 73% en comparación con el 28% de los pacientes con una baja CD8
+ /Foxp3
+ relación TIL (p = 0,03) . Del mismo modo, el VPH
+ pacientes TSCC con un alto CD8
+ /Foxp3
relación + TIL tenía una supervivencia acumulada más alta (82%) que aquellos con una baja CD8
+ /Foxp3
+ relación de TIL (54%, p = 0,04) (Figura 3C).
Correlación entre los parámetros clínicos, CD8
+ y Foxp3
+ células y 3 años en pacientes con SLE TSCC
Cuando CD8
+ y Foxp3
+ TIL valores para todos los TSCC, estratificada por el VPH, fueron analizados por edad, sexo o estado clínico, no se encontró correlación (datos no mostrados).
Las razones de riesgo (HR) se calcula por separado para el VPH
+ y VPH
-TSCC, mediante pruebas tanto univariante y multivariante (tabla 4). Para el VPH
+ TSCC la razón de riesgo para un elevado número de células CD8
+ células fue de 0,27 (p = 0,029), mientras que para el VPH
-TSCC la razón de riesgo para un alto CD8
+ /Foxp3
+ proporción era de 0,27 (p = 0,048). Para determinar si CD8
células CD8 + y
+ /Foxp3
+ cociente fueron factores pronósticos independientes, un análisis multivariante de Cox se realizó con el estadio clínico, la edad y el sexo como covariables (Tabla 4). Para el VPH
+ TSCC, tanto en el número de células CD8
+ células y la edad se correlacionó significativamente de forma independiente a 3 años DFS (p = 0,034 yp = 0,009, respectivamente.). Para el VPH
-TSCC tanto CD8
+ /Foxp3
+ relación y la etapa fue significativamente correlacionados de forma independiente a 3 años DFS (p = 0,023 yp = 0,039, respectivamente.). Del mismo modo, un alto CD8
+ /Foxp3
+ relación correlacionado con un DFS de 3 años, tanto en el análisis univariados y multivariados también para el VPH
+ TSCC (HR 0,33, p = 0,048 y HR 0,23, p = 0,015, respectivamente) (datos no mostrados).
Discusión
En este estudio, se encontró una correlación significativa entre un alto CD8
+ infiltración de células T y el resultado clínico para los pacientes con el VPH
+ y VPH
-TSCC, así como entre un alto CD8
+ /Foxp3
+ TIL relación y la supervivencia libre de enfermedad para los pacientes con VPH
+ y VPH
-TSCC. Además, hemos demostrado una correlación entre ambos tumor infiltrante CD8
+ y Foxp3
+ células T a la condición de VPH en TSCC.
El hecho de que CD8
+ infiltración fue más pronunciada y influenciado positivamente el pronóstico en este estudio para el VPH
+ TSCC, puede ser una razón importante por la cual la mayoría de los VPH
+ TSCC tiene un buen resultado clínico en comparación con el VPH
-TSCC [6], [7 ]. Esto estaría en línea con los estudios experimentales que muestran la importancia del sistema inmune para luchar contra el VPH
+ carcinoma de cabeza y cuello de células escamosas (HNSCC) [24]. El resultado es también en concordancia con muchos estudios sobre tumores de otros sitios por ejemplo de colon y cáncer de cuello uterino [13], [14], [15], [18]. En particular, en el cáncer cervical, donde la gran mayoría de los tumores son HPV
+, tanto un alto número de CD8
+ TIL y una relación
+ /reguladora de las células T de alta CD8 se correlaciona con la ausencia de metástasis de los ganglios linfáticos [14]. Un resultado similar también ha sido publicado por CECC, donde Ogino y sus colegas demuestran una correlación positiva entre un alto CD8 infiltración
+ de células T y provocan la supervivencia específica [25]. Además, la presencia de células T específicas de HPV16 en HPV
+ HNSCC se demostró recientemente, aunque correlación con el pronóstico no se investigó [26]. La fuerte correlación positiva entre CD8
+ TIL y la buena evolución clínica de los pacientes con TSCC indica que la evaluación de CD8
+ TIL podría ser utilizado como un biomarcador pronóstico adicional en combinación con la condición de VPH del tumor.
Se demostró además que un alto CD8
+ /Foxp3
+ proporción de células T correlacionó significativamente con una supervivencia libre de enfermedad en pacientes con VPH ambos
+ y VPH
-TSCC. publicaciones anteriores han relacionado Foxp3
+ TIL a un peor pronóstico en, por ejemplo, cáncer de ovario y de mama [16], [18]. Por otra parte, un alto porcentaje de células T reguladoras se ha correlacionado con una pobre supervivencia a los 5 años en el cáncer cervical [27]. Sin embargo, también hay casos en los que Foxp3
+ TIL han sido vinculados a un pronóstico favorable, como por ejemplo, en el cáncer de colon, linfoma de Hodgkin y HNSCC [20], [21], [28]. El resultado obtenido en el presente estudio indica que la infiltración de células T también son de importancia para el resultado clínico de los pacientes con HPV
-TSCC, aunque posiblemente en menor medida. relación de + de células T La evaluación de CD8
+ /Foxp3
podría así también ser utilizado como un marcador pronóstico clínico para los pacientes con HPV
+ o HPV
-TSCC.
