Extracto
Provirus sitio de integración para el virus de la leucemia murina de Moloney (PIM-1) es un proto-oncogén que está vinculado con el desarrollo y progresión de varios tipos de cáncer. En este estudio se evaluaron pim-1 de expresión en los tumores de estroma tumoral, y la mucosa adyacente al tumor juntos como un factor pronóstico independiente para pacientes con cáncer de colon. El estudio incluyó a 343 pacientes con cáncer de colon. La tinción inmunohistoquímica se utilizó para detectar pim-1. multivariado de regresión de Cox para la supervivencia libre de enfermedad (DFS) se utilizaron para identificar los factores pronósticos independientes. proceso analítico jerárquico (AHP) se utilizó para calcular el peso de pim-1 en los tumores, estroma tumoral y mucosa-tumor adyacente a fin de obtener una puntuación total Pim-1 (PTS) para la recidiva y la supervivencia. Las curvas de Kaplan-Meier y las curvas DFS OS para los pacientes con diferentes niveles de pim-1 de expresión se compararon mediante la prueba de log-rank. En este estudio, se identificaron cuatro factores pronósticos independientes para los pacientes de cáncer de colon: pim-1 de expresión en los tumores, estroma tumoral, mucosa-tumor adyacente, así como la etapa del tumor. Se ha establecido que la etapa clínica es un factor pronóstico importante para los pacientes de cáncer de colon. Sin embargo, PTS puede identificar a los pacientes que son propensos a recurrir no sólo en todo el grupo escisión radical, sino también dentro de cada etapa de este grupo. . Sobre la base de los resultados de este estudio se puede concluir que el PTS se combina con un sistema de estadificación clínica puede ser un mejor predictor de pronóstico de cáncer de colon pacientes de usar el sistema por sí sola etapa clínica
Ensayos clínicos Número gobernador: ChiCTR -PRCH-12002842
Visto: Peng Yh, Li JJ, Xie Fw, Chen Jf, Yu Yh, Ouyang Xn, et al. (2013) Expresión de pim-1 en los tumores, tumor de estroma tumoral y adyacentes mucosa Co-Determina el pronóstico de los pacientes con cáncer de colon. PLoS ONE 8 (10): e76693. doi: 10.1371 /journal.pone.0076693
Editor: Keitaro Matsuo, Kyushu University Facultad de Ciencias Médicas, Japón
Recibido: 29 de mayo de 2013; Aceptado: August 25, 2013; Publicado: 7 Octubre 2013
Derechos de Autor © 2013 Peng et al. . Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación: Conceder una ayuda fue proporcionada por Ciencias Naturales de la provincia de Fujian (número de concesión 009J01184). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
la recurrencia y metástasis distal son las principales causas de muerte en pacientes con cáncer de colon. El sistema de estadificación disponibles en la actualidad no es capaz de discriminar entre aquellos pacientes que se repetirán y morir y aquellos pacientes que vaya a permanecer libre de enfermedad debido a que el pronóstico de los pacientes con cáncer de colon no sólo está determinada por las características de la propia célula tumoral, sino también por el cancerosos estado de la mucosa adyacente [1], la activación de las células inmunes y la presencia de otros componentes del estroma tumoral [2,3]. Por lo tanto, la identificación y evaluación de nuevos biomarcadores de pronóstico es crucial con el fin de identificar a los pacientes de alto riesgo y para asegurar que estos pacientes reciben el tratamiento necesario.
El sitio de integración Provirus proto-oncogén del virus de la leucemia murina de Moloney ( PIM1) codifica una proteína serina /treonina quinasa que regula la supervivencia celular, la proliferación, la diferenciación, la apoptosis y la tumorigénesis [4]. La familia tiene tres miembros Pim Pim-1, pim-pim-2 y 3. De todos ellos, pim-1 se considera ser el biomarcador más útil para el diagnóstico y pronóstico del cáncer [5,9]. El gen Pim-1 codifica 2 isoformas con pesos moleculares de 33 y 44 kDa, respectivamente [6]. El 44 kDa PIM-1 se localiza principalmente a la membrana, mientras que el 33 kDa pim-1 se localiza en el citosol y el núcleo, lo que indica que estas dos isoformas regulan distintas vías de señalización en células de cáncer [7,8]. Estudios recientes de pim-1 se han centrado en sus actividades oncogénicas, y el posible uso de Pim quinasas inhibición como un objetivo para la intervención terapéutica [9]. se observó sobreexpresión de Pim-1 quinasas en los tumores humanos de origen hematopoyético y epitelial. Además, se correlaciona con mal pronóstico en varios tumores malignos hematopoyéticos [10,11], cáncer gástrico [12] y carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello [13]. Sin embargo, en contra de estos hallazgos, Pim-1 sobreexpresión correlaciona con buen pronóstico en el cáncer de próstata, carcinoma ductal de páncreas y cáncer de pulmón de células no pequeñas [14-17].
