Extracto
Aplicaciones
Para evaluar las características clínico-patológicas y moleculares de los pacientes con cáncer colorrectal metastásico (CCRm) y sus resultados en los ensayos de fase temprana que utilizan agentes de la vía de metas.
pacientes y métodos
Se analizaron las características de los pacientes con cáncer colorrectal metastásico 238 se refiere a los ensayos de fase 1 unidad en el MD Anderson Cancer Center.
KRAS
,
PIK3CA
y
BRAF
estado se sometieron a pruebas de secuenciación de ADN basada en PCR.
Resultados
El cincuenta y uno por ciento de los pacientes albergaron
KRAS
mutaciones; 15% tenían
PIK3CA
mutaciones. En el modelo de regresión multivariante por las características clínicas
KRAS
mutaciones se asocian con una mayor incidencia de cáncer de pulmón y metástasis óseas y la disminución de la incidencia de metástasis suprarrenales;
PIK3CA
mutaciones se correlacionaron marginalmente con tumores mucinosos (p = 0,05). En el análisis univariante,
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones fueron fuertemente asociada. La etapa de Duke avanzada (p & lt; 0,0001) y
KRAS
mutaciones (p = 0,01) fueron los únicos predictores independientes de supervivencia de los pobres (modelo proporcional de Cox). Los pacientes con
PIK3CA
mutaciones tenían una tendencia hacia la supervivencia libre de progresión más corto cuando son tratados con terapias anti-EGFR (p = 0,07). Dieciocho de 78 pacientes evaluables (23%) tratados con inhibidores del eje PI3K /Akt /mTOR logra enfermedad estable [SD] ≥ 6 meses o respuesta completa /respuesta parcial (CR /PR), sólo uno de los cuales estaban en el subgrupo (N = 15) con
PIK3CA
mutaciones, tal vez porque 10 de estos 15 pacientes (67%) habían coexistiendo
KRAS
mutaciones. Sin SD ≥ 6 meses /CR /PR no se observó en los 10 pacientes tratados con fármacos mitógenos activación de la proteína quinasa (MAPK) focalización.
Conclusiones
KRAS y
PIK3CA
mutaciones suelen coexistir en pacientes con cáncer colorrectal, y se asocian con características clínicas y la evolución. La superación de la resistencia puede requerir la orientación ambas vías
Visto:. Garrido-Laguna I, Hong DS, Janku M, Nguyen LM, Falchook GS, Fu S, et al. (2012) y KRASness PIK3CAness en pacientes con cáncer colorrectal avanzado: El resultado después del tratamiento con los primeros ensayos fase con inhibidores de la vía apuntado. PLoS ONE 7 (5): e38033. doi: 10.1371 /journal.pone.0038033
Editor: Rui Manuel Reis, de la Universidad de Minho, Portugal
Recibido: 30 Diciembre, 2011; Aceptado: 30 de abril de 2012; Publicado: 31 de mayo de 2012
Derechos de Autor © 2012 Garrido-Laguna et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por el número de concesión RR024148 del Centro Nacional de Recursos para investigación, un componente del NIH Roadmap para la Investigación médica. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
Cada vez hay más apoyo a la idea de que las mutaciones específicas predicen las manifestaciones clínicas y la respuesta al tratamiento de los pacientes con cáncer. En el cáncer colorrectal,
RAS
mutaciones han recibido un escrutinio de montaje. En particular, la activación de mutaciones en KRAS
conducir resistencia a las terapias anti-EGFR en pacientes con enfermedad metastásica. [1], [2] Sin embargo, un subgrupo de individuos con
KRAS
mutaciones (p.G13D) podría obtener beneficios de las terapias anti-EGFR. [3] El papel de
PIK3CA
mutaciones en la predicción de la resistencia a las terapias anti-EGFR se ha debatido, con los estudios iniciales que llegan a conclusiones opuestas. [4], [5] Recientemente, un estudio multicéntrico retrospectivo mostró que
PIK3CA
mutaciones en el exón 20 fueron implicados en la resistencia a las terapias anti-EGFR, mientras que las mutaciones en el exón 9 no lo eran. [6] Por último, nuestro grupo ha demostrado que la activación de mutaciones en
PIK3CA
pueden predecir la respuesta a los inhibidores /Akt /mTOR PI3K. [7]
A continuación, se revisan las características clínicas y moleculares de los pacientes con cáncer colorrectal metastásico (CCRm) que fueron remitidos a nuestra unidad de pruebas clínicas. El propósito del estudio fue identificar las características clínicas asociadas con
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones, y los resultados de los primeros ensayos clínicos de PI3K /Akt /mTOR e inhibidores de MAPK.
