Extracto
Los ácaros del oído (
Otodectes cynotis
) y los tumores canal auditivo son altamente prevalente entre los zorros Island federal puso en peligro (
Urocyon littoralis catalinae
) que viven en la isla de Santa Catalina frente a la costa de California del Sur. Dado que los estudios comenzaron en la década de 1990, se encontró que casi todos los zorros examinados para ser infectado con los ácaros del oído, y tumores de la glándula ceruminous (carcinomas y adenomas) se detectaron en aproximadamente la mitad de todos los zorros ≥ 4 años de edad. La hipótesis de que la reducción de la infección de ácaros del oído reduciría la otitis externa y la hiperplasia de la glándula ceruminous, un factor de riesgo para el desarrollo de tumores. En este estudio, se realizó un ensayo de campo aleatorizado para evaluar el impacto del tratamiento acaricida sobre la prevalencia de ácaros del oído y la intensidad de la infección, otitis externa, hiperplasia de la glándula ceruminous, y los niveles de anticuerpos IgG e IgE específica de ácaro. El tratamiento fue muy efectivo en la eliminación de los ácaros y la reducción de la otitis externa y la hiperplasia de la glándula ceruminous, y los niveles de anticuerpos IgG específicos de ácaros fueron significativamente menor entre los zorros no infectadas. hiperplasia de la glándula ceruminous aumentó en los no tratados, zorros infectados crónicamente durante el estudio de seis meses. Nuestros resultados proporcionan pruebas convincentes de que el tratamiento acaricida es un medio eficaz de reducir los ácaros del oído, y que la eliminación de ácaros a su vez reduce las lesiones del oído y los niveles de anticuerpos IgG-ácaros específico en zorros isla de Santa Catalina. Este estudio ha permitido avanzar en el conocimiento de la patogenia subyacente que da lugar a tumores de la glándula ceruminous, y ha ayudado a informar las decisiones de gestión que la conservación de las especies de impacto
Visto:. Moriarty ME, Vickers TW, Clifford DL, Garcelon DK, Gaffney PM , Lee KW, et al. La eliminación Mite (2015) del oído en la isla de Santa Catalina Fox (
Urocyon littoralis catalinae
): El control de los factores de riesgo para el desarrollo del cáncer. PLoS ONE 10 (12): e0144271. doi: 10.1371 /journal.pone.0144271
Editor: Douglas Thamm, Universidad del Estado de Colorado, Estados Unidos |
Recibido: August 1, 2015; Aceptado: 16 de noviembre de 2015; Publicado: December 7, 2015
Derechos de Autor © 2015 Moriarty et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están disponibles a través de Dryad (DOI: 10.5061 /dryad.12vb8)
Financiación:. Este estudio fue financiado por la Morris Animal Foundation (TWV; número de concesión D08ZO-043; http://www.morrisanimalfoundation.org), Instituto de Estudios de la Naturaleza (TWV, el MEM; http://www.iws.org), Catalina Island Conservancy (JLK, la EPC; https://www.catalinaconservancy.org), Greer Laboratories, Inc. (SQA, MEM; http : //www.greerlabs.com), la formación de estudiantes en Investigación avanzada, Universidad de California en Davis, Escuela de Medicina Veterinaria (MEM; http://www.vetmed.ucdavis.edu/research/grad_education/star). Los proveedores de fondos no tiene función alguna en el diseño del estudio, la recogida de datos. Greer Laboratories, Inc prestado apoyo en forma de salarios de los autores [SQA], pero no tuvo ningún papel adicional en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito. Las funciones específicas de estos autores se articulan en la sección 'autor' contribuciones
Conflicto de intereses:. Tenemos los siguientes intereses: Este estudio recibió fondos de Greer Laboratories, Inc. Kenneth W. Lee es empleado por Greer Laboratorios , Inc. No hay patentes, productos en desarrollo, o los productos comercializados como resultado de este proyecto. Esto no altera la adhesión de los autores a PLoS ONE políticas en los datos y materiales de uso compartido.