Durante el desarrollo embrionario, PIM-1 es altamente expresado en el hígado, el bazo, la médula ósea, mientras que su expresión está ausente en tejidos adultos [18]. Otros estudios de las actividades fisiológicas de Pim-1 quinasas revelaron que los ratones deficientes en Pim1 no apoyan el crecimiento de células pre-B [19]. Moreso, las células madre hematopoyéticas Pim1 deficientes podría no volver a poblar anfitriones irradiados [20]. Además, otros estudios revelaron que CD40, un miembro de la familia TNFR que juega un papel central en la activación de células B dependiente de células T, hasta regula la expresión de PIM-1 para mantener la supervivencia y la proliferación [21] de células B. Organismos que carecen de CD40 o CD40L no son capaces de generar respuestas inmunes humorales secundarias a antígenos dependientes de células T [22]. Por lo tanto, la expresión de PIM-1 en el estroma del tumor puede ser un marcador biológico importante que refleja la capacidad de las células T o B para producir una respuesta inmune contra el tumor
.
las funciones conocidas de pim-1 indican que puede posiblemente servir como un buen marcador para evaluar las propiedades de tumores, la activación inmune de leucocitos intersticiales tumorales, y el estado canceroso de la mucosa-tumor adyacente. En este estudio, se utilizó una base de datos de microarrays de tejidos (TMA) para definir combinaciones de tumor, el estroma del tumor y la mucosa adyacente al tumor asociado con SLE y la SG en el cáncer de colon. En conjunción con el actual sistema de clasificación clínica, la información obtenida de la base de datos ha mejorado nuestra capacidad para identificar a los pacientes con alto riesgo de recurrencia de la enfermedad después de la escisión radical.
Métodos
Los datos clínicos y el cáncer de colon de la muestra colección
Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética del hospital del suroeste y el hospital general de Fuzhou. Los pacientes proporcionados consentimiento informado por escrito de acuerdo con la BPC que sus muestras se utilizarán como parte del estudio en curso sobre la genética molecular del cáncer de colon. En este estudio, se tomaron muestras clínicas de pacientes con cáncer de colon que fueron sometidos a colectomía radical, entre 2004 y 2010 en el Hospital General de Fuzhou. piezas de colectomía de 343 pacientes se utilizaron para construir el TMA. Todos los casos tenían el tejido canceroso suficiente disponible en la colectomía de tejido de cáncer de representante para ser cosechadas para la construcción TMA después del diagnóstico histopatológico clínica estándar. después de la colectomía datos clínicos de seguimiento, incluida la evaluación regular del paciente por visita a la clínica, teléfono, correo de contacto o estación de servicio a la comunidad, se utilizaron para determinar la supervivencia específica del cáncer y libre de enfermedad. La recurrencia focal se determinó mediante colonoscopia y las metástasis a distancia se determinaron mediante tomografía computarizada. A todos los pacientes se les aconsejó adecuadamente a someterse a la terapia necesaria y examen de salud de acuerdo con las directrices National Comprehensive Cancer Network (NCCN). En este estudio, la fecha límite de seguimiento fue de diciembre de 2011.
TMA construcción
microarrays de tejidos de alta densidad se construyeron como se describe por Perrone y col. [23] TMA se reunieron con el tejido arrayer TM-1 (Beijing boyikang Laboratorio Instrument Co., Ltd., China). bloques de parafina en blanco normales utilizados en el diagnóstico clínico se utilizaron para los bloques de matriz receptora. Todo hematoxilina clínica y eosina (H & amp; E) teñidas diapositivas fueron examinados por histología para verificar los tejidos diana. La mucosa presente dentro de l cm de la masa del tumor se define como la mucosa-tumor adyacente. Hasta dos núcleos de tejido replicadas se tomaron de cada área de un círculo. Para construir una TMA, los centros básicos de núcleos de tejido con un diámetro de 1,2 mm fueron espaciados 1,6 mm entre sí. A continuación, el TMA se descongeló en una incubadora durante 1 h a un estado semi-líquido a 60 ° C. Después de la construcción TMA, se cortaron secciones de 4 micras, y la diapositiva inicial se tiñeron con H & amp; E para verificar el diagnóstico histológico. Los TMA imágenes fueron adquiridas con la estación de trabajo de imágenes con microscopio BLISS (Bacus Laboratories, Inc., Lombard, EE.UU.). expresión de la proteína se evaluó con una imagen pro-Plus Software 6.0 (Media Cybernetics, EE.UU.) por dos patólogos de forma independiente de alto nivel.