Resultados
características de los pacientes
paciente y del tumor características clínico para los 238 pacientes del estudio se muestran en la Tabla 1. Cincuenta y cuatro por ciento de los pacientes eran hombres. Setenta y uno por ciento de los pacientes eran mayores de cincuenta años. La mayoría de los pacientes (69%) eran caucásicos. Los sitios más comunes de metástasis son el hígado, los ganglios linfáticos y pulmón, que se encuentra en el 83%, 75% y 72% de los pacientes, respectivamente. Todos los 238 pacientes fueron probados para
KRAS
de estado. Ciento veinte y dos pacientes (51%) tenían
KRAS
mutaciones. De los 168 pacientes analizados para
PIK3CA mutaciones
, 25 (15%) tenían una mutación. De los 173 pacientes analizados para
BRAF mutaciones
, 11 (6%) tenían una mutación.
La frecuencia de
KRAS Mutación
subtipos
a continuación, se evaluó la incidencia de diferentes tipos de
KRAS
mutaciones. La ubicación de
KRAS mutaciones
estaba disponible en 108 de los 122 pacientes. El más frecuente
KRAS
mutación se p.G12D (31 pacientes [29%]), seguido por p.G12V (23 pacientes [21%]), p.G12A (14 pacientes [13%]) y p.G13D (13 pacientes [12%]). Otras mutaciones ocurrieron en las siguientes incidencias bajas: p.G12C (11 pacientes [10%]), p.G12S (8 pacientes [7%]), p.Q61H (5 pacientes [5%]) y p.G12R, p .G13C y p.G12F, un paciente cada uno (1%).
Evaluación de la "KRASness"
Características clínicas.
Los pacientes con
KRAS
mutaciones (N = 122) tuvieron una mayor incidencia de cáncer de pulmón (79% [96/122] frente a 66% [76/116], p = 0.03) y metástasis óseas (20% [24/122] frente a 9% [ ,,,0],11/116], p = 0,03) en comparación con aquellos con el tipo salvaje
KRAS gratis (N = 116).
a fin de evaluar la asociación entre el
KRAS mutaciones y
diferentes características clínicas de los pacientes con cáncer colorrectal, equipados modelos de regresión logística univariante y multivariante. Los modelos univariantes sugerido que los pacientes con
KRAS
mutaciones tenían una mayor probabilidad de tener pulmonar (p = 0,02) y las metástasis óseas (p = 0,03) (Tabla 2). Hemos montado un modelo multivariado incluyendo aquellas variables con valores de p & lt univariados; 0,5 en el modelo completo. Después de la selección del modelo hacia atrás, el modelo multivariado mostró que el aumento de pulmón y metástasis óseas y la disminución de las metástasis suprarrenales se asociaron significativamente con
KRAS
mutaciones (Tabla 2) guía empresas
características moleculares.
