Antecedentes ¿Cuáles son pensó
Extracto
Los fibroblastos asociados Cáncer (CAF) para regular tumoral el crecimiento y la metástasis. Fibroblasto activación de la proteína 1 (FAP-1) es un marcador de activación de los fibroblastos y por muchos reconocido como el principal marcador de CAF. Alfa del músculo liso actina (α-SMA) es un marcador general de miofibroblastos, y se puede utilizar para identificar los CAF. Este estudio investiga el impacto pronóstico de la FAP-1 y α-SMA en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) pacientes y se correlaciona su expresión de proteínas de 105 investigados en la misma cohorte.
Métodos
muestras tumorales de 536 pacientes con CPNM se obtuvieron y se construyeron micromatrices de tejido. La inmunohistoquímica se utilizó para evaluar la expresión de FAP-1 y α-SMA y explorar su impacto sobre la supervivencia y la asociación con otros marcadores moleculares del tumor en pacientes con CPNM.
Resultados
alta expresión de FAP- 1, pero no α-SMA, en el carcinoma de células escamosas (SCC, P = 0,043, HR = 0,63; IC del 95% 0,40 a 0,99) se asoció significativamente con el aumento de la supervivencia específica de la enfermedad. FAP-1 y α-SMA no se correlacionaron significativamente entre sí. Los análisis de FAP-1 y α-SMA asociadas con otras proteínas relacionadas con el tumor revelaron patrones de correlación-histotype específico.
Conclusión
La presencia de FAP-1 que expresan CAF es un indicador de resultado positivo para los pacientes de NSCLC-SCC. Además, análisis de correlación sugieren FAP-1 y α-SMA para etiquetar diferentes subconjuntos de los fibroblastos y sus asociaciones con otras proteínas relacionadas con el tumor divergen según el subtipo histológico
Visto:. Kilvaer CT, MR Khanehkenari, Hellevik T , al-Saad S, Paulsen EE, Bremnes RM, et al. (2015) Los fibroblastos asociados con el cáncer en estadio I-IIIA: pronóstico del impacto y su correlación con marcadores moleculares del tumor. PLoS ONE 10 (8): e0134965. doi: 10.1371 /journal.pone.0134965
Editor: Donald Gullberg, Universidad de Bergen, Noruega
Recibido: Abril 27, 2015; Aceptado: July 15, 2015; Publicado: 7 Agosto 2015
Derechos de Autor © 2015 Kilvaer et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Los datos completa -set no será publicada como muchos pacientes siguen vivos y el norte de Noruega-es lo suficientemente pequeño como para los pacientes individuales a ser identificados a través de sus datos de parámetros y rompiendo así la confidencialidad del paciente. están disponibles en el papel y el soporte de archivos de información de algunos datos relevantes
Financiación:. Estos autores no tienen ningún soporte o financiación reportar
Conflicto de intereses:. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia.
Introducción
cáncer no microcítico de pulmón no microcítico (CPNM) es una de las principales causas de muerte asociadas cáncer en todo el mundo, tanto con altas tasas de mortalidad y la incidencia [1]. las estrategias actuales de tratamiento consisten en la resección del tumor amplia con el suplemento de radio y /o quimioterapia para subgrupos de pacientes con mal pronóstico [2]. NSCLC es una enfermedad heterogénea, incluyendo carcinoma de células escamosas (SCC) y adenocarcinoma (ADC) como los subgrupos histológicos dominantes, que el tratamiento en cuanto antes se consideraban una sola entidad. Sin embargo, las nuevas pruebas de marcador molecular análisis indican el fondo molecular de los subtipos de NSCLC que difieren [3]. extensos análisis de las alteraciones genéticas han revelado distintos subtipos de NSCLC que pueden ser objetivo con enfoques terapéuticos modernos. Sin embargo, estos nuevos y emocionantes estrategias aún no se han implementado en un entorno adyuvante para mejorar la supervivencia global de los pacientes con NSCLC [3].