Es importante destacar que la estimación de CD8
+ y Foxp3
+ TIL por IHC se pueden realizar en las unidades de patología en los hospitales. El estado del VPH de TSCC ya se evalúa de manera rutinaria en algunas clínicas, por ejemplo, en el Hospital Universitario Karolinska, en Estocolmo, y si se utiliza en combinación con la evaluación de las células CD8
+ y Foxp3
+ TIL en unidades de patología, se puede obtener una mejor predicción del resultado clínico. Sin embargo, el tamaño del campo y evalúa los valores de corte tienen que ser definidos con precisión.
Además, hemos observado que el VPH
+ TSCC tenía una infiltración significativamente mayor de ambos CD8
+ y Foxp3
+ células que VPH
-TSCC. Esto no fue inesperado dado que el VPH
+ TSCC expresa antígenos virales extranjeros. De hecho, los datos indican que, a pesar de la defensa inmune ha fallado en impedir el desarrollo de la HPV
+ TSCC, todavía hay una diferencia inmunológica entre HPV
+ y HPV
-TSCC.
es importante tener en cuenta que la presencia de TIL en TSCC no es suficiente para el rechazo del tumor. Sin embargo, se ha demostrado en un modelo de ratón que una defensa inmune intacto es importante para una holgura completa del tumor tras el tratamiento de radiación [24]. Además, es posible que la irradiación puede activar la respuesta inmune tanto contra restantes células viables del tumor original y contra la metástasis de los ganglios linfáticos.
Recientemente, muchos biomarcadores tumorales se han explorado con respecto al pronóstico para pacientes con HNSCC [ ,,,0],29], [30], [31], [32]. Sin embargo, en la mayoría de estos estudios, el estado del VPH de los tumores no fue tomada en cuenta y, a menudo los tumores de diferentes subsitios CECC fueron agrupados juntos cuando biomarcadores se correlacionó con el pronóstico. Los resultados del presente estudio demuestran la importancia de los tumores que separan en función de la condición de VPH. Además, en estudios de este tipo, los tumores deben también ser estratificados en función de subsitio tumor, ya que, por ejemplo, la supervivencia global de los pacientes con CECC varía en función tanto de la condición de VPH y subsitio tumor.
Existen algunas limitaciones en el presente estudio. En primer lugar, se trata de un estudio retrospectivo con todos los pacientes con diagnóstico de TSCC en Estocolmo durante 2000-2006, y tratados con intención curativa. Sin embargo, es importante tener en cuenta que el tratamiento durante este período se estandarizó con RT convencional /acelerado. Además, las publicaciones anteriores, el análisis de la evolución clínica de los pacientes incluidos en el presente estudio, no han demostrado diferencias en la evolución clínica de los pacientes con cáncer de orofaringe dependiendo de tratamiento [33], [34].
En segundo lugar , la mayoría hoy en día son TSCC VPH
+ con un resultado clínico favorable para los pacientes. Por lo tanto, este grupo se redujo en el presente estudio de la aleatorización. Por otro lado, no fuimos capaces de demostrar diferencias significativas entre la muestra de estudio y el material total en este grupo. Otra limitación es el número escaso de pacientes del VPH
- grupos, aunque todos los pacientes se incluyeron con esta característica. Para estudiar mejor el VPH
Población -TSCC, otros centros médicos deben ser incluidos.
Por último, no hemos evaluado si el tumor infiltrante CD8
+ y Foxp3
+ células están dirigidos contra tumoral específica asociada antígenos o ensayó para CD8 funcional
+ utilizando por ejemplo, granzima B. Además, dado que Foxp3, aunque en niveles bajos, se puede inducir de forma transitoria en las células CD4
+ y CD8
+ células T tras la estimulación, todo Foxp3
+ TIL puede no ser Tregs [35]. Sin embargo, para el propósito de este estudio, es decir, para encontrar marcadores clínicamente relevantes y fácilmente identificables, esto no es de importancia, aunque sería de interés para abordar estas cuestiones en otros estudios.
En conclusión, tumor infiltrante CD8
+ y Foxp3
+ en las células TSCC muestran diferentes perfiles en función de la condición de VPH del tumor y el resultado clínico. Por lo tanto, la combinación de la presencia de CD8
+ células T y /o CD8
+ /Foxp3
+ proporción de células con el VPH, pueden ser de valor pronóstico aditivo y para un mejor tratamiento de los pacientes individualizar.