Uno de ciento sesenta y ocho pacientes tenían pruebas para ambos
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones. La mitad de los pacientes a prueba (N = 84) tenía un
KRAS
mutación y media (N = 84) no lo hicieron. En comparación con
KRAS
pacientes de tipo salvaje, los pacientes que albergan
KRAS
mutaciones tenían con más frecuencia
PIK3CA
mutaciones (21% [18/84] frente al 8% [7 /84], p = 0.03). Como se informó anteriormente,
BRAF
y
KRAS
mutaciones eran mutuamente excluyentes (173 pacientes probados para ambos) (Tabla 1). [6]
PIK3CA
mutaciones se asociaron significativamente con
KRAS
mutaciones en los modelos univariantes (p = 0,03). De interés, cuando se introdujo características moleculares en el modelo multivariado clínica (es decir,
PIK3CA
de estado), la única variable asociada con
KRAS mutaciones
fue
PIK3CA
(datos no se muestra).
KRAS
Las mutaciones se asociaron con un sistema operativo más corto
Se realizó un análisis univariante de supervivencia para las diferentes características de los pacientes, incluyendo la edad, el género, la raza, el tipo de tumor (frente a mucinoso no), la etapa de Duke el momento del diagnóstico, el sitio del tumor primario,
KRAS
,
BRAF Opiniones y
PIK3CA
mutaciones. En el análisis multivariante, la etapa de Duke en el diagnóstico y el
KRAS
estado fueron predictores significativos de la supervivencia (
KRAS
HR 1,71, IC del 95%: 1,11 a 2,62) (Tabla 3). La mediana de SG desde el momento del diagnóstico para los pacientes con
KRAS mutaciones
fue de 57,5 meses (95% CI: 50.0-64.8 meses), mientras que para
KRAS
pacientes de tipo salvaje, la mediana de SG fue 89,5 meses (IC del 95%: 63.5-120.1 meses) (log-rank p = 0,007) (Figura 1).
Los pacientes con
KRAS de tipo salvaje
CCRm tenido más tiempo en comparación con OS
KRAS
pacientes mutantes (marcas de graduación representan los pacientes siguen vivos en el momento del último seguimiento).
también se evaluó si los diferentes tipos de
KRAS mutaciones eran
asociado con la supervivencia. No se encontraron diferencias en la SG a través de diferentes tipos de
KRAS
mutaciones. Por ejemplo, la mediana de supervivencia para los pacientes con una mutación del codón 12 fue de 57,5 meses (IC del 95%: 50-62.2 meses) y la mediana de SG en pacientes con una mutación del codón 13 fue de 56,8 meses (IC del 95% 28.8- no estimable) (Registro -rank valor de p = 0,52). Se evaluó además del sistema operativo, tal como se define por el tipo específico de aminoácido implicado en las diferentes mutaciones. Para este análisis se mantiene sólo subgrupos con al menos 10 observaciones (Tabla S1). No hubo diferencia en la SG. Sin embargo, el número de pacientes en cada grupo subtipo era pequeño, comprendido entre 11 y 31, se opone a conclusiones definitivas.
Evaluación de la "PIK3CAness"
Características clínicas.
Para evaluar la asociación entre
PIK3CA
mutaciones y características clínicas diferentes en pacientes con cáncer colorrectal, tratamos de ajustar los modelos de regresión simple y múltiple. El modelo univariante sugerido que los pacientes con
PIK3CA
mutaciones más frecuentemente tenían tumores mucinosos (p = 0,04). También tenían una tendencia a tener metástasis hepáticas menos frecuentes en comparación con los pacientes con
PIK3CA
tumores de tipo salvaje (OR 0,40, p = 0,07) (Tabla 4). En el análisis multivariado, los tumores mucinosos fueron marginalmente significativa (p-valor = 0,05), con pacientes que tienen tumores mucinosos con más frecuencia que tiene
PIK3CA mutaciones
(OR 2,61; IC del 95%: 0,99 a 6,87). Además, la edad mostró una tendencia a la semana (valor de p = 0,15), con pacientes de mayor edad con menos frecuencia que tiene
PIK3CA mutaciones
(OR 0,52; IC del 95%: 0,22 a 1,26). Como se mencionó anteriormente,
PIK3CA
estado no era una predicción de la supervivencia variable independiente en el análisis multivariante.
características moleculares.
