Extracto
PLZF es un represor de la transcripción, que desempeña un papel crítico en el desarrollo, la espermatogénesis y la oncogénesis. Down-regulación de PLZF se ha encontrado en varias líneas de células tumorales. No ha habido prácticamente ningún estudio del tejido de la expresión de PLZF en el cáncer de próstata (CaP). PCA es una enfermedad heterogénea, la mayoría de los cuales son indolentes y no letal. Actualmente no hay biomarcadores que distinguen indolente de CaP agresivo; Por lo tanto, existe una necesidad urgente de tales marcadores para proporcionar apoyo a la decisión clínica. Este estudio tuvo como objetivo investigar la expresión de PLZF por inmunohistoquímica en diverso grado, así como CaP metastásico y correlacionar la alteración de la expresión PLZF con CaP agresividad. Se estudiaron un total de 83 CaP primaria a partir de biopsias, CaP metastásico 43 y 8 pares de CaP primario y metastásico de prostatectomías radicales con disección de los ganglios linfáticos. Nuestros resultados demuestran que PLZF se expresa fuertemente en casi todos (~ 100%) de las células luminales benignos (n = 77) y de bajo grado (patrón de Gleason 3) PCA (n = 70) y débil o ausente (100%) en las células basales ( n = 70). expresión disminuida o perdida de PLZF se evidenció en el 26% de alto grado (Gleason 4 y 5) CaP primario (n = 70) y el 84% CaP metastásico (n = 43). El alto grado de primaria del CP en las prostatectomías compartió similares pérdida PLZF /descenso y histomorfología a la de metástasis en los ganglios linfáticos en paralelo pareadas. Estos datos demuestran que la baja regulación de PLZF es un proceso molecular importante para la progresión tumoral y la pérdida de expresión PLZF detectada por inmunohistoquímica rutina es un biomarcador prometedor y valioso para CaP agresividad y la metástasis en el cuidado personalizado del CaP.
cita: Xiao GQ, Unger P, Q Yang, Kinoshita Y, Singh K, L McMahon, et al. (2015) Pérdida de PLZF expresión en el cáncer de próstata mediante técnicas de inmunohistoquímica se correlaciona con la agresividad del tumor y la metástasis. PLoS ONE 10 (3): e0121318. doi: 10.1371 /journal.pone.0121318
Editor Académico: Natasha Kyprianou, Universidad de Kentucky College of Medicine, Estados Unidos |
Recibido: December 2, 2014; Aceptado 30 de enero de 2015; Publicado: 25 Marzo 2015
Derechos de Autor © 2015 Xiao et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
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Conflicto de intereses:. los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de próstata (CaP) es el cáncer más común entre los hombres en los Estados Unidos [1]. Con el aumento de la conciencia pública sobre el CP, el uso generalizado de los niveles séricos del antígeno (PSA) específico de la próstata como una modalidad de cribado, y la ecografía transrectal para apuntar lesiones específicas, las biopsias de aguja de próstata se han traducido en aumento de la detección clínica de cáncer. CaP es una enfermedad heterogénea, la mayoría de los cuales tienen un comportamiento indolente [2,3]. A pesar de las mejoras en la detección precoz, actualmente no existen marcadores biológicos fiables para distinguir eficazmente los hombres con enfermedad de alto riesgo de la mayoría indolente y se ha argumentado desde hace décadas que un gran número de CaP podría haber sido sobretratados [2,4,5]. Por lo tanto, existe una necesidad urgente de un biomarcador tal que se puede utilizar para identificar agresivo CaP y comenzar el tratamiento curativo temprano.
