Extracto
La evaluación de
HER2
amplificación génica es un componente esencial de la toma de decisiones para el cáncer gástrico avanzado o metastásico terapéutico. Un método simple que es aplicable a, muestras pequeñas, fijadas en formalina embebidos en parafina de biopsia es deseable como un complemento de o como un sustituto para inmunohistoquímica HER2 se utilizan actualmente y en los protocolos de hibridación in situ. En este estudio, hemos desarrollado un método de PCR digital basada en la microfluídica para la determinación de
HER2 Opiniones y centrómero del cromosoma 17 (CEP17) en número de copias y la estimación de relación de contenido tumoral (TCR). El
relación HER2
/CEP17 está determinada por tres el número de copias absolutas de las variables-TCR y
HER2 Opiniones y CEP17-mediante el examen de las células tumorales; solamente la relación de los dos últimos se puede obtener por PCR digital utilizando toda la muestra sin purificar las células tumorales. TCR se determinó por análisis de imagen semi-automática. Hemos desarrollado una tabla de contenidos de tumor, que es un plano de coordenadas rectangulares que consiste en
los datos HER2
/CEP17 digital de PCR y TCR que delinea amplificadas y no amplificadas, y áreas equívocos. Mediante la aplicación de este método, 44 clínicos muestras de biopsia de cáncer gástrico se clasificaron como amplificado (n = 13), no amplificado (n = 25), o equívoca (n = 6). En comparación, 11 muestras fueron positivas, 11 fueron negativos, y 22 eran equívocamente inmunohistoquímica. Por lo tanto, nuestro nuevo método reduce el número de muestras equívocos 22-6, obviando así la necesidad de confirmación por fluorescencia o de doble sonda de hibridación in situ a & lt; 30% de los casos. El análisis de PCR digital de tumor contenido de la carta-asistida es aplicable a múltiples sitios en los tejidos extirpados quirúrgicamente también. Estos resultados indican que este análisis es una alternativa útil a HER2 inmunohistoquímica en los cánceres gástricos que pueden servir de base para la evaluación automatizada de los
HER2
estado
Visto:. Matsusaka K, S Ishikawa, Nakayama A, Ushiku T, Nishimoto A, Urabe M, et al. (2016) Tumor contenido gráfico Asistida por
HER2 /CEP17
Análisis de PCR digital de cáncer gástrico especímenes de biopsia. PLoS ONE 11 (4): e0154430. doi: 10.1371 /journal.pone.0154430
Editor: Yves St-Pierre, INRS, Canada