168 (71%) pacientes se ensayaron para determinar
PIK3CA
mutaciones. De los 143 pacientes con tipo salvaje
PIK3CA
, 66 (46%) tenían
KRAS
mutaciones. De los 25 (15%) pacientes con
PIK3CA mutaciones
, 18 (72%) tenían
KRAS
mutaciones (p = 0,03) (Tabla 1). De los 147 pacientes analizados, tanto para
PIK3CA Opiniones y
BRAF
, un paciente (0,7%) tenían ambas mutaciones. Un informe reciente mostró que
PIK3CA
mutaciones en el exón 20 fueron implicados en la resistencia a las terapias anti-EGFR, mientras que las mutaciones en el exón 9 no lo eran. [6] Además, aunque
KRAS
mutaciones se cree que predecir la resistencia al tratamiento con inhibidores de EGFR, un subgrupo de individuos con
KRAS mutaciones
p.G13D todavía puede obtener beneficios de las terapias anti-EGFR. [3] Nosotros, por lo tanto, analizamos la coexistencia de
PIK3CA
mutaciones (exones 9 y 20) en pacientes con
KRAS
mutaciones. Se encontró que los pacientes con
KRAS mutaciones
p.G13D tenían la menor incidencia de
PIK3CA
mutaciones (10%) en comparación con los pacientes con
KRAS
p.G12A (36% tenido
PI3KCA
mutaciones), p.G12C (33%), p.G12D (22%) y p.G12V (12%). Por otra parte, ninguno de los nueve pacientes con
KRAS mutaciones
p.G13D tenían un
PIK3CA
mutación en el exón 20, mientras que
PIK3CA
mutaciones en el exón 20 fueron encontrados en todos los demás tipos de
KRAS
mutaciones (Tabla S2). Sin embargo, el pequeño número de pacientes no permite extraer conclusiones estadísticamente significativas.
PFS en el tratamiento anti-EGFR.
Se analizó la SLP en los pacientes tratados con terapias anti-EGFR (cetuximab o panitumumab). Los pacientes con
KRAS
mutante cáncer colorrectal metastásico tratados con terapias anti-EGFR (N = 24) tuvieron SLP más cortos en comparación con los pacientes con tipo salvaje
KRAS gratis (N = 98) (15 vs. 22 semanas , p = 0,01). Dentro del grupo de pacientes evaluados para
PIK3CA
mutaciones que recibieron terapias anti-EGFR, los pacientes con
PIK3CA
mutaciones (N = 9) tenían una tendencia hacia una SSA más cortos que los
PIK3CA
pacientes de tipo salvaje (N = 82) (17 vs. 22 semanas, p = 0,07) (Figura S1)
Respuesta a /inhibidores de mTOR PI3K Akt /o MAP quinasa inhibidores de la vía:. impacto de la convivencia de
PIK3CA
y
KRAS mutaciones
Ochenta pacientes fueron tratados en 1 fase protocolos que contienen inhibidores /mTOR PI3K /Akt (NCT00454090, NCT00554268, NCT00610493, NCT00687622, NCT00726583, NCT00731263 , NCT00756847, NCT00761644, NCT00770731, NCT00880321, NCT00920257, NCT00940381, NCT00972686, NCT01054313, NCT01072175, NCT01087554, NCT01087983, NCT01138085, NCT01155453, NCT01263145) (www.clinicaltrials.gov). Setenta y ocho pacientes fueron evaluables para la respuesta por RECIST (Figura 2). De estos 78 pacientes, 43 tenían un
KRAS
mutación en sus tumores y 35 eran
KRAS
de tipo salvaje. De los 43 pacientes con
KRAS
enfermedad -mutant, 9 (21%) alcanzaron SD ≥6 meses /CR /PR; De los 33 pacientes con
KRAS
de tipo salvaje, 9 (27%) tenían 6 meses o SD /CR /PR (prueba exacta de Fisher p = 0,59).