leucemia promielocítica proteína con dedos de zinc (PLZF), también conocido como Zbtb16 o Zfp145, identificado por primera vez en un paciente con leucemia promielocítica aguda, es un factor de dedo de zinc de transcripción perteneciente a la familia POZ-Krüppel (POK) que se une a secuencias específicas de ADN con sus dedos de zinc carboxi-terminal y suprime la transcripción mediante el reclutamiento de co-represores con su aminoterminal POZ de dominio [ ,,,0],6,7]. Funcionamiento en el núcleo, PLZF afecta a la señalización diversa, incluyendo ciclo celular, la diferenciación, y la muerte celular programada en las células hematopoyéticas [7], así como, más recientemente, tumores sólidos [8-10], y se ha demostrado estar involucrados en importantes los procesos de desarrollo y biológicos, tales como la espermatogénesis y el vástago de mantenimiento celular, la formación de las extremidades posteriores, la hematopoyesis, la regulación inmune y la oncogénesis [6,7,11,12]. La pérdida de PLZF se ha relacionado con el aumento de la proliferación, la invasión y la motilidad y la resistencia a la apoptosis en diferentes tipos de líneas celulares de cáncer [8]. Recientemente, PLZF se ha encontrado para ser el regulado en el carcinoma de células no pequeñas del pulmón [13], mesotelioma maligno [9] y el melanoma maligno [8,10]. La sobreexpresión de PLZF en líneas de células cervicales humanas y líneas de células mesoteliales inhibe el crecimiento celular mediante la inducción de la apoptosis [14]. A nuestro entender la expresión de PLZF no ha prácticamente ha estudiado en el tejido de cáncer de próstata. El objetivo de este estudio fue investigar la expresión de PLZF en primaria, así como CaP metastásico mediante inmunohistoquímica y correlacionar la alteración de la expresión PLZF con el grado de CaP, agresividad, así como metástasis.
Materiales y Métodos
1. Las muestras de tejido
Este estudio se realizó después de la aprobación de la junta de revisión institucional y de conformidad con la garantía presentada y aprobada por el comité de revisión comité de ética /institucional de la Universidad de Rochester y el Monte Sinai School of Medicine. Se trata de un estudio inmunohistoquímico exenta de muestras archivadas y no contiene ninguna información de identificación del paciente y la necesidad de consentimiento informado por escrito se renunció. La glándula prostática es un órgano fibromuscular sólida con crecimiento hacia el interior de los epitelios glandular, que no es fácilmente permeable al fijador formalina. Para evitar el posible efecto de la fijación del tejido desigual y subóptima de la preservación de antígeno y la recuperación, así como en los resultados inmunohistoquímicos posteriores, se eligió el material de biopsia de primaria, así como el cáncer de próstata metastásico para este estudio, a excepción de ocho casos de prostatectomías radicales con linfadenectomía pélvica. Todos los especímenes y prostatectomías biopsia de la próstata y la mayoría de próstata metastásico Ca tejido se recogieron y estudiaron en la Universidad de Rochester Medical Center, Nueva York. El veinte por ciento de los casos de CaP metastásico fuera del Centro Médico Mount Sinai, Nueva York. Todos los casos eran de diferentes pacientes. Las muestras fueron fijadas de manera rutinaria en 10% de formalina tamponada neutra y embebidos en parafina.
Hubo un total de 83 biopsias de próstata, cada uno con un volumen del tumor que va de 10 a 100%, entre los cuales 13 casos tenían un total de Gleason puntuación 6, 57 casos tenían una puntuación de 7, 7 casos tiene una puntuación de 8, y 6 casos tenían una puntuación 9/10. epitelios glandulares benignas estaban presentes en 77 de las 83 biopsias de próstata y estaban ausentes en los 6 restantes biopsias. Cuarenta y tres casos fueron el cáncer de próstata metastásico con un volumen de tumor que va desde 5% a 95%, entre los cuales 22 eran metástasis óseas, 11 ganglios linfáticos metástasis, 7 metástasis hepáticas y 3 metástasis pulmonares. Ocho emparejados de PCA de piezas de prostatectomía y sus ganglios linfáticos paralelas también se incluyeron en el estudio. Los ocho carcinomas de próstata primarios en prostatectomías radicales hicieron un total de puntuación de Gleason que van del 7 al 9 con un pT3a estadio tumoral o pT3b. Las metástasis en los ganglios linfáticos fue de 1 mm a 3 mm en su mayor dimensión. La distribución de los casos se resumen en la Tabla 1.