Introducción
La enfermedad es una amenaza importante para la conservación de especies de fauna silvestre que dependen, en particular para genéticamente y las poblaciones geográficamente aisladas [1]. La isla de Santa Catalina (SCA) Fox (
Urocyon littoralis catalinae
) es una de las seis subespecies distintas [2,3] nativos de las Islas del Canal frente a la costa de California del Sur (SCA: 33 ° 24 'N, 118 ° 24 'W). En 1999, una epidemia de moquillo sospecha diezmada 85-90% de esta población, y los restantes ~ 100 zorros en esta subespecie fueron listadas como en peligro de extinción por el gobierno federal [4,5]. acciones intensivas de gestión, incluyendo la translocación, la cría en cautividad y la vacunación previno con éxito la extinción y contribuyeron al rápido crecimiento de la población a una población estimada de 1.114 en 2012 [6, 7]. A pesar de que la población está aumentando, las epidemias de enfermedades siguen siendo la principal amenaza para la supervivencia de los zorros SCA [8, 9].
ceruminous tumores de la glándula (carcinomas y adenomas) se observaron por primera vez en zorros SCA en 2001 [ ,,,0],10]. En nuestro estudio complementario realizado entre 2001-2008, Vickers et al. encontrado que aproximadamente la mitad de los zorros SCA ≥ 4 años de edad tenían tumores de la glándula ceruminous, y que los ácaros del oído estaban presentes en & gt; 98% de los zorros SCA [10]. Los ácaros del oído se han detectado en otras dos subespecies de zorros Channel Island en las islas del sur, pero nunca en las tres subespecies en las islas del norte; Sin embargo, zorros SCA son la única subespecie que tienen tumores del conducto auditivo (Figura 1) [8,10]. No queda claro por qué algunas subespecies de zorros insulares tienen los ácaros del oído y otros no, pero las hipótesis posibles incluir la introducción histórica de los ácaros del oído por los gatos salvajes a las islas del sur [8], así como las posibles diferencias en la respuesta inmune o la susceptibilidad genética. evaluación cuantitativa del riesgo mostró que los tumores se asocian con hiperplasia de la glándula ceruminous (CGH), que a su vez está fuertemente correlacionada con la otitis externa causada por los ácaros del oído (
Otodectes cynotis
) [10]. Estos resultados son consistentes con la hipótesis de que los zorros SCA están predispuestos única para las lesiones graves del canal auditivo, y que los ácaros del oído incitan una respuesta inflamatoria y la hiperplasia de la glándula ceruminous que preceden y puede promover la formación de tumores y la carcinogénesis [10].
distribución de los zorros que no están infectados o infectados con ácaros del oído, y zorros que tienen tumores en el conducto auditivo. zorros Island no residen en las islas de Santa Bárbara o Anacapa.
Los ácaros del oído viven sobre y dentro de la queratina superficial del canal auditivo y causar una reacción inflamatoria en la dermis que aumenta la producción de cerumen y restos de queratina, a veces obstruir el canal auditivo, y que conduce a hiperplasia de la glándula ceruminous [11-13]. Este exudado ceruminous engrosado puede ser cancerígeno [14], y un estudio en perros y gatos demostrado una fuerte asociación entre la otitis externa crónica y el desarrollo de hiperplasia de la glándula ceruminuous y neoplasia [15]. En zorros SCA, la infección de ácaros se ha visto en asociación con marcada otitis externa, heridas peri-aural, celulitis, localizada infecciones secundarias bacterianas y la septicemia, así como carcinomas de la glándula ceruminous con invasión local y metástasis a distancia [8,10]. Aunque los ácaros aparecen para iniciar una cascada de eventos que pueden predisponer a los tumores de la glándula ceruminous, no hay estudios previos han examinado lo que la eliminación de ácaros efecto podría tener en la progresión de la enfermedad.
El objetivo de este estudio aleatorio de seis meses ensayo de campo fue evaluar el efecto del tratamiento acaricida de los ácaros del oído, lesiones en el conducto auditivo, y los niveles de anticuerpos específicos de ácaros (IgG e IgE) en los zorros SCA en libertad. Además, se compararon los niveles de anticuerpos específicos de ácaros de zorros SCA con la isla de Santa Cruz (SCZ) zorros (
Urocyon littoralis santacruzae
), una subespecie estrechamente relacionados con ninguna evidencia de los ácaros del oído, otitis, o tumores ceruminous . La hipótesis de que (1) la prevalencia del ácaro y la intensidad de la infección se reducirían significativamente mediante el tratamiento de los zorros con acaricida; (2) la eliminación de ácaros se asocia con una reducción otitis y la hiperplasia de la glándula ceruminous; y (3) la eliminación de ácaros se asocia con niveles reducidos de IgG-ácaros específica e IgE.