Quince pacientes con
PIK3CA
mutaciones fueron tratados con inhibidores de PI3K /Akt /mTOR, y uno (7%) tenían 6 meses o SD /CR /PR; 10 de estos pacientes (67%) tuvieron una concomitante
KRAS
mutación y ninguno tenía un
BRAF
mutación. Sesenta y tres pacientes con tipo salvaje o desconocido
PIK3CA
estado fueron tratados con inhibidores de PI3K /Akt /mTOR, y 17 (27%) tenían 6 meses o SD /CR /PR (prueba exacta de Fisher para SD ≥ 6 meses /CR /PR en
PIK3CA
mutante de tipo salvaje vs p = 0,17); 33 de estos pacientes (52%) tenían un
KRAS
mutación.
Un total de 10 pacientes fueron tratados con inhibidores de la vía MAPK (inhibidores de BRAF en general o MEK). De esos pacientes, cuatro tenían
BRAF Opiniones y cinco tenían
KRAS
mutaciones. Ninguno de ellos tenía
PIK3CA
mutaciones. Ninguno de los pacientes tenía 6 meses o SD /CR /PR (figura 2).
Discusión
En 238 pacientes con cáncer colorrectal que se refiere a nuestra unidad de ensayos clínicos, se encontró que 122 (el 51 %) tenían
KRAS
mutaciones. El más frecuente
KRAS
subtipos de mutación eran p.G12D (31 pacientes [25%]), seguido por p.G12V (23 pacientes [19%]), p.G12A (14 pacientes [11%]) y p.G13D (13 pacientes [11%]). Esta incidencia de
KRAS
subtipos fue consistente con lo reportado en el Catálogo de mutaciones somáticas en el Cáncer (cósmica) de base de datos (www.sanger.ac.uk/genetics/CGP/cosmic/accessed el 17 de junio
TH, 2011). En el análisis multivariado de las características clínicas,
KRAS
mutaciones se asociaron con una mayor incidencia de metástasis pulmonares y óseas (p = 0,05 para cada variable) y disminución de la incidencia de metástasis suprarrenales (p = 0,04) en comparación con
KRAS
pacientes de tipo salvaje. Estudios previos han encontrado una mayor probabilidad de metástasis pulmonares en pacientes con cáncer colorrectal metastásico con
KRAS
mutaciones. [8], [9] A nivel molecular, los pacientes que albergan
KRAS
mutaciones tenían más frecuentemente concomitante
PIK3CA
mutaciones en comparación con los individuos de tipo salvaje
KRAS gratis (21 % frente al 8%, [p = 0,03]). Además, el 72% de los pacientes con
PIK3CA
mutaciones también tenían un
KRAS mutación
mientras que sólo el 46% de los pacientes con tipo salvaje
PIK3CA
tenía un
KRAS
mutación (p = 0,03).
PIK3CA
mutaciones se asociaron significativamente con
KRAS
mutaciones en ambos modelos univariantes y multivariantes.
La mediana de SG desde el momento del diagnóstico para los pacientes con
KRAS
mutaciones fue más corto que para aquellos con el tipo salvaje
KRAS gratis (57,5 vs 89,5 meses; p = 0,007) (Figura 1). Por otra parte, en el análisis multivariante, la etapa de Duke en el diagnóstico y el
KRAS
estado fueron significativos predictores independientes de la supervivencia.