Durante las dos últimas décadas, cada vez más conciencia del cáncer como un complejo y heterogéneo enfermedad ha aumentado. Este hecho se ha desplazado el foco de la investigación del cáncer a partir de una visión reduccionista que incluye sólo las células malignas para incluir también el tejido estromal de apoyo que rodea el tumor. Colorrectal, de mama y el cáncer de pulmón se cree que el impacto pronóstico de las células inmunes que infiltran el estroma intratumoral para complementar e incluso superar los algoritmos establecidos de estadificación TNM [4-6]. Otro jugador fundamental en el compartimiento del estroma es el cáncer asociado fibroblastos (CAF). Los fibroblastos comprenden una población de células muy heterogéneo y multi-funcional, que desempeña un papel regulador importante en la curación de heridas, el desarrollo embrionario y el cáncer de iniciación y propagación [7]. En el cáncer, numerosos estudios han documentado la importancia de las interacciones recíprocas entre células malignas y CAF [7]. Además, CAF regulan elementos importantes en el estroma asociado a un tumor incluyendo ECM, la angiogénesis, el reclutamiento y la activación de las células inmunes y el reclutamiento de células progenitoras periféricas [7,8]. El nombre genérico de "CAF" abarca un conjunto diverso de células que pueden tener diferentes orígenes y funciones. Por lo tanto, el término "CAF" pueden estar refiriéndose a los fibroblastos tumorales residentes, fibroblastos activados, fibroblastos peritumoral, miofibroblastos, pericitos y otras células mesenquimales derivadas de progenitores circulantes o después epitelial o endotelial trans-diferenciación. Tradicionalmente, los CAF se han identificado por su expresión muy extendida de la actina del músculo liso alfa (α-SMA), sin embargo, debido a la heterogeneidad celular notable; a-SMA expresión por sí sola no va a identificar todos los CAF [7,8]. Por lo tanto, otros marcadores CAF en uso son vimentina, fibronectina, proteína-fibroblastos específico 1 (FSP-1), proteína de activación de fibroblastos 1 (FAP-1) y PDGFR-α /β [8,9]. FAP-1 es una serina proteasa anclada a la membrana, que se expresa selectivamente por las células del estroma y mesenquimales durante la cicatrización de heridas, reacciones fibróticas, enfermedades inflamatorias y el desarrollo de tumores [8]. Debido a la expresión transitoria de este marcador durante la activación, FAP-1 se ha utilizado en muchos estudios para identificar los fibroblastos activados tumorales [8].
Varios estudios han asociado la presencia de diferentes subconjuntos funcionales de los CAF en NSCLC primario con un pronóstico adverso, incluyendo CAF
α-SMA y la CAF
TGF-β en una cohorte de mezclado NSCLC [10] y la CAF
Podoplanin en ADC de pulmón [11-13] y SCC [14]. Además, la presencia de CAF
Podoplanin en las metástasis de los ganglios linfáticos de la etapa 2 pacientes SCC de pulmón nodales se ha asociado con una mayor tasa de recurrencia del mediastino [15,16]. Sólo un estudio pequeño (n = 59) ha investigado la presencia de CAF
FAP en el CPNM y se encontró una asociación con peor pronóstico [17].
Hemos evaluado previamente 105 proteínas relacionadas con el tumor moleculares en una cohorte de pacientes resecado en estadio I-IIIA no seleccionados. El objetivo de este estudio fue investigar el impacto pronóstico de la CAF
FAP y la CAF
α-SMA en el CPNM, y correlacionar su presencia con la expresión de otros marcadores moleculares tumorales.
Material y métodos
1. Pacientes y muestras clínicas
tejido tumoral primario de 536 pacientes con diagnóstico y resecado quirúrgicamente para la etapa I-IIIA en el Hospital Universidad del Norte-Noruega y de Nordland Hospital Central de 1990 a 2010, fueron incluidos en este estudio. Esto representa una ampliación y actualización de una cohorte previamente existente, incluyendo pacientes con los mismos criterios, desde 1990 hasta 2004 [18]. Los pacientes incluidos se clasifican de acuerdo a la 7ª edición de la clasificación TNM de la UICC y clasificadas de acuerdo a la nueva clasificación patológica de cáncer de pulmón [19]. En total 633 pacientes fueron registrados a partir de las bases de datos del hospital. De estos 97 fueron excluidos del estudio debido a: la radioterapia o la quimioterapia antes de la cirugía (n = 15), otra enfermedad maligna dentro de los cinco años antes del diagnóstico de NSCLC (n = 39), la insuficiencia de los bloques de tejido fijadas embebidas en parafina (n = 25) y adenocarcinoma
In situ gratis (AIS), previo a 2011 clasificado como el carcinoma broncoalveolar
In situ gratis (BAC) & lt; 3 cm en la revisión (n = 18). De este modo, con 536 expedientes médicos completos y (FFPE) los bloques de tejido fijado en formol disponibles incluidos en parafina fueron elegibles.