La inmunohistoquímica
inmunohistoquímica peroxidasa-biotina-avidina estándar se utilizó para analizar la pim-1 expresión de la proteína. El anticuerpo monoclonal de conejo contra PIM1 (Epitomics, nº de catálogo 2409-1) a una dilución de 1: 150 (concentración original 0,2 mg ml
-1) se utilizó. El nivel de expresión de PIM-1 se denota como ausente, débil, moderado o fuerte de acuerdo con la intensidad de la inmunotinción y el porcentaje de células positivas. La intensidad de la tinción se evaluó de una manera ciega y clasifica en una escala de 0 (negativo) a 2+ (positivo fuerte), como se informó [8]. El grado de tinción positiva en la mucosa y el tumor de focos de tumor adyacente se clasificó como 0,1-25 (1+), 26-50 (2 +), 50-75 (3+) y 76 a 100% (4+ ) según lo informado [8]. Ausente (0) y débil nivel (1+) expresión pim-1 fue marcado como 1 (bajo), moderada (2+) como 2 (moderada) y alto nivel (3+, 4+) expresión pim-1 fue marcado como 3 (alto). La puntuación se realizó por dos patólogos de alto nivel de forma independiente mediante un sistema de telepatología sin conocimiento previo de la etapa o resultado clínico. Se incluyó a un total de bloques de microarrays de tejidos de 42 muestras de cáncer de colon derivados de 540 343 pacientes. Una puntuación mediana se calculó a partir de dos muestras de cáncer de colon tomadas de cada paciente.
Métodos estadísticos
regresión de Cox se utilizó para evaluar si el sexo, la edad, el tamaño del tumor, la metástasis de los ganglios linfáticos, metástasis a distancia de órganos , estadio clínico, grado de los niveles de diferenciación y pim-1 de expresión en muestras de cáncer de colon (que incluía tumores del estroma del tumor, y la mucosa adyacente al tumor) están en correlación con SLE y la SG. El método Delphi fue empleado para obtener las intensidades de los AHP. Entonces AHP se utilizó para calcular los pesos de pim-1 que contribuyen a la DFS en los tumores, estroma tumoral y mucosa-tumor adyacente a fin de obtener la puntuación total pim-1 (PTS) (Tabla 1). A continuación, las STP se clasificaron en bajo, moderado y alto grado por el método Delphi. Se utilizó el análisis de Kaplan-Meier para estimar el porcentaje acumulado de DFS y OS basado en diferentes etapas del tumor,-1 pim nivel de expresión en los tumores, el estroma del tumor y la mucosa tumoral adyacente, así como el PTS, y log-rank test fue utilizado para comparar el método de Kaplan-Meier. curvas
PIM-1 de expresión
ausentes o son débiles moderar
alta sobre Mi
Wi
wi0 Gráficos vectoriales característica
máximo valor propio
la consistencia Index (CI)
tumor11 /31 /50.0666666670.405480130.11326860.358295253.163234530.081617266Tumor adyacente mucosa31261.817120590.50760261.60566604Tumor stroma51 /212.51.357208810.37912881.199273243.57980953Table 1. Para obtener una puntuación total pim-1 (PTS), el peso de pim-1 en los tumores, tumor de estroma del tumor y la mucosa adyacente se caculaed por el proceso analítico jerárquico.
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Resultados
las características basales de los pacientes clínica
con el fin de determinar si el conjunto de datos era representativa, se examinaron en primer lugar las características de la cohorte de pacientes reclutados. Un total de 343 pacientes fueron reclutados para este estudio y las características basales de los pacientes se presentan en la Tabla 2. La edad media de los pacientes durante la cirugía fue de 61 años (rango 17-86 años). El estadio clínico se determinó sobre la post-operación examen patológico según la AJCC Cancer Staging Manual (7ª ed). Había 52, 186 y 106 pacientes en estadios I, II y III, respectivamente. Un paciente fue rechazada debido a la escisión en R1 stageⅡdesease. El tiempo medio de DFS fue de 61 meses (rango 0.5-86 meses).