Materiales y Métodos
Declaración de Ética
captura de animales y muestreo biológico de SCA zorros se autorizó en un Servicio de Pesca y Vida Silvestre de Estados Unidos (USFWS) Federal 10 (a) 1 (a) permiso (núm TE744878-9) y un Memorando de Entendimiento con el Departamento Estatal de Pesca y Vida Silvestre (CDFV). Todos los procedimientos con animales fueron revisados y aprobados por la Universidad de California, Davis, Institucional Cuidado de Animales y el empleo (Protocolo Nº 13366).
El campo de prueba diseño em>
0), septiembre de 2009 (t
1), noviembre de 2009 (t
2), y enero de 2010 (t
3) (Tabla 1). Zorros capturados en t
0 se incluyeron en el estudio si tenían ácaros en el examen inicial, fueron mayores de 1 año de edad, no habían sido tratados por los ácaros del oído en los últimos 12 meses, y no tenían antecedentes de la anterior resección de la pared lateral del conducto auditivo externo para la extirpación del tumor. zorros incluidos fueron asignados al azar a los grupos de comparación no tratados o tratados en bloques de dos, que se produjo en el momento de la captura y siguieron
a priori
instrucciones para asignar al azar el primer zorro a uno de los grupos y la asignación de grupo alternativo a partir de entonces.
trampas de caja (Tomahawk vivo Compañía Trampa, Tomahawk, Wisconsin, EE.UU.) se han configurado y cebadas con una combinación de croquetas de perro, comida para gatos en lata, pasta y bayas. Las trampas se colocan a lo largo de transectos cerca de caminos y senderos, a intervalos de 250-300 metros. De una a dos trampas se establecieron en cada sitio, con 15-44 sitios utilizados cada día. Todas las trampas se verificaron todas las mañanas, y se examinaron los zorros, muestreada, tratados, y se liberan en el lugar de captura. Zorros les vendaron los ojos y inmovilizar manualmente mientras el veterinario proyecto (TWV) lleva a cabo un examen físico y la evaluación del otoscopio de ambos canales auditivos. Se recogieron datos de referencia, incluyendo el número de transpondedor pasivo integrado etiqueta, sexo, edad, peso, condición física, y las observaciones del canal auditivo. Zorros 1-3 años de edad fueron clasificados como jóvenes y zorros ≥ 4 años de edad fueron clasificados como maduros. Si la edad exacta no pudo ser determinada a partir de la historia de la captura anterior, zorros fueron asignados a los grupos de edad utilizando patrones de desgaste de los dientes [16,17], y los zorros fueron categorizados como si tuvieran joven de la clase 1 los patrones de exposición de la dentina o madura si tenían Clase 2- 4 patrones de exposición de la dentina
intensidad de la infección del oído ácaros se evaluó por dos métodos:. puntuación de ácaros y recuento de ácaros. Una puntuación de la gravedad subjetiva de ácaros se determinó otoscopically por el veterinario del proyecto (Tabla 2). Después de la puntuación, un hisopo de algodón se insertó en cada canal auditivo para recoger los ácaros, a continuación, colocados en un tubo de vidrio y se mantiene en un recipiente aislado con bolsas de hielo hasta ser almacenado a 4-8 ° C. Dentro de una semana de la recogida, las muestras se enviaron en hielo seco al laboratorio en la Universidad de California, Davis, y se determinó el número de ácaros usando un microscopio de disección (MEM). Tanto la puntuación de ácaros y los ácaros del recuento se hizo la media entre las orejas izquierda y derecha para proporcionar una estimación global de la intensidad de la infección.
biopsias canal auditivo se realizaron bajo anestesia local con gel de lidocaína 4%, y la solución inyectable lidocaína infusa por vía subcutánea inmediatamente adyacente al sitio de la biopsia. Con un punzón de piel estéril de 5-6 mm, se tomaron biopsias de la cara caudal inferior de los canales auditivos verticales izquierda y derecha en el cruce con los canales horizontales, y se fijaron en formalina al 10% tamponada neutra. lesiones proliferativas también la biopsia se realizó y se eliminan por completo si se obstruyen por completo el conducto. Después de obtener la muestra, la presión digital y polvo astringente se aplicaron a la zona de la biopsia para promover la hemostasia. Un fármaco anti-inflamatorio no esteroide (ketoprofeno, 2 mg /kg, Zoetis Inc., Kalamazoo, MI, EE.UU.) por vía subcutánea y el antibiótico sistémico (enrofloxacina, 10 mg /kg, Bayer, West Haven, CT, EE.UU.) se les dio.