BRAF mutaciones
recientemente se ha encontrado que el pronóstico para el sistema operativo más corto en pacientes con cáncer colorrectal metastásico. [10], [11] Sin embargo, el papel de los
KRAS
estatus como un predictor de OS es objeto de controversia. Un estudio retrospectivo anterior incluyendo 3.439 pacientes en un análisis multivariado de la supervivencia se encontró que sólo las mutaciones p.G12V fueron predictivos de la supervivencia de los pobres. Curiosamente, la incidencia de mutaciones p.G12V en ese estudio fue considerablemente menor que la reportada en la base de datos cósmicos (8% vs. 23%). Un estudio reciente mostró que el aumento de la SG en pacientes con
KRAS de tipo salvaje
cáncer colorrectal metastásico tratados con el mejor cuidado de apoyo en comparación con los pacientes con
KRAS
-mutant cáncer colorrectal metastásico. [1] Sin embargo, después de avanzar en la atención de apoyo, los pacientes con
KRAS de tipo salvaje
se les permitió cruzar a panitumumab; Por lo tanto, el efecto del tratamiento no se puede descartar por completo. No está claro por qué diferentes estudios muestran datos contradictorios sobre el efecto pronóstico de
KRAS
, aunque es concebible que esto está relacionado con el tratamiento dado y /u otros factores de selección.
En el análisis univariante, pacientes con
PIK3CA
mutaciones más frecuentemente tenían tumores mucinosos (p = 0,04), y tendían a tener menos frecuencia metástasis hepáticas en comparación con los pacientes con
PIK3CA
tumores de tipo salvaje. Sólo la asociación con tumor mucinoso era (marginalmente) significativo en el análisis multivariante (p = 0,05).
PIK3CA
estado no era una predicción de la supervivencia variable independiente en el análisis multivariante. A nivel molecular, el 72% de los pacientes con
PIK3CA
mutaciones habían coexistentes
KRAS
mutaciones. De posible interés, los pacientes con mutado
PIK3CA
tenía una tendencia a una SSA más cortos cuando son tratados con terapias anti-EGFR que aquellos con el tipo salvaje
PIK3CA gratis (mediana = 22 semanas versus 17 semanas , p = 0,07). Otros informes también sugieren que los pacientes con
PIK3CA
mutaciones son menos sensibles a las terapias anti-EGFR. [4] Sin embargo, un análisis multicéntrico reciente encontró que sólo el
PIK3CA
mutaciones en el exón 20 se asociaron con un peor pronóstico después del tratamiento con cetuximab. [6] A pesar de que varias líneas de evidencia indican que los pacientes con cáncer colorrectal y
KRAS mutaciones
les va mal con inhibidores de EGFR, datos recientes sugieren que los individuos con
KRAS
p.G13D mutación pueden beneficiarse de inhibidores de EGFR. [3] Nosotros, por lo tanto, analizamos a los pacientes con p.G13D
KRAS mutaciones
para el exón 20
PIK3CA mutaciones
y no lo encontró, mientras que estas mutaciones se encontraron en otro
KRAS
subtipos mutante. Sin embargo, el pequeño número de pacientes evaluados impide llegar a conclusiones definitivas. Puede estar justificado para evaluar, en estudios prospectivos, sea o no la coexistencia del exón 20 mutado
PIK3CA Hoteles en ciertos subtipos de
KRAS
enfermedad mutante podría contribuir a la resistencia a los inhibidores de EGFR.