Pim-1 de expresión en el tumor (%) Pim-1 puntuación total (PTS) (%)
variables
baja
moderada
alta
P
※
bajo
moderada
alta
p
※
Edad (años) 0.64650.2424 & lt; 60 y18.7941.8239.3927.8846.6725.45 (31/165) (69/165) (65/165) (46/165) (77/165) (42 /165) ≥60 y16.2946.6330.0830.3451.6917.98(29/178)(83/178)(66/178)(54/178)(92/178)(32/178)Gender0.63000.1464Male16.3346.4337.2433.1647.4519.39(32/196)(91/196)(73/196)(65/196)(93/196)(38/196)Female19.0541.5039.4623.8151.7024.49(28/147)(61/147)(58/147)(35/147)(76/147)(36/147)WHO grade0.70670.2357G120.4136.7342.8628.5748.9822.45(10/49)(18/49)(21/49)(14/49)(24/49)(11/49)G217.6244.8337.5530.6549.8119.54(46/261)(117/261)(98/261)(80/261)(130/261)(51/261)G312.1251.5136.3618.1845.4536.36(4/33)(17/33)(12/33)(6/33)(15/33)(12/33)T status0.59790.3901T 0/116.6716.6766.6750.0016,6733.33(1/6)(1/6)(4/6)(3/6)(1/6)(2/6)T218.8737.7443.4022.6456.6020.75(10/53)(20/53)(23/53)(12/53)(30/53)(11/53)T317.9245.0037.0831.6747.5020.83(43/240)(108/240)(89/240)(76/240)(114/240)(50/240)T413.6452.2734.0920.4554.5525.00(6/44)(23/44)(15/44)(9/44)(24/44)(11/44)N status0.75810.0330N016.8844.7338.4032.4949.7917.72(40/237)(106/237)(91/237)(77/237)(118/237)(42/237)N122.5843.5533.8729.0346.7724.19(14/62)(27/62)(21/62)(18/62)(29/62)(15/62)N217.3934.7847.838.7052.1739.13(4/23)(8/23)(11/23)(2/23)(12/23)(9/23)N39.5252.3838.1014.2947.6238.10(2/21)(11/21)(8/21)(3/21)(10/21)(8/21)TNM i19.2336.5444.2326.9255.7717.31 stages0.73290.0510Stage (10/52) (19/52) (23/52) (14/52) (29/52) (9/52) ii16.2247.0336.7634.0548.1117.84 Etapa ( 30/185) (87/185) (68/185) (63/185) (89/185) (33/185) Etapa iii18.8743.4037.7421.7048.1130.19 (20/106) (46/106) (40 /106) (23/106) (51/106) (32/106) Tabla 2. correlación clínico patológica de los pim-1 de expresión en el cáncer de colon.
※ prueba de Chi-cuadrado. Abreviatura: T, tumor; N, nodo. CSV Descargar CSV
La relación entre Pim-1 y la expresión de DFS o OS
Pim-1 generalmente se localiza en la membrana, citoplasma y núcleo de células tumorales, células del estroma del tumor, así como a la mucosa adyacente tumor células, como se informó anteriormente [8]. Las diferentes puntuaciones de pim-1 de expresión se presentan en la Figura 1 y Figura S1. Debemos tener en cuenta que la ubicación de pim-1 en racimos dentro de los núcleos de las células de la mucosa adyacente al tumor se puntuó como bastante fuerte (Figura 1E). Se observó una baja, media y alta expresión Pim-1 en 17,49% (60 de 343), 44,31% (152 de 343) y 38,19% (131 de 343) de los tumores de los pacientes, respectivamente (Tabla 2). Cuando estroma tumoral se examinó 34,99% (120 de 343), 44,61% (153 de 343) y 20,41% (70 de 343) de los pacientes exhiben baja, media, y alta expresión de Pim-1 (Tabla S1), respectivamente. En tumor adyacente mucosa, 63,56% (218 de 343), 29,15% (100 de 343) y 7,29% (25 de 343) de los pacientes exhiben baja, media, y alta expresión Pim-1 (Tabla S1), respectivamente.