2. La inmunohistoquímica
Después de desparafinación y rehidratación, cargada con diapositivas gruesas secciones de 5 micras de tejido fueron tratadas con peróxido de hidrógeno al 3% (H
2O
2) para eliminar la actividad peroxidasa endógena, luego procesado para el antígeno recuperación con 10 mM de tampón de citrato pH 6,0 usando una olla a presión (Pascal; Dako Cytomation, Glostrup, Dinamarca) durante 1 minuto a 125 ° C, seguido de enfriamiento lento. El resto del procedimiento se realizó en un instrumento automatizado DAKO. Todas las secciones se enjuagaron con solución salina tamponada con fosfato (NaCl 137 mM, cloruro de potasio 2,7 mM, fosfato de sodio 4,2 mM, y 1,5 mM de fosfato de potasio) y se hicieron reaccionar con anti-PLZF anticuerpo de ratón (D-9; sc-28319, Santa Cruz Biotechnology , Santa Cruz, CA) durante 1,5 horas a 1: 500 dilución en solución salina tamponada con fosfato que contenía 1% de albúmina de suero bovino (BSA) y suero de cabra normal al 5% a temperatura ambiente. Las secciones se incubaron a continuación durante 20 minutos con polímero marcado con peroxidasa de rábano picante sistema EnVision + conjugado con anticuerpo secundario anti-ratón biotinilado y el sustrato 3,3'-diaminobencidina. Todas las diapositivas se counterstained con hematoxilina, se deshidrataron, y la cubierta se deslizaron.
3. Análisis de tinción inmunohistoquímica
adenocarcinoma de próstata, estroma así como las células luminales y células basales de las glándulas benignas de la próstata se analizaron para PLZF inmunorreactividad de una manera semicuantitativa. Sólo tinción nuclear de PLZF se consideró positiva. Sobre la base de la extensión e intensidad de la inmunorreactividad, la tinción fue clasificado AS (negativo /ausente), 1 (débil), 2 (moderado) o 3 (fuerte /intenso). Cada patrón individual de Gleason se evaluó por separado para su etiquetado nuclear con PLZF de tumor en la próstata, y por simplicidad, patrón de Gleason 4 (G4) y de Gleason patrón 5 (G5) se combinaron en el análisis. La puntuación de Gleason no se utilizó para el CaP metastásico. La tinción de las células lunimal fuerte y células basales débiles o no reactivos (véase la sección de resultados para el detalle) se utilizaron como control positivo y negativo, respectivamente.
4. El análisis estadístico
La prueba Jockheere-Terpstra [15] se utilizó para evaluar la tendencia entre la puntuación de expresión de la proteína y el tipo de cáncer. La prueba determina si los rangos esperados para las puntuaciones de expresión de proteínas y tipos de cáncer cambian de forma monótona. Después de la prueba de tendencia, las comparaciones por parejas Se fijó la expresión de la proteína colapsando en Negativo /Débil (negativo y 1) y moderado /fuerte (2 y 3) y asociar esto con pares de tipos de cáncer utilizando la prueba exacta de Fisher de 2 colas . Todos los análisis se realizaron utilizando el software SAS /STAT, Versión 9.3 del Sistema SAS (Copyright © julio de 2011, SAS Institute Inc) en una plataforma de Windows 7.
> 1. La expresión de PLZF en el epitelio glandular prostática benigna
Entre las 83 biopsias de próstata, setenta y siete contenían benigna de próstata epitelio glandular. PLZF fue moderada o fuertemente expresado en los núcleos de las células luminales de glándulas prostáticas benignas, sin embargo, se detectó débil o ninguna expresión en cualquiera de los núcleos o citoplasma de las células basales o de células del estroma en todos los 77 casos (Fig. 1A).