Ochenta pacientes fueron tratados con protocolos que contienen inhibidores de PI3K /Akt /mTOR, de los cuales 78 (98%) fueron evaluables. 23% logrado SD ≥6 meses /CR /PR. No hubo diferencia significativa en la tasa de 6 meses o SD /CR /PR entre los que tienen de tipo salvaje o mutante
KRAS
. De interés, sólo 1 paciente con un
PIK3CA mutación
logrado SD ≥6 meses /CR /PR cuando se trata con una PI3K /Akt /inhibidor de mTOR. La mayoría de estos pacientes (67%) tenían coexistente
KRAS
mutaciones, lo que puede explicar su resistencia. De hecho, la activación de la vía MAPK recientemente se ha propuesto como un mecanismo de resistencia a los inhibidores de PI3K. [12] A pesar de ello, puede ser interesante que entre los 13 pacientes que tenían algún tipo de reducción del tumor, 7 tenían
KRAS
mutación. Lo anterior sugiere que aunque las tasas de 6 meses o SD /CR /PR fueron bajos, y los pacientes con co-existentes
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones no respondieron, la presencia de un
KRAS
mutación por sí sola no es un indicador absoluto de completa resistencia a la terapia PI3K /Akt /mTOR basado en inhibidores. Recientemente hemos informado de que la coexistencia de
PIK3CA
y
KRAS
mutaciones no fue predictivo de la resistencia a la PI3K /Akt /mTOR en pacientes con cáncer de ovario. [13] Ciertamente, el contexto del tipo de enfermedad tiene un papel y las mutaciones adicionales no incluidos en este análisis puede afectar la respuesta a estas terapias. Un trabajo reciente ha demostrado que la activación de una compleja red de bucles de retroalimentación puede explicar, por ejemplo, resistencia a los inhibidores de BRAF en pacientes con cáncer colorrectal con
BRAF
mutaciones. [14]
De forma inesperada, el 27% de los pacientes con tipo salvaje o desconocido
PIK3CA
estado tratado con un PI3K /Akt /inhibidor de mTOR alcanzado SD ≥6 meses /CR /PR (p = 0,09). Es posible que una aberración molecular en la vía PI3K /Akt /mTOR existía en estos pacientes, pero no fue reconocido, y que tal aberración no puede tener la misma propensión a coexistir con
KRAS
o
BRAF
mutaciones. De hecho, la pérdida de expresión de PTEN, que a menudo indica un
PTEN
mutación, se ha reportado en 40% de los pacientes con cáncer colorrectal metastásico. [15]
Un total de 10 pacientes (nueve de los cuales tenían
KRAS
o
BRAF
mutaciones y ninguno de los cuales tenía
PIK3CA mutaciones
) eran tratados con inhibidores de la vía MAPK (inhibidores de BRAF en general o MEK). Aunque el número de pacientes son pequeñas, ninguno logrado SD ≥6 meses /CR /PR.
Nuestro trabajo tiene varias limitaciones. En primer lugar, se trata de un estudio retrospectivo en una sola institución con un número relativamente pequeño de pacientes. En segundo lugar, no pudo validar tasa de respuesta a las terapias anti-EGFR ya que esta información no estaba disponible para muchos de los pacientes que fueron tratados en instituciones distintas de MD Anderson antes de ser remitidos a la Unidad; Por lo tanto, el único resultado clínico disponible para estos pacientes fue de PFS. En tercer lugar, todos los análisis mutacional no podían ser completado para todos los pacientes incluidos en el estudio debido a una cantidad limitada de tejido disponible.
En conclusión, se muestra que
KRAS
y
PIK3CA
mutaciones se asocian frecuentemente en pacientes con cáncer colorrectal. En el contexto de ensayos clínicos tempranos, las drogas dirigidas a la vía PI3K /Akt /mTOR tenían una actividad limitada en estos pacientes, incluso en presencia de
PIK3CA mutaciones
, posiblemente debido a la frecuente coexistencia de la activación de mutaciones en el MAPK vía.
Métodos
los pacientes
se revisaron retrospectivamente las características clínico y los resultados clínicos de 238 pacientes consecutivos con cáncer colorrectal metastásico que fueron vistos en la Fase 1 Clínica (Centro clínico de Targeted La terapia) en la Universidad de Texas MD Anderson Cancer Center a partir de octubre de 2008, y para los que
KRAS
estado fue conocido. Los datos fueron recolectados a partir de notas transcritas e informes de radiología en la base de datos electrónica de estos pacientes. Los sitios de enfermedad metastásica se recogieron desde el último informe de radiología disponible para cada paciente. Patología fue revisado por un patólogo MD Anderson en todos los casos. El Centro de Cáncer de la Junta de Revisión Institucional MD Anderson ha aprobado el estudio. consentimiento por escrito fue dado por los pacientes para que su información se almacena en la base de datos del hospital y se utiliza para la investigación.