(a) Alto nivel de Pim-1 de expresión en estroma tumoral (flecha roja), la puntuación de 3, bajo nivel de pim-1 de expresión en el tumor (flecha rosa), la puntuación de 1. (B) Alto nivel de pim -1 expresión en estroma tumoral (flecha roja), la puntuación de 3, alto nivel de Pim-1 de expresión en el tumor (flecha rosa), la puntuación de 3. (C) alto nivel de Pim-1 de expresión en el tumor (flecha roja), la puntuación de 3. (D) Alto nivel de Pim-1 de expresión en la mucosa tumoral adyacente (flecha roja), la puntuación de 3. (E) pim-1 en racimos dentro de los núcleos de las células de la mucosa adyacente al tumor marcados como bastante fuerte (flecha roja), la puntuación 3. (C) bajo nivel de Pim-1 de expresión en estroma tumoral (flecha roja), la puntuación de 1, la mediana de expresión nivel de pim-1 en el tumor (flecha rosa), la puntuación de 2.
un multivariable modelo proporcional de Cox, estado del tumor (p = 0,015), el estadio TNM (p = 0,000), la expresión pim-1 en el estroma tumoral (p = 0,000) y PIM-1 de expresión en la mucosa tumoral adyacente (p = 0,000) fueron cada uno independientemente y significativamente asociado con DFS (Tabla 3). Además, pim-1 de expresión en estroma tumoral asoció significativamente con DFS.
DFS (n = 343) guía empresas IC del 95,0% para Exp (B)
P
valor
T status1.558 (1.090,2.228) 0.015TNM Stages1.910 (1.449,2.516) 0.000Pim-1 en stroma0.387 tumoral (0.286,0.525) 0.000Tumor mucosa4.463 adyacentes (3.261,6.107) 0.000 Tabla 3. El análisis multivariado de regresión de Cox para la DFS en 343 pacientes con cáncer de colon.
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Estas características combinadas de pim-1 de expresión en los tumores, estroma del tumor y adyacente tumorales mucosa sugieren que pim-1 de expresión podría servir como un marcador pronóstico útil para el cáncer de colon. Para probar esta hipótesis, se utilizó proceso analítico jerárquico (AHP) para determinar la distribución ponderada coeficiente de pim-1 contribuye a DFS y OS en los tumores, estroma tumoral y mucosa-tumor adyacente que era 0,1132686, 0,3791288 y 0,5076026, respectivamente (Tabla 1 ). A continuación, el PTS se calcula en base a la puntuación patológica, utilizando la fórmula PTS = 0.1132686p1 + 0.5076026p2 + (-) 0.3791288p3, donde p1, p2 y p3 correspondían a la puntuación patológica de la expresión pim-1 en el tumor, a tumores mucosa adyacente y estroma tumoral, respectivamente. PTS se clasifica en bajo (PTS≤0), moderada (0 & lt; PTS≤0.5) y alta (PTS & gt; 0,5) grados por Método Delphi. Utilizando el método de Kaplan-Meier con la prueba de log-rank, se compararon las curvas de DFS (Figura 2.A.4) y curvas OS (figura 2.B.4). Estos análisis han demostrado además que la evaluación PTS combinado con el estadio clínico es más precisa que la evaluación por estadio clínico sola (Figura 2.A, B).
curvas (A) DFS de diferentes PTS (-1 pim total de score) de diferentes grupos de pacientes: 1, etapa ⅰ; 2, etapa Ⅱ; 3, etapa Ⅲ; 4, todos los pacientes. (B) Curvas de diferentes OS PTS (PIM-1 puntuación total) en diferentes grupos de pacientes: 1, etapa Ⅰ; 2, etapa Ⅱ; 3, etapa Ⅲ; 4, todos los pacientes.
Prueba
La relación entre Pim-1 de expresión y DFS OS o en diferentes etapas del tumor
La supervivencia del paciente se analizó mediante el método de Kaplan-Meier, log-rank ( Figura S2.D.1; Figura S3.D.1), al igual que la DFS y OS basado en estadio clínico (Figura S2.D.2; Figura S3.D.2; Tabla 4, S2-S4). Los resultados de estos análisis indican que la expresión pim-1 en mucosa-tumor adyacente y estroma tumoral, así como PTS se asociaron significativamente con DFS (P & lt; 0,0001, P = 0,0041, P & lt; 0,0001, respectivamente) y OS (P & lt; 0,0001, P = 0,0066, P & lt; 0,0001, respectivamente) (Tabla 4, las figuras 2.A.4 y B.4; Figuras S2.B.4 y C.4; Figuras S3.B.4 y C.4).
Variables
P casos
DFS
OS
5 años de supervivencia,
% p
※
cinco años de supervivencia,
% p
※
Pim-1 (tumores) 3430.90960.9126low6052.9665.69moderate15263.8865.69high13162.6068.93pim-1 (mucosa adyacente al tumor) 343 & lt; 0,0001 & lt; 0.0001low21880.5984.49 moderate10036.2840.27high2500pim-1 (tumor stroma)3430.00410.0066low12030.2334.32moderate15370.6978.02high7068.8569.34PTS343<0.0001<0.0001low10095.7598.36moderate16959.2962.57high7414.9230.03TNM stages343 y lt; 0,0001 y lt; 0.0001Stage Ⅰ5275.6581.09Stage Ⅱ18572.5475.81Stage Ⅲ10622.3146.30Table 4. Las variables predictoras para SLE y la SG de 343 pacientes con cáncer de colon en un análisis de supervivencia univariante
※ log-rank test CSV descargando un archivo CSV..