A. glándulas prostáticas benignas con una fuerte imunoreactivity nuclear en las células luminales (flecha) y el etiquetado débil o negativo en las células basales (punta de flecha). B. tinción fuerte en modelo 3 + 3 glándulas CaP de Gleason. C. tinción fuerte en las glándulas G3 PCA (flecha), pero tinción débil o negativa en las glándulas G4 PCA (punta de flecha). D. La pérdida de PLZF en las glándulas G4 de patrón de Gleason 4 + 4 CaP (flecha). glándulas benignas con una fuerte tinción en las células luminales (punta de flecha). E. tinción fuerte en el G3 CaP glándulas (flecha) y las manchas ausentes en las glándulas G5 PCA (punta de flecha) de patrón de Gleason 3 + 5 CaP. F. tinción negativa en el tipo comedón CaP (G5). G. tinción negativa en un caso representativo de la metástasis ósea del CaP. H. tinción negativa en un caso representativo de la metástasis de los ganglios linfáticos del CaP. I. tinción negativa en un caso representativo de la metástasis hepática. benigno del hígado también muestra tinción nuclear PLZF. J. tinción negativa en un caso representativo de la metástasis pulmonar. K. PLZF expresa en G3 G4 pero no glándulas de CaP primaria a partir de una prostatectomía. L. La metástasis de los ganglios linfáticos en paralelo muestra una morfología similar y las manchas PLZF negativa a las glándulas G4 CaP de las principales glándulas G4 CaP en K.
2. La expresión de PLZF en el cáncer de próstata primario de la biopsia de próstata
Entre el CaP primario en las biopsias de próstata, había un total de 70 individuales patrón de Gleason 3 y 70 individuales patrón de Gleason 4/5. patrones de Gleason 4 y 5 se analizaron juntos principalmente debido a su comportamiento biológico similares, así como la ausencia de diferencia inmunotinción obvia entre estos dos patrones. PLZF se expresa de forma diferente en intensidad en el adenocarcinoma de próstata primario de los patrones de Gleason 3 y 4/5. De manera similar a las células luminales de glándulas prostática benigna, PLZF fue moderadamente o fuertemente expresado en todas las glándulas tumorales de patrón de Gleason 3 (Fig 1B.): 45 mostraron inmunorreactividad 3 y 25 mostraron 2 positividad. En 3 casos, la mayoría de las glándulas G3 CaP presenta con una fuerte tinción de PLZF, pero minoritario con focal débil o negativa la reactividad PLZF. En contraste, entre el 70 CaP primario del patrón de Gleason 4/5, 24 (34%) mostraron 3, 28 (40%) con 2 y 12 (17%) con débil (1) inmunoreactividad. La pérdida completa de la expresión de PLZF se observó en 6 (9%) de estos casos (Fig. 1D-F). Hubo 5 casos, en los que la mayoría de los G4 /5 glándulas CaP presenta con tinción débil o negativa PLZF, pero una minoría tenía focal moderada a fuerte reactividad PLZF. Estos CaP con expresión débil o perdida de PLZF representó 18/83 (22%) de todos los casos de CaP primario y 18/70 (26%) de alto grado (Gleason 7-10) primaria del CP.
3. La expresión de PLZF en el cáncer de próstata metastásico
La inmensa mayoría del CaP metastásico no lo hizo o tenía sólo débilmente la expresión PLZF (Fig. 1G-J). De los 43 CaP metastásico, 29 carecían de expresión PLZF (15 huesos, 8 de los ganglios linfáticos, 5 en vivo y 1 de pulmón), 7 mostraron expresión PLZF débil (5 hueso, 1 hígado y 1 pulmón), de moderada a fuerte inmunorreactividad de PLZF se observó en 7 casos (2 óseas, 3 de los ganglios linfáticos, hígado 1, 1 pulmón). En general, la pérdida o disminución de la expresión de manera significativa de PLZF se observó en 84% de adenocarcinoma de próstata metastásico, independientemente del lugar de la metástasis.