KRAS, BRAF, PIK3CA
Las pruebas de mutación
Las pruebas de mutación era realizado en el Laboratorio de diagnóstico Molecular certificado por el Laboratorio Enmienda mejoría clínica dentro de la División de Patología y Medicina de Laboratorio en el MD Anderson. Se extrajo ADN de tumor incrustado en parafina microdiseccionadas y se analizó mediante una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) método de secuenciación de ADN con base para examinar los codones 12, 13 y 61 de la
KRAS
proto-oncogén. La sensibilidad de detección de este ensayo es de aproximadamente 1 de cada 10 células que lleva la mutación en el área microdisecado. Siempre que sea posible, el análisis se hizo por
PIK3CA
mutaciones en los codones [c] 532-554 del exón 9 (dominio helicoidal) y c1011-1062 del exón 20 (dominio quinasa) y
BRAF
C595 -600 mutaciones del exón 15 por pirosecuenciación como se describió anteriormente. [16]
Métodos Estadísticos
Se realizó un análisis estadístico y validado por nuestra estadística (XW). Características de los pacientes se resumen utilizando estadística descriptiva. La asociación entre el
KRAS
o
PIK3CA
estado de la mutación y características de los pacientes se evaluó mediante la prueba exacta de Fisher. La supervivencia global (OS) se define como el intervalo de tiempo entre la fecha del diagnóstico y la muerte. Los pacientes que estaban vivos fueron censurados en la última fecha de seguimiento. La supervivencia libre de progresión (SLP) se definió como el tiempo desde el inicio del tratamiento a la detección de enfermedad progresiva o la muerte. Los pacientes que no progresaron durante el tratamiento fueron censurados en la última fecha de seguimiento. Las probabilidades de SG y SLP se estimaron utilizando el método de Kaplan y Meier y se compararon entre los subgrupos de pacientes usando la prueba de log-rank. [17], [18] riesgos proporcionales de Cox modelos de regresión se ajustaron para evaluar la asociación entre el sistema operativo y las características del paciente y
KRAS
estado de la mutación. [19] Los modelos de regresión simple y múltiple se ajustaron para evaluar la asociación entre el
KRAS
y
PIK3CA
mutación y características clínicas de los pacientes. En un principio, los modelos de regresión logística univariante se ajuste y las variables con valores de p inferior a 0,5 se incluyeron en el modelo de regresión logística múltiple. A continuación, realiza la selección del modelo hacia atrás y mantiene sólo las variables con valores de p inferior a 0,05. Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SAS (version9.2) y Splus (versión 8.0).
Apoyo a la Información
Figura S1. Parcela en Kaplan-Meier de supervivencia libre de progresión (SLP) y
PIK3CA
de estado en los pacientes con cáncer colorrectal metastásico tratados con regímenes que incluyen terapias anti-EGFR. Los pacientes con cáncer colorrectal metastásico /
PIK3CA
mutantes tenían una tendencia hacia una SSA más cortos en comparación con
PIK3CA
pacientes de tipo salvaje
doi:. 10.1371 /journal.pone.0038033.s001
(TIF)
Tabla S1.
La mediana de la supervivencia global (SG) para cada grupo de
KRAS
mutaciones.
doi: 10.1371 /journal.pone.0038033.s002 gratis (DOCX)
Tabla S2.
Tipo de
PIK3CA
mutaciones encontradas en pacientes con
KRAS mutaciones
*.
doi: 10.1371 /journal.pone.0038033.s003 gratis (DOCX)
Reconocimientos
Joann Aaron, MA, para la edición científica
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