PTEN es una fosfatasa lipídica, que convierte el fosfatidilinositol-3, 4, 5-trifosfato (PtdInsP3) en fosfatidilinositol-4, 5-bifosfato (PtdInsP2) y la señalización dependiente de antagoniza phosphoinositide 3-quinasa (PI3K). Nedd4-1 (célula precursora neural expresa, desarrollo las reguladas 4-1) fue el primero ligasa E3 estar implicado en PTEN ubiquitinación. Nedd4-1 puede catalizar la mono- y polyubiquitination de PTEN, que conduce a la importación nuclear de PTEN y PTEN degradación, D de este modo regular el crecimiento axonal en las neuronas.
Anterior in vitro e in vivo los resultados muestran que la Nedd4 familiar ligasas E3 Nedd4-1 y Nedd4-2 juegan un papel conservado evolutivamente en la regulación de la morfogénesis axonal.
en primer lugar, se muestra que los límites de los niveles de proteína PTEN Nedd4-1 por la modulación de la actividad de mTORC1, un complejo proteico que controla la síntesis de proteínas y el crecimiento celular.
a continuación, Nedd4 familiar E3 ligasas Nedd4-1 y Nedd4-2 promover el crecimiento axonal en las neuronas del sistema nervioso central de los mamíferos. La expresión, la ubiquitinación, la localización o actividad de la fosfatasa de PTEN no se cambia.
contraposición, PTEN regula negativamente la expresión Nedd4-1 a nivel de traducción. Y que los mamíferos y Nedd4-1 Nedd4-2 regulan el crecimiento axonal.
Nuestros datos demuestran que ligasas E3 Nedd4 familiar promueven el crecimiento axonal y la ramificación en el cerebro de los mamíferos en desarrollo, wherePten no es un sustrato relevante. En su lugar, PTEN controla el crecimiento de la neuritis mediante la regulación de la expresión Nedd4-1.
homeostasis retinoide es crítico para el desarrollo embrionario normal. factores reguladores clave que median los efectos pleiotrópicos de RA incluyen varias clases de RA de unión a factores de transcripción, los receptores del ácido retinoico RARa, RARB, y RARg. SIRT1, un NAD + nucleares deacetilasa dependiente de la proteína, es el miembro más conservada de la familia de las sirtuinas de enzimas.
En primer lugar, se muestra que la SIRT1 de? Deficiencia se asocia con defectos de señalización RA y desarrollo elevadas en ratones. Hemos identi? Cado tanto CRABPI y CRABPII como proteínas hiper-acetilado en SIRT1 embrionarias de ratón nulo? Fibroblastos (MEFs) en un etiquetado de isótopos estables mundial por los aminoácidos en cultivo celular (SILAC) basado en el análisis de Lys acetilación.
A continuación, se examinó si SIRT1 podría interactuar físicamente con CRABPs. Se analizaron las localizaciones subcelulares de HA-CRABPII en WT y KO SIRT1 MEFs por inmuno? Fluorescente CRABPII tinción es un portador de la AR celular que se transloca desde el citoplasma al núcleo en la AR vinculante para activar los receptores nucleares con AR.
se demuestra que la acetilación mediada por RA ofCrabpii en K102 es esencial para su acumulación nuclear y la posterior activación de la señalización de la AR. SIRT1 interactúa con y deacetylates CRABPII, la regulación de su localización subcelular.
Por último, la supresión de SIRT1 conduce a un aumento de la diferenciación inducida por RA mESC.
En resumen, hemos demostrado que a través de CRABPII desacetilación, SIRT1 juega un papel vital en la regulación de la señalización celular y pluripotencia RA mESC. Este SIRT1 /CRABPII /cascada de señalización proporcionará una manera de estudiar las interacciones genético-ambientales que afectan el desarrollo animal RAR.