4. Los resultados del análisis estadístico
La prueba Jockheere-Terpstra revelaron una tendencia negativa (Z = -9.1568, p & lt; 0,0001), lo que indica que el cáncer metastásico más agresivo tenía los puntajes más bajos de expresión de proteínas, mientras que las puntuaciones de Gleason de 3 o 4 /5 tenían una puntuación más alta expresión de proteínas. Del mismo modo, se han encontrado altamente significativas asociaciones negativas cuando el marcador de proteína plegada se comparó entre G3 y G4 /5, G3 y cáncer metastásico, y G4 /5 y cáncer metastásico. (Todos p & lt;. 0,0001, Tabla 2, Fig 2)
5. La expresión de PLZF en el CaP metastásico de los ganglios linfáticos y su paralelo primaria CP
Para mirar en ninguna correlación entre la expresión PLZF en el CaP primario y metastásico CaP, ocho emparejados primaria CaP en muestras de prostatectomía y su correspondiente CaP metastásico en los ganglios se estudiaron los nodos de la expresión inmunohistoquímica de PLZF. Los resultados mostraron que la expresión de PLZF en la próstata varió en diferentes grados con moderada a alta expresión en bajo grado CaP (G3) y disminución o pérdida de la expresión en el foco /focos de alto grado (G4 /5) PCA (Fig. 1K) el foco /focos de CaP primario con disminución o pérdida de expresión de PLZF correspondió a la CaP metastásico emparejado en el ganglio linfático mediante el intercambio de pérdida de PLZF similares /disminuir, así como patrones morfológicos similares (Fig. 1 l). Los resultados inmunohistoquímicos y datos patológicos del CaP primario y metastásico de las ocho prostatectomías radicales con linfadenectomía pélvica se resumen en la Tabla 3.
Discusión
A pesar de que se han dedicado grandes esfuerzos en la búsqueda de biomarcadores pronósticos eficaces que son capaces de predecir la agresividad del cáncer de próstata, se ha avanzado poco en el uso práctico. Con mucho, el biomarcador más estudiado para este propósito es PTEN, un conocido supresor de tumor [16-23]. deleciones genómicas del locus 10q23 en PTEN, más comúnmente identificados por FISH, se producen en 10% a 70% de los cánceres de próstata en función de la población de estudio examinados [16-23]. Algunos estudios han demostrado la pérdida de PTEN genómico de estar asociado con un comportamiento más agresivo, la progresión tumoral y la metástasis temprana, pero otros no encontraron tal asociación [23-25]. Teniendo en cuenta que la prueba FISH es engorroso y no detecta epigenética, así como la expresión de genes post-transcripcional alteración relacionada, los estudios inmunohistoquímicos recientemente se han utilizado para evaluar la expresión de PTEN en el cáncer de próstata y su relación con la agresividad del tumor. Los resultados inconsistentes sin embargo se han reportado [21, 23, 26-33]. La falta de anticuerpos contra fiables PTEN ha sido considerado como uno de los factores que atribuyen. PTEN inmunorreactividad se ha demostrado en los núcleos y citoplasma de las células epiteliales, así como en las células del estroma de tejido de la próstata [28] y no ha habido consenso sobre el marcador inmunotinción, así como en la interpretación de los resultados inmunohistoquímicos PTEN; cuando se realiza la correlación con parámetros clínico, tinción citoplasmática PTEN es utilizado por algunos autores [27, 34], mientras que la reactividad nuclear es utilizado por otros [23]. Además, la inmunotinción promiscua en el núcleo y el citoplasma de las células epiteliales, así como células del estroma también puede haber hecho que dificulta la distinción específica de reacciones no específicas. Por otra parte, la calidad de la conservación de tejidos, un factor con frecuencia se pasa por alto, se ha sabido para afectar a los resultados de inmunohistoquímica [35, 36]. Con el fin de correlacionar los resultados de la expresión de PTEN en el estadio del tumor, la mayoría de los estudios anteriores utilizaron muestras de prostatectomía, incluyendo el tejido prostatectomía derivada TMA (microarrays de tejidos). Como se ha mencionado, la próstata es principalmente un órgano fibromuscular sólido con una baja permeabilidad al fijador; Por lo tanto, si no se presta una atención especial, la fijación del tejido subóptima es un problema común para la pieza de prostatectomía, que posteriormente podrían afectar la preservación de antígenos del tejido y podría explicar en parte los resultados inconsistentes en algunos de los estudios inmunohistoquímicos de PTEN en el CP. Como resultado, el valor clínico de PTEN inmunohistoquímica en la evaluación de la agresividad del cáncer de próstata sigue siendo objeto de evaluación.