Este informe incluye datos de seguimiento al 1 de octubre
er 2013. La mediana de seguimiento de los supervivientes fue de 73 meses (rango 0-267).
2. Micro-array de construcción
Todas las muestras de los pacientes fueron revisados de forma independiente por dos patólogos. Las zonas más representativas, que contienen tanto del tumor y el estroma intratumoral, fueron marcados en los (H /E) se desliza hematoxilina y eosina y se tomaron muestras de tejido de micro-array bloques (TMA). El TMA se ensamblaron utilizando un instrumento formar clusters de tejido (Beecher Instruments, Silver Springs, MD, EE.UU.). La metodología detallada se ha informado anteriormente [20]. En pocas palabras, se utilizó un estilete 0,6 mm para muestrear cuatro núcleos replicados de cada una de las muestras de estudio.
Para incluir todas las muestras del núcleo, se construyeron 12 bloques de TMA. Varias secciones de 4 micras se cortaron con un microtomo Micron (HM355S) y se tiñeron mediante anticuerpos específicos para el análisis de inmunohistoquímica (IHC).
3. La inmunohistoquímica
La inmunohistoquímica (IHC) para ensayos de FAP-1were realizan en el immunostainer automatizado Ventana Descubrimiento-Ultra (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ). Desparafinización y la recuperación de antígenos de a bordo se realizaron durante 24 minutos a aproximadamente 100 ° C con el reactivo de CC1, que es una solución Ventana patentada basada en EDTA (pH 8,0 a 8,5). FAP-1anti-anticuerpo policlonal de conejo (Ab53066, Abcam, la dilución 1/50) se aplicó y se incubó durante 32 minutos. Los portaobjetos se desarrolló utilizando UltraMap HRP anti-conejo (Cat#760-4315, Ventana) y no se detectaron utilizando ChromoMap DAB (Cat#760-159, Ventana).
IHC ensayos para α-SMA se tiñeron de Ventana benchmark ultra-(Ventana Medical Systems Inc.). Recuperación del epítopo se llevó a cabo con una solución de CC1 durante 8 minutos. El anticuerpo monoclonal de ratón α-SMA (cat#760 a 2.833, Ventana, clon 1A4) se incubó a 37 ° durante 32 minutos y se detectó usando el kit de detección de Ultraview DAB. Por último, para visualizar los núcleos, los portaobjetos se contratiñeron con hematoxilina reactivo Ventana II durante 8 minutos, seguido de un reactivo de azulado durante 4 minutos.
Se aplicaron dos controles diferentes para nuestro método de tinción. En primer lugar, el control de la tinción de las secciones con un anticuerpo de control de isotipo similar sin el anticuerpo primario. En segundo lugar, múltiples tejidos de órganos de micromatrices tisulares como controles positivos y negativos se utilizaron para verificar la especificidad de la tinción en cada procedimiento de tinción. Los controles positivos de tejidos compuestos hígado normal y carcinoma de mama para FAP-1 y el apéndice y la pared del vaso para el alfa-SMA; controles negativos de tejido fueron normales muestras de páncreas, de pulmón, de mama, la amígdala y el riñón, tanto para la Fap y α-SMA.
4. Anticuerpo validación
Ratón-anticuerpo monoclonal α-SMA anti-humano fue adquirido de Ventana (cat#760 a 2.833, Ventana, clon 1A4). Este anticuerpo ha sido objeto de amplios procedimientos de control de calidad y validación por el fabricante que garantiza la tinción adecuada y específica del antígeno en el tejido incluido en parafina. conejo policlonal FAP-1 anticuerpo anti-humano se adquirió de Abcam (Cat #:. ab53066). prueba de la especificidad de este anticuerpo se llevó a cabo en el local por western blot. El anticuerpo se ensayó frente a extractos de células enteras a partir de varias líneas celulares de CAF y de la línea celular A549 de tumor de pulmón. Western blots mostraron una única banda de aproximadamente 70 kDa en extractos de proteína a partir de los CAF (Fig 1D). Este anticuerpo ha sido previamente probado en los CAF aislados por IHC [21].
