Se aislaron
Extracto
Las células madre del cáncer (CSC) a través de un ensayo de neurosphere no adherente a partir de tres líneas celulares de glioma: LI, U87 y U373. Utilizando un ensayo clonal, dos clones (D2 y F11) fueron seleccionados de esferas derivadas de células Li y se caracterizaron para la: expresión de marcadores de células madre (CD133, Nestin, Musashi-1 y Sox2); proliferación; capacidad de diferenciación (determinado por la expresión de GalC, βIII-tubulina y GFAP); Ca
2 + de señalización y tumorigenicidad en ratones desnudos. Tanto D2 y clones F11 expresaron niveles más altos de todos los marcadores de células madre con respecto a la línea celular parental. Los clones que crecieron más lentamente que las células LI con un aumento de dos veces en el tiempo de duplicación. Los marcadores de diferenciación (βIII-tubulina y GFAP) se expresaron en niveles elevados en ambas celdas Li y en neuroesferas. La expresión de nestina, Sox2, y βIII-tubulina se redujo reguladas en D2 y F11 cuando se cultiva en un medio que contiene suero, mientras que se incrementó Musashi-1. En esta condición, el tiempo de duplicación de D2 y F11 aumentó sin llegar a la de las células LI. D2, F11 y células de los padres no expresaron Ca dependiente de la tensión
2 + -los canales, sino que exhiben una mayor intracelular de Ca
2 + niveles en respuesta a ATP. Estos Ca
2 + señales eran más grandes en las células Li y en las esferas cultivadas en medio que contiene suero, mientras que eran más pequeños en medio libre de suero. El tratamiento ATP no afectó a la proliferación celular. Tanto D2 y F11 indujo la aparición de tumores cuando se inyectan ortotopically en ratones desnudos atímicos a una densidad 50 veces menor que la de las células LI. Todos estos datos indican que ambos clones tienen características de CSC y comparten las mismas propiedades stemness. Los resultados en cuanto a la expresión de marcadores de diferenciación y Ca
2 + -los canales muestran que ambos clones no pueden llegar a la diferenciación terminal. Tanto D2 y F11 podrían representar un buen modelo para mejorar el conocimiento sobre el CSC en el glioblastoma y para identificar nuevos enfoques terapéuticos
Visto:. Iacopino F, C Angelucci, Piacentini R, F BIAMONTE, Mangiola A, G Maira, et al. (2014) Aislamiento de cáncer de las células madre de tres líneas celulares de glioblastoma humano: Caracterización de dos clones seleccionados. PLoS ONE 9 (8): e105166. doi: 10.1371 /journal.pone.0105166
Editor: Giovanni Camussi, Universidad de Turín, Italia