PLZF, un modulador de genes similar a PTEN, funciona como un represor de la transcripción. Los estudios previos de PLZF se han centrado principalmente en su papel en la espermatogénesis, el vástago de mantenimiento celular y leucemia promielocítica [6,7,11,12]. Nuestro estudio en la próstata demostró que, en comparación con el de moderada a fuerte expresión inmunohistoquímica en las células luminales benignos de glándulas de la próstata y de bajo grado (patrón 3 de Gleason) cáncer de próstata, la expresión de PLZF se redujo o se pierde en gran mayoría (84%) de manera significativa cáncer de próstata metastásico y en el 26% de primaria del CP de alto grado. Estos resultados indican que la pérdida de PLZF fue un paso importante en la progresión tumoral y la metástasis. Una fracción (26%) de alto grado primario (G4 /5) cáncer de próstata presentado con la pérdida significativa de la expresión PLZF también parecía encajar en el escenario clínico real, en el que sólo una parte de alta progreso Gleason CaP y desarrollar metástasis a lo largo de sus cursos . El 26% de estos primario de alto grado CaP con disminución o pérdida de la expresión PLZF en nuestro estudio significativo podría, por tanto, en realidad representan la porción de CaP agresivo que desarrollan metástasis al momento posterior. No se han utilizado ocasionalmente casos con expresión PLZF variable en las mismas glándulas Gleason 'puntuación de CaP de la misma biopsia, lo que es consistente con la heterogeneidad intratumoral del CaP.
A fin de dilucidar si la disminución o pérdida de la expresión PLZF en el CaP primario correlacionada con la de la PCa metastásico, se estudió el patrón de expresión inmunohistoquímica de PLZF en tanto CaP primario en la próstata y el emparejado CaP metastásico en disecados ganglios linfáticos de la pelvis del mismo paciente. Nuestros resultados mostraron los cambios de expresión PLZF, así como la morfología en el foco /focos de alto grado primaria CaP en la próstata se correlacionó con la de los ganglios linfáticos de la pelvis metastásico CaP. Este hallazgo fortalece la asociación de la pérdida de PLZF con la progresión del CaP e implicó un valor pronóstico de la pérdida de PLZF en el CaP primario en fundamentación de su potencial metastásico. En la prostatectomía y la disección de ganglios linfáticos emparejado, la expresión PLZF variable (- /+ 1 /+ 2 /+ 3) en el G4 primaria /5 glándulas CaP puede reflejar la variabilidad de la presentación de antígenos debido a la fijación subóptima de las piezas de prostatectomía, sin embargo, , proporcionalmente, el PLZF en los focos de G4 /5 CaP se expresó menos que los focos de CaP G3.