A) IHC análisis de núcleos de TMA de pacientes con CPNM que representan diferentes puntuaciones de células del estroma para la expresión de la PAF-1 y α-SMA. I) bajo estromales FAP-1; II) de alta estromales FAP-1; III) bajo estromal α-SMA; IV) de alta estromal α-SMA. B) Control de TMA de tejido pulmonar sano mostrando un fuerte FAP-1 positividad en los macrófagos pulmonares normales, de control C) TMA de tejido pulmonar sano que muestra una cierta debilidad a intermedio tinción de α-SMA, D) Western blot para FAP-1, que muestra una clara 70 kDa banda. Abreviaturas: FAP-1, proteína de activación de fibroblastos; a-SMA, alfa-actina de músculo liso.
5. La puntuación de inmunohistoquímica
Representante y secciones de tejidos viables se analizaron mediante un (Leica DM 2500 "Leica Microsystems Ltd, CH9435 Heerbrugg, Suiza). Sobre la base de la revisión inicial, el autor de Al-Saad estableció una puntuación semicuantitativa de cada marcador. las diapositivas se anotó para la FAP-1 en el material total y α-SMA en el material actualizado (casos desde 2005 hasta 2010) por los autores Rakaee Khanehkenari y Martínez. a-SMA previamente había sido anotado para los casos de 1990 a 2004 . la intensidad de la tinción dominante en porcentaje de células positivas en el compartimiento del estroma intraepitelial se puntuó como sigue:. 0 = sin tinción, 1 = 1 a 10%, 2 = 11 a 50% y 3 = & gt; 50% al evaluar un hecho núcleo, los observadores fueron cegados a las decenas de otras variables y resultados. no se observó ninguna tinción de las células epiteliales tumorales, ya sea para α-SMA ni FAP-1. Este es es similar a los informes de otros estudios [22].
alta expresión se define como el punto de corte óptimo discriminar los grupos de alto /bajo de acuerdo a la supervivencia. La expresión alta se definió como una puntuación & gt; 0,5 (FAP-1) y & gt;. 2 (α-SMA)
6. Métodos estadísticos
Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando RStudio 0.98.1091 con R versión 3.1.1.1 [23] y las bibliotecas "supervivencia" [24], "coche" [25], "ggplot2" [26], "gridExtra" [27], "Hmisc" [28] y "TIR" [29].
Los resultados de IHC de cada observador se compararon entre observadores para la fiabilidad mediante un modelo de efectos aleatorios de dos vías con la definición acuerdo absoluto y Cohen kappa estadísticas con pesos iguales. El coeficiente de correlación intraclase (coeficiente de fiabilidad) y kappa de Cohen se obtuvieron a partir de estos resultados.
El Chi-cuadrado y la prueba exacta de Fisher se utilizaron para examinar la asociación entre la expresión de marcadores moleculares y las variables clinipathological y para comprobar si existían las diferencias en la expresión del marcador en la cohorte original y actualizada del paciente. Spearman`s rango de correlación se utilizó para examinar las asociaciones entre las expresiones marcador. Debido al análisis de la gran cantidad de correlación, correcciones de Bonferroni para valores de p se llevaron a cabo para estos análisis.
supervivencia univariante análisis se realizaron utilizando el método de Kaplan-Meier. Las diferencias estadísticas entre las curvas de supervivencia se evaluaron mediante la prueba de log-rank. la supervivencia específica de la enfermedad (DSS) se definió como el tiempo desde la cirugía para la muerte relacionada con el cáncer de pulmón. El análisis multivariante, usando el modelo de riesgos proporcionales de Cox, se llevó a cabo para evaluar el valor independiente de las variables de pretratamiento en presencia de otras variables. Sólo las variables con P & lt; . 0.25 de los análisis univariados o de lo contrario que se consideran importantes fueron explorados en el análisis de regresión de Cox
El nivel de significación utilizado para los análisis de supervivencia fue de P & lt; 0.05
7. Aprobación ética
El estudio fue aprobado por el Comité Regional de Medicina y Salud Ética de la Investigación (norte de Noruega, UNN: Protocolo de Identificación: 2011/2503) y la necesidad de consentimiento se renunció innecesaria. La recogida y almacenamiento de la base de datos clínicos fue aprobado por el Consejo Nacional de Inspección de Datos. La presentación de informes de variables clínico, los datos de supervivencia y la expresión de biomarcadores se llevó a cabo de acuerdo con las directrices OBSERVACIÓN.