Además, hemos examinado la SLE y la SG en cada estadio tumoral basado en pim-1 de expresión en los tumores (Figura S2 A.1,2,3,4;.. Figura S3 A.1,2,3,4 ), mucosa-tumor adyacente (Figura S2 B. 1,2,3,4;.. Figura S3 B.1,2,3,4), estroma tumoral (Figura S2 Cs 1, 2, 3, 4..; Figura S3.. Cs 1, 2, 3, 4), así como PTS (Figura 2. A. 1,2,3,4 y B. 1,2,3,4). Se encontró que el PTS no sólo puede predecir el DFS, sino también el sistema operativo de pacientes con cáncer de colon (Tabla S2-S4, Figura 2.A.1,2,3 y B. 1,2,3).
Para probar la hipótesis de que el cáncer estado de la mucosa adyacente y la activación de las células inmunes en el estroma del tumor fueron factor pronóstico más importante en el periodo libre de enfermedad, mientras que los personajes tumorales son factor pronóstico más importante en el período de recurrencia de la enfermedad /metástasis, hemos examinado la relación entre la progresión la supervivencia exento (PFS) y la expresión pim-1 en el tumor, la mucosa tumoral adyacente y estroma tumoral. Cincuenta y dos pacientes que recibieron quimioterapia de primera línea con 5-FU más oxaliplatino fueron reclutados para este fin, después de la recidiva. Los resultados de estos análisis muestran que el PFS se asoció significativamente con pim-1 de expresión en el tumor (p = 0,0141), mientras que no hubo asociación estadísticamente significativa entre la SLP y pim-1 de expresión en la mucosa tumoral adyacente (p = 0,6194) o un tumor estroma (p = 0,3438) (datos no mostrados). Estos resultados indican que PTS puede reflejar el estado del cáncer de la mucosa adyacente y la activación de las células inmunes en el estroma del tumor, así como las características del tumor. En pocas palabras, la puntuación PTS puede mejorar la predicción más allá de la etapa clínica que cualquier otro factor pronóstico significativo de DFS.
Discusión
La incidencia de cáncer de colon sigue en aumento, especialmente en los países desarrollados [24]. La resección quirúrgica del tumor primario es el tratamiento primario para el cáncer colorrectal con la excepción de la etapa Ⅰ y en parte en estadio II cáncer de colon para los que se recomienda la administración de quimioterapia adyuvante por NCCN ORIENTACIÓN (http://www.nccn.org/index .asp).
el uso de la quimioterapia adyuvante para el tratamiento de la fase II del cáncer de colon sigue siendo objeto de controversia e incluso en pacientes en estadio III el cumplimiento de las directrices de la NCCN es del 71% [25]. La Sociedad Americana de Oncología Clínica informa que los datos recogidos a partir de los ensayos controlados aleatorios no apoyan el uso de la quimioterapia adyuvante como tratamiento de rutina para pacientes con cáncer de colon en estadio II, sin embargo, los pacientes con estadio de alto riesgo de enfermedad II puede beneficiarse de este tipo de tratamiento [26]. Además los pacientes de alto riesgo no están bien definidos. Los resultados del ensayo indicaron que la adición de MOSAICO el oxaliplatino a un régimen de fluorouracilo y leucovorina mejora el tratamiento adyuvante del cáncer de colon (etapa II y Ⅲ) [27]. Sin embargo, el beneficio del tratamiento adyuvante viene a menudo a costa de recibir un tratamiento excesivo de muchos pacientes, incluso en fase Ⅲ de la enfermedad.
Hoy en día, el estadio del tumor sigue siendo el indicador pronóstico más importante usado en la clínica para predecir la supervivencia de los pacientes con cáncer de colon en estadio temprano. Sin embargo, la predicción exacta de la recurrencia del cáncer de colon todavía no se logra y hay una persistente necesidad de mejores marcadores con el fin de resolver este problema. Recientes estudios dirigidos a identificar otros factores pronósticos se han centrado principalmente en el examen de las células tumorales, como era el caso en los estudios que analizan la importancia de miR-365 [28], la firma intestinal de células madre [29], la timidilato sintasa [30], y otros biomarcadores candidatos posibles. Cada uno de estos estudios se limita a exámenes teóricos, que son difíciles de llevar a la práctica clínica. En este estudio, hemos desarrollado un método combinado con estadios clínicos que pueden predecir la recurrencia del cáncer de colon en pacientes con colectomía radical.