Como se ha demostrado en este estudio, PLZF se expresa casi exclusivamente en los núcleos de las células luminales y débil o ausente en las células basales y células del estroma de la próstata. Este fondo limpio no sólo hace que sea fácil de interpretar los resultados de inmunotinción, sino que también sirvió como excelentes controles positivos y negativos. Estas fueron las ventajas obvias de PLZF sobre PTEN. Además, en comparación con la pérdida de PTEN en el 10-70% de CaP [16-23], la sensibilidad de la pérdida de PLZF para el CaP metastásico fue del 84% en nuestro estudio, mientras que la especificidad de la pérdida de PLZF en la predicción sin metástasis de bajo grado (Gleason 3) fue de 70/70 (100%) o, como mínimo, 67/70 (94%) si se tiene en cuenta la pérdida focal de menor importancia. Precisamente cómo muchos de los de alto grado (G4 /5) CaP dejará de desarrollar metástasis es casi imposible determinar en casos humanos; sin embargo, si se supone que todo el grupo de 52 (74%) G4 /5 casos primarios CaP que no se vea la pérdida de PLZF carece de potencial metastásico, la especificidad de PLZF en fundamentación de metástasis sería mucho mayor que el reportado 50% para PTEN [ ,,,0],37].
Hemos examinado la expresión de PLZF usando Oncomine (Life Technologies), así como los datos subyacentes GEO en cinco bases de datos de cáncer de próstata estratificados por puntuación de Gleason. No se encontró asociación aparente es evidente, ni al examinar los diagramas de cajas de expresión estratificadas (S1 Fig.), Ni los datos subyacentes cuando se vistió como gráficos de cascada (S2 Fig.). Del mismo modo, cuando se examina cinco bases de datos disponibles al público desde cBioPortal [38, 39], hay una fuerte asociación entre la puntuación de Gleason (. S3 figura, los tres principales conjuntos) o T-etapa (S3 Fig., Parte inferior de dos conjuntos) y la eliminación homocigótica, amplificación, ni la mutación del gen que codifica PLZF (ZBTB16) podría ser discernido. Además, no aparente asociación se observó entre alteraciones del número de copias y la expresión putativo PLZF ARNm en estos conjuntos de datos se accede a través cBioportal (datos no mostrados). La discrepancia entre los datos genómicos y de expresión y nuestros resultados de la tinción inmunohistoquímica sugiere una participación de epigenética y /o alteraciones posttranscriptional en el cáncer de próstata agresivo y apoya un papel más informativo para el análisis proteómico inmunohistoquímico del producto final de un gen en la aclaración de su función /biológica consecuencia en la comprensión y la predicción del comportamiento del tumor
.
Aunque se desconoce la función exacta de PLZF en el epitelio de la próstata, la expresión constitutiva de PLZF en las células luminales y ausente en las células basales de las glándulas prostáticas benignas es una reminiscencia de andrógenos receptor, e infiere fuertemente una asociación de PLZF con receptor de andrógenos. De hecho, en un
in vitro
estudio de líneas celulares de CaP, PLZF resulta ser un andrógeno sensible gen de próstata [40]. PLZF está regulada positivamente por los andrógenos en la línea celular sensible a los andrógenos LNCaP, pero no en el receptor de andrógenos línea celular negativa DU145 [41]. La sobreexpresión de PLZF en la línea celular LNCaP inhibe la proliferación celular tanto en la ausencia y presencia de andrógenos [40]. expresión PLZF endógena está ausente en la línea celular de CaP independiente de andrógenos DU145 y su expresión puede ser restaurada por la expresión ectópica del receptor de andrógenos, pero esto no es cierto en andrógenos línea celular dependiente de LNCaP [41, 42]. Los resultados de estos estudios de líneas celulares in vitro apoyan una relación entre la actividad del receptor de andrógenos PLZF y, e indican que el equilibrio entre el receptor de andrógenos pro-proliferativa y acción inhibidora de PLZF puede jugar un papel crucial en el mantenimiento de la homeostasis de la próstata benigna epitelio. La pérdida de actividad PLZF en el CaP puede resultar en la actividad del receptor de andrógenos sin control, lo que llevaría a un crecimiento proliferativo. Si bien aún no se han investigado los mecanismos subyacentes de la pérdida PLZF y la progresión tumoral relacionada, así como su papel en el CaP independencia de andrógenos, estos datos nos motivaron para examinar la expresión PLZF en los cánceres de próstata con diferentes grados (puntuaciones de Gleason), así como de próstata metastásico cánceres.