Resultados
1. Las variables clinicopatológicas
las variables clinicopatológicas se resumen en la Tabla 1. La mediana de edad al momento del diagnóstico fue de 67,2 años y el 32% de los pacientes eran mujeres. La distribución histológica de los 536 casos fueron 289 carcinomas de células escamosas (SCC), 201 adenocarcinomas (ADC) y 46 carcinomas indiferenciados (NOS). Además de la resección quirúrgica, 64, 89 y 12 pacientes recibieron radioterapia adyuvante, la quimioterapia y la radio-quimioterapia, respectivamente.
2. Interobservador Confiabilidad y Análisis de diferencias en la expresión
Los coeficientes de correlación intraclase y kappa de Cohen fueron 0,759 (P & lt; 0,001) y 0,598 (P & lt; 0,001) de la FAP-1 y 0,790 (P & lt; 0,001) y 0,657 (P & lt; 0,001) para la α-SMA. No se observó ninguna diferencia en la expresión de FAP-1 (P = 0,284) o α-SMA (P = 1.000) de acuerdo con período de tiempo (original vs cohorte actualizado).
3. Los análisis de supervivencia
La Tabla 1 resume el impacto de las variables clinicopatológicas e investigado marcadores en el grupo global y estratificados en subgrupos histológicos. La figura 2 paneles A-F muestra las curvas de supervivencia de FAP-1 y α-SMA baja
vs
alta expresión en la cohorte total y estratificada en SCC y ADC subgrupos. Alta expresión de la PAF-1 era un marcador positivo importante para la supervivencia en el subgrupo SCC (P = 0,043). Ni FAP-1, ni la expresión de α-SMA en el estroma del tumor fueron variables independientes significativas en el análisis multivariado
Abreviaturas:. SCC, carcinoma de células escamosas; ADC, adenocarcinoma; FAP-1, proteína activadora de fibroblastos; a-SMA, alfa-actina de músculo liso.
4. La expresión de FAP-1 y α-SMA y sus correlaciones
FAP-1 y la expresión de α-SMA se localizó en el citoplasma de las células del estroma (Fig 1A). De nota, FAP-1 de expresión no se limita a las células similares a fibroblastos como los macrófagos del tejido pulmonar intratumorales y sanos fueron fuertemente teñidas por el anticuerpo (Fig 1B). Sin embargo, al evaluar los núcleos, la expresión de los macrófagos de la FAP-1 no fue tenido en cuenta. S1 tabla resume las asociaciones de FAP-1 y α-SMA con marcadores clínico-patológicos. Después de la corrección de múltiples ensayos no se observaron asociaciones significativas.
La Tabla 2 resume las correlaciones significativas de FAP-1 y α-SMA con las proteínas relacionadas con el tumor previamente analizados en esta cohorte de pacientes. Los nombres de tabla S2 todos los marcadores incluidos en el análisis de correlación (n = 105). Después de correcciones para múltiples pruebas, se observaron correlaciones significativas entre el FAP-1 y los siguientes marcadores: la expresión del estroma de HIF2 (r = 0,26), LDH5 (r = 0,25), FOXP3 (r = 0,23), CSF1R (r = 0,26) y miR21 (r = 0,27) y la expresión de células tumorales de p21 (r = 0,30) en la cohorte total; expresión del estroma de CSF1R (r = 0,29) y mir21 (r = 0,31) en el subgrupo SCC; expresión del estroma de HIF2 (r = 0,42) y la expresión de células tumorales de MCT3 (r = -0,42) en el subgrupo ADC. α-SMA no mostró correlaciones significativas, ni en todo el material, ni en los subgrupos, se llevó a cabo después de la corrección de múltiples ensayos.