A pesar de que no había evidencia directa de que deben recibir quimioterapia adyuvante en fase Ⅱ enfermedad, aún había un 42% de los pacientes incluidos en nuestro estudio que han recibido 5-FU quimioterapia adyuvante, el 12% que han recibido la capecitabina y el 15% de los pacientes que recibieron 5-FU más oxaliplatino quimioterapia adyuvante, mientras que los restantes 31% de los pacientes no recibieron adyuvante quimioterapia. La razón principal por la que recibieron quimioterapia adyuvante fue de confort psicología médico-paciente.
Además, nuestro estudio incluyó a 42% de los pacientes que recibieron 5-FU más oxaliplatino quimioterapia adyuvante, el 39% de los pacientes que recibieron 5-FU solo o capecitabina sola quimioterapia adyuvante, y el 19% de los pacientes que se negaron a recibir quimioterapia en la enfermedad en estadio III. No hubo una diferencia significativa (p & gt; 0,05) en la SSE o la SG entre los pacientes en estadio II, independientemente de si recibieron quimioterapia adyuvante o no. Además, no hubo diferencia significativa (p & gt; 0,05) entre los diferentes subgrupos de pacientes en estadio III de nuevo, independientemente de si recibieron quimioterapia adyuvante o no. Por otra parte, a fin de evitar el efecto del tratamiento posterior después de la recurrencia, en este estudio, tomamos DFS como el criterio principal de valoración, y la SG como criterio de valoración secundario.
células madre intestinales pueden ser las células de origen para el cáncer colorrectal [31]. Dado que la activación oncogénica de vías de señalización intracelular se ha asociado con la tumorigénesis en células de cáncer de colon [32], activación de oncogenes de mucosa-tumor adyacente posiblemente podría ser usado en la predicción de la recidiva del tumor después de la colectomía radical. Nuestros datos demuestran que el pim-1 activación de oncogenes de la mucosa adyacente al tumor se asocia significativamente con la DFS y que un mayor nivel de pim-1 cuenta de la expresión de menor DFS. Por lo tanto la activación de oncogenes en la mucosa-tumor adyacente debe ser tomado en cuenta cuando se llevaron a cabo estudios para identificar los factores de pronóstico en el cáncer de colon. Sin embargo, estos resultados son contradictorios con los hallazgos clínicos que la recurrencia de la enfermedad después de la colectomía se debe principalmente a la metástasis a distancia y no recurrencia focal y, por tanto, se justifican estudios adicionales.
En la última década, estroma asociado al cáncer tiene convertido en una preocupación mayor que las masas insulares [33-35]. fibroblastos asociados con el cáncer son el principal componente del estroma asociado al cáncer. La importancia de los diferentes subtipos de los fibroblastos asociados con el cáncer en la patogénesis del tumor no está claro. En nuestro estudio, se encontró que los fibroblastos en diversas proporciones en los cánceres de colon, a menudo constituyen la principal población de células en el estroma tumoral. Curiosamente, en algunos casos, los fibroblastos asociados con el cáncer fueron positivos para pim-1 de expresión, mientras que en otros casos que eran pim-1 negativo. Este fenómeno capturado nuestro interés, y hemos encontrado que los niveles más altos de pim-1 de expresión en el estroma asociado al cáncer se asociaron con mayores DFS y OS. Nuestros datos indicaron además que las células del estroma del tumor de cáncer asociados pim-1-positivos fueron protectora para el anfitrión, pero el mecanismo exacto de su acción aún queda por esclarecer.
La inflamación tiene un papel bien establecido en la promoción la progresión del tumor [36]. El microambiente inflamatorio es un componente esencial de todos los tumores. Por lo tanto, las células inflamatorias inmunes son un componente adicional del estroma asociado al cáncer. La mayoría de los estudios se han centrado en la capacidad de las células inflamatorias para promover la tumorigénesis, el desarrollo, invasión y metástasis [2,37]. Por otra parte, un estudio reciente encontró que el aumento de la infiltración de los tumores con células T CD8 + citotóxicos se ha correlacionado con la supervivencia prolongada [38].