en resumen, nuestro estudio demuestra que la pérdida inmunohistoquímica de PLZF es un biomarcador sensible y específico para la detección de CaP agresivo y metastásico. Sin embargo también nos gustaría hacer hincapié en que el alcance de este estudio es limitado y se requiere un estudio a gran escala para validar los resultados. Si se valida aún más, debido a la simplicidad y la rentabilidad, las pruebas de inmunohistoquímica de la expresión PLZF en el CaP tendrá un impacto significativo y ser de utilidad clínica en el tratamiento y la atención personalizada de los pacientes con CaP en la práctica diaria. PLZF inmunohistoquímica también se puede combinar con PTEN para proporcionar una mayor capacidad de predicción para el Progreso de CaP. Prospectivamente la restauración de PLZF en estos agresiva CaP puede tener también posibles valores terapéuticos mediante la inversión de sus cursos.
Apoyo a la Información
S1 Fig. No hay alteraciones en PLZF mRNA en el cáncer de próstata.
PLZF (ZBTB16) expresión fue examinado en cinco bases de datos de cáncer de próstata estratificados por puntuación de Gleason, disponible en Oncomine. Sólo los conjuntos de datos de 10 y más casos de Gleason 8 y 9 fueron analizados. diagramas de cajas representan la expresión significa, estratificada por puntuación de Gleason. La estratificación en las columnas por puntuación de Gleason se indica en la leyenda abajo (con el número de casos se indica entre paréntesis). Tenga en cuenta que la comparación debe realizarse entre la puntuación de Gleason 7 y menor en comparación con una puntuación de Gleason 8 y 9 o, y no la primera columna para conjuntos de 1-4, lo que representa muestras para las que una puntuación no estaba disponible
doi:. 10.1371 /revista .pone.0121318.s001 gratis (TIFF)
S2 Fig. No hay aumento de la frecuencia de los casos de reducción de la expresión de ARNm PLZF en cáncer de próstata de alto grado.
PLZF (ZBTB16) expresión fue examinado en cinco bases de datos de cáncer de próstata estratificados por puntuación de Gleason, disponible en Oncomine. Sólo los conjuntos de datos de 10 y más casos de Gleason 8 y 9 fueron analizados. parcelas cascada retratan los datos individuales subyacentes analizados en la figura S1. y representan la expresión media, estratificada por puntuación de Gleason. La estratificación en las columnas por puntuación de Gleason se indica en la leyenda abajo (con el número de casos se indica entre paréntesis). Tenga en cuenta que la comparación debe realizarse entre la puntuación de Gleason 7 y menor en comparación con una puntuación de Gleason 8 y 9 o, y no la primera columna para conjuntos de 1-4, lo que representa muestras para las que una puntuación no estaba disponible
doi:. 10.1371 /revista .pone.0121318.s002 gratis (TIFF)
S3 Fig. No hay mutaciones o alteraciones en el gen PLZF en el cáncer de próstata.
Interrupciones del gen que codifica la PLZF (ZBTB16) se examinaron en las cinco bases de datos disponibles indicadas en cBioportal. Las alteraciones se indican en parcelas inferiores a nombre del estudio: eliminación homozyogous (barras azules); amplificación (barras rojas); mutación (barras verdes). Suma de todas las alteraciones detectadas fue de 0%, 4%, 1%, 2% y 4% (de arriba abajo) en los estudios descritos
doi:. 10.1371 /journal.pone.0121318.s003 gratis (TIFF )
Reconocimientos
agradecemos al Sr. Xing Qiu del Programa de Bioestadística-Universidad de Rochester por su ayuda en el análisis estadístico.