Discusión
En el presente estudio se inició para explorar la potencial impacto pronóstico de la CAF en el CPNM, y las correlaciones existentes de estas células con otros marcadores biológicos tumorales relevantes. En una revisión reciente, Cortés et al. destacado cuatro subconjuntos CAF funcional de acuerdo con la expresión de moléculas efectoras y receptores; CAF
FAP, CAF
FSP1, CAF
PDGFR-α y la CAF
PDGFR-β [8]. Importantes esfuerzos se han dedicado a estudiar el papel de los subtipos de CAF en el CPNM. El subtipo más estudiado, CAF
Podoplanin, se ha asociado con la supervivencia global más corta para ambos ADC y pacientes con cáncer de pulmón SCC [11-14] y su presencia en las metástasis de ganglios linfáticos mediastínicos aumenta el riesgo de recurrencia mediastinal [15,16 ]. Debido a la heterogeneidad de la CAF y la falta de un solo marcador universal, elegimos para identificar los CAF por dos de los marcadores más utilizados que excluyen fibroblastos inactivos de los CAF, a saber FAP-1 y α-SMA. En contraste con los informes anteriores sobre los CAF y NSCLC, nos encontramos con que la CAF
FAP son predictores de pronóstico favorable en el subgrupo SCC. Curiosamente, en nuestro estudio FAP-1 y la expresión de α-SMA no se correlacionan entre sí, lo que indica que estos marcadores identifican diferentes subtipos CAF. Por último, nuestro estudio revela interesantes correlaciones entre la CAF
FAP y otros marcadores moleculares tumorales que ayudan a la comprensión de los mecanismos detrás de los efectos observados en el pronóstico. A nuestro entender este estudio representa el mayor evaluación de la CAF
FAP y la CAF
α-SMA en el CPNM.
1. CAF
FAP en el CPNM
Liao et al. explorado el papel de la CAF
FAP en una pequeña serie de 59 pacientes con NSCLC y que se encuentran los niveles más altos de la FAP que expresan las células del estroma que es un indicador independiente de mal supervivencia global [17]. En contraste, se encontró, en una cohorte de pacientes, la presencia de CAF
FAP para predecir aumento de la supervivencia específica de la enfermedad en los CE, pero no en pacientes con ADC. La función definida de la CAF
FAP es poco conocida y su presencia se ha investigado en otros grupos de tumores con resultados diferentes. En el carcinoma ductal infiltrante de mama, CAF
FAP se asocian con un aumento de la supervivencia, mientras que en el ADC del páncreas y el recto que se asocian con una menor supervivencia [30-32]. Estos resultados, de acuerdo con nuestro estudio, indican que la CAF
FAP interactúan con las células tumorales y otros jugadores en el microambiente del tumor de manera diferencial según el contexto, el estadio del tumor y el tejido de origen. La diferencia entre nuestro estudio y el estudio Liao podría explicarse por su número inferior de pacientes incluidos, el uso de exámenes de todo el deslizamiento
vs
muestras de núcleos de TMA, o las diferencias en las cohortes de pacientes por otras causas no.
Obviamente, nuestro estudio basado TMA no puede explicar directamente los mecanismos de estos efectos observados. Sin embargo, una amplia análisis de correlación (Tabla 2) en nuestra cohorte de pacientes revelan fuertes asociaciones positivas entre la CAF
FAP y del estroma expresión del receptor de factor estimulante de colonias 1 (CSF1R) y micro-ARN 21 (miR21) en SCC y del estroma expresión de factor de hipoxia inducida por 2 (HIF2) en ADC y fuerte asociación negativa con la expresión de células tumorales de monocarboxylate transportador 3 (MCT3) en ADC. Estromal CSF1R podría expresarse tanto en los macrófagos y en las células mieloides dendríticas (DC) [33]. La presencia de macrófagos citotóxicos tipo M1 podría explicar el beneficio de supervivencia se observa en la CAF
pacientes FAP SCC, por los macrófagos dirigidos directamente a las células tumorales. CSF1R DC positivas son capaces de asumir antígeno y su presencia puede indicar una respuesta inmune local, [33]. miR21 se describe generalmente como un onco-MIR y se expresa en la mayoría de cánceres sólidos [34]. Un estudio reciente ha establecido un vínculo entre la expresión y la CAF miR21 formaciones y podría explicar la correlación positiva observada en nuestra cohorte de pacientes SCC [35]. Hemos identificado previamente la expresión del estroma miR21 alta para predecir la supervivencia pobre para un subconjunto de pacientes con NSCLC [36]. En este estudio las bajas miR21 grupo de compuestos que expresan sólo 21 pacientes, que, posiblemente, podría explicar el aumento de la supervivencia observada en el subgrupo SCC, a pesar de que se observa una fuerte correlación moderada con miR21. Expresión alta del estroma
Los resultados previos han mostrado de HIF2 sea un indicador favorable de pronóstico de SCC, pero no ADC, mientras que la expresión de células tumorales de MCT3 no estaba relacionado con el pronóstico independientemente de los subgrupos histológicos [37,38].