En nuestro estudio del cáncer de colon, se encontró que, en contraste con PIM células inflamatorias inmunes 1-negativas, las células inflamatorias inmunes PIM-1-positivas que acompañan a los fibroblastos asociados con el cáncer se asociaron con un aumento de DFS y OS, tal vez en calidad de subclases-matanza tumorales de las células inmunes. Este resultado indica que PIM-1 puede actuar como un marcador potencial para discriminar entre tumor de promoción y matar tumor células inflamatorias inmunes lo que es consistente con estudios anteriores [39].
En conclusión, nuestro estudio sugiere que la parámetros de pronóstico de cáncer de colon no sólo se determinan por las células tumorales, sino también por estroma asociada al cáncer y a la mucosa tumor adyacente especialmente cuando se trata de DFS. Por lo tanto la activación del proto-oncogén pim-1 en diferentes partes del tumor (células tumorales, estroma asociada al cáncer y la mucosa-tumor adyacente) puede ser muy importante para la evaluación de pronóstico del paciente. Sin embargo otros estudios con el fin de dilucidar el mecanismo exacto de acción pim-1 en los tumores y en la mucosa asociado a un tumor, todavía se justifica.
Apoyo a la Información
Figura S1. Francia El perfil de Pim-1 de expresión. (A) expresión mediana del nivel de Pim-1 en el estroma del tumor (flecha roja), las puntuaciones 2, la expresión de alto nivel de Pim-1 en el tumor (flecha rosa), puntuaciones 3. (B) expresión negativa de Pim-1 en el estroma del tumor (flecha roja), anota 1. (C) expresión negativa de Pim-1 en el tumor (flecha roja), anota 1. (D) de expresión mediana del nivel de Pim-1 en la mucosa (flecha roja)-tumoral adyacente, una puntuación de 2.
doi: 10.1371 /journal.pone.0076693.s001 gratis (TIF)
figura S2. curvas
DFS generados por los análisis de Kaplan-Meier. curvas (A) DFS de diferente pim-1 nivel de expresión en tumores de diferentes pacientes del grupo: 1, etapa Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, etapa Ⅲ; 4, los pacientes totales. curvas (B) DFS de diferente nivel de pim-1 de expresión en estroma tumoral de los diferentes grupos de pacientes: 1, etapa Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, etapa Ⅲ; 4, los pacientes totales. curvas (C) DFS de diferente pim-1 nivel de expresión en la mucosa tumoral adyacente de diferentes grupos de pacientes: 1, etapa Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, etapa Ⅲ; 4, los pacientes totales. (D) DFS curvas de pacientes totales (1) y los pacientes con estadio Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ enfermedades (2)
doi:. 10.1371 /journal.pone.0076693.s002 gratis (TIF)
Figura S3 . OS de curvas generadas por los análisis de Kaplan-Meier. (A) OS curvas de diferente pim-1 nivel de expresión en tumores de diferentes pacientes del grupo: 1, etapa Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, etapa Ⅲ; 4, los pacientes totales. (B) las curvas de diferente OS pim-1 nivel de expresión en el estroma tumoral de diferentes grupos de pacientes: 1, etapa Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, etapa Ⅲ; 4, los pacientes totales. (C) las curvas de diferente OS-1 pim nivel de expresión en la mucosa tumoral adyacente de diferentes grupos de pacientes: 1, etapa Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, etapa Ⅲ; 4, los pacientes totales. (D) las curvas del sistema operativo de los pacientes totales (1) y los pacientes con estadio Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ enfermedades (2)
doi:. 10.1371 /journal.pone.0076693.s003 gratis (TIF) sobre Table S1 .
correlación clínico-patológica de pim-1 de expresión en el cáncer de colon.
doi: 10.1371 /journal.pone.0076693.s004 gratis (DOC) sobre Table S2.
Las variables predictoras para SLE y la SG de los pacientes con enfermedad en estadio I mediante análisis de supervivencia univariante. (※ log-rank test.).
doi: 10.1371 /journal.pone.0076693.s005 gratis (DOC) sobre Table S3.
Las variables predictoras para SLE y la SG de los pacientes con enfermedad en estadio II mediante análisis univariante de supervivencia.
doi: 10.1371 /journal.pone.0076693.s006 gratis (DOC) sobre Table S4.
Las variables predictoras para SLE y la SG de los pacientes con enfermedad en estadio III mediante análisis univariante de supervivencia.
doi: 10.1371 /journal.pone.0076693.s007 gratis (DOC) sobre Table S5.
Pim-1 expresión en tumores, mucosa-tumor adyacente y estroma tumoral.
doi:. 10.1371 /journal.pone.0076693.s008 gratis (DOC)
Reconocimientos
Agradecemos Medjaden Bioscience Limited para ayudar en la preparación de este manuscrito