se han desarrollado estrategias para utilizar la presencia de FAP expresando las células del estroma en el tratamiento de cáncer. Éstos se pueden dividir en dos categorías i) aquellos que se dirige y neutraliza la CAF
FAP directa y ii) los que utilizan FAP expresión en las células del estroma tumoral para administrar un fármaco al sitio del tumor [39-43]. Nuestros resultados indican que para los pacientes con CPNM, y especialmente en el subgrupo SCC, el primer enfoque podría resultar perjudicial.
2. CAF
α-SMA en el CPNM
α-SMA es generalmente aceptado como un marcador de miofibroblastos, aunque el etiquetado es tipos de células inespecíficas y otros tales como pericitos también se pueden teñir [8]. Chen et al. explorado las funciones de la CAF
α-SMA y la CAF
TGF-β en una pequeña cohorte de 78 pacientes con CPNM de todas las etapas e histología utilizando diapositivas de tejidos tumorales conjunto. Encontraron CAF
α-SMA para ser un indicador independiente del resultado adverso [10]. En nuestro estudio, la presencia de CAF
α-SMA no mostró ninguna información pronóstica, ni en la población general, ni en subpoblaciones según la histología. La diferencia en el resultado podría explicarse por los diferentes enfoques utilizados (conjunto de diapositivas vs TMA) o por los diferentes números de pacientes en las cohortes. Además, la etiología de los casos de cáncer de pulmón también podría ser diferente. Suponiendo que Chen et al. recurrido principalmente a pacientes de la región de Suzhou, que es una zona densamente poblada y altamente industrializado, es concebible que el estudio incluyó un mayor número de pacientes con cáncer de pulmón de fumar sin relación. Por desgracia, el estudio de Chen no incluía información sobre el consumo de tabaco. Por el contrario, nuestro estudio reclutó a los pacientes desde el norte-Noruega, una región escasamente poblada con casi cualquier industria contaminante, y sólo 18 de los 536 de los pacientes incluidos nunca había fumado. Sería interesante explorar cómo la CAF
α-SMA reacciona a diferentes estímulos (por ejemplo. El tabaquismo
vs
contaminación industrial).
De interés, no hay correlaciones significativas (después de la corrección de múltiples prueba) se observaron entre la presencia de CAF
α-SMA y otras proteínas relacionadas con el tumor investigados previamente en nuestra cohorte de pacientes.
Conclusión
en el NSCLC, nuestros resultados indican que la presencia y significado pronóstico de los subtipos CAF difieren entre los subgrupos histológicos y que la presencia de CAF
FAP puede ser beneficioso para la supervivencia de los pacientes con CPNM SCC. Estos resultados están en contraste con otro pequeño estudio de la CAF
FAP en el CPNM. Esta discrepancia es importante ya que se están desarrollando CAF
estrategias FAPtargeting. La utilización de este tipo de estrategias en pacientes con CPNM, especialmente en el subgrupo SCC, debe abordarse con diligencia hasta que estos resultados se validan y se exploran en
in vivo
tumoral in vitro y en más
modelos tanto de SCC y ADC NSCLC.
Apoyo a la Información
S1 Archivo. versión comprimida de S1 y S2 Tablas
doi:. 10.1371 /journal.pone.0134965.s001 gratis (postal)
Tabla S1. Las correlaciones entre las variables clinicopatológicas FAP-1 y α-SMA y
doi: 10.1371. /Journal.pone.0134965.s002 gratis (DOCX)
S2 de tabla. Lista de marcadores investigados en nuestra cohorte
doi:. 10.1371 /journal.pone.0134965.s003 gratis (SAO)