una muestra de 10 ml de sangre se recogió por punción venosa yugular en un tubo de recogida de suero y se mantiene en un recipiente aislado con bolsas de hielo. Después de la coagulación, las muestras de sangre se refrigeraron y se centrifugaron a 1176 x g (Fischer Scientific Centrific Modelo 225) dentro de las 24 horas de captura; los sueros se dispensa en aliqots y se almacenó a -80 ° C hasta que se usaron para las pruebas de IgG-ácaros específica e IgE. Zorros en el grupo tratado recibió el fipronil (Frontline Top Spot, 30 mg /kg, Merial, Ltd., Duluth, GA, EE.UU.) por vía tópica entre los omóplatos y la ivermectina (Acarexx, 0,5 ml de solución al 0,01%, Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc ., St. Joseph, MO, EE.UU.) en cada oído. El fipronil fue dado como un aumento para ayudar en el tratamiento de la
Otodectes
. Este es un uso fuera de etiqueta, pero procedía reducir la probabilidad de inmediato la reinfestación del contacto con otros zorros (vida media más larga que la ivermectina), y para prevenir la reintroducción de los ácaros de una oreja a la otra a través de la superficie de la piel . Zorros en el grupo de comparación no tratada no recibieron ninguno de los tratamientos.
Los esfuerzos para recapturar a los zorros del estudio se realizaron cada dos meses durante el período de prueba de seis meses (T
1, t
2, t
3). En los dos primeros eventos de recaptura (t
1, t
2), todos los zorros se examinaron y se tomaron muestras (ácaros del oído y la sangre), mientras que los zorros solamente tratados recibieron acaricida (Tabla 1). Al final del período de seis meses (t
3), se examinaron todos los zorros, muestreadas (ácaros del oído y de la sangre), biopsia, y se tratan de maximizar el número de zorros tratados en la población de SCA al final del estudio (Tabla 1).
Histopatología evaluación de las biopsias
biopsias canal auditivo se procesaron rutinariamente, incluido en parafina, se seccionaron a 5 micras y se tiñeron con hematoxilina y eosina. La inmunohistoquímica para la pan-citoqueratina fue utilizado para el diagnóstico de tumores definitiva. Toda la histología fue interpretada por un patólogo certificado por el consejo (PMG) de la Universidad de California, Davis, que permaneció ciego al tratamiento. Las muestras se evaluaron para la evidencia de inflamación coherente con otitis (Tabla 2), CGH (Tabla 2), y la presencia o ausencia de adenoma de la glándula ceruminous o carcinoma. Las puntuaciones de la oreja izquierda y la derecha se promediaron para proporcionar una estimación global de la otitis y CGH.
extractos de ácaros y la preparación de pozos cubiertos
Se utilizaron ácaros del oído aislados de zorros SCA durante las evaluaciones de campo para preparar soluciones acuosas de antígenos de ácaros específico. En resumen, los ácaros se molieron utilizando un triturador de tejidos Tenbroeck después se suspendió en solución salina tamponada con fosfato (PBS). Después de la incubación durante la noche a -20 ° C, la suspensión de ácaros se centrifugó a 12.857 x g y se recogió y se utilizó como antígeno-ácaros específica el sobrenadante. El contenido de proteína se determinó colorimétricamente con un ensayo de proteína BCA (Thermo Fisher Scientific, Pierce, Rockford, IL, EE.UU.). asambleas tira Immulon 4HBH de fondo plano (Thermo Electron Corporation, Waltham, MA, EE.UU.) se utilizaron a lo largo y sirvió como la fase sólida para todos los ensayos de inmunoabsorción ligados a enzimas se unen directa (ELISA). Las tiras de 12 pocillos se recubrieron individualmente con extractos de ácaros (1 g /ml) después de un procedimiento previamente definido [18]. Brevemente, los extractos individuales se diluyeron en tampón de bicarbonato (pH 9,6) y 350 l se añadieron a cada pozo asignado. Después de la incubación durante la noche a 4-8 ° C, los pocillos se lavaron con PBS, se bloquearon con 1% de monoetanolamina (pH 7,5), se secaron al aire y se almacenan a -20 ° C en bolsas Ziplock hasta su uso.
ELISA para IgG-ácaros específica e IgE
La presencia de anticuerpo-ácaros IgE específica en el suero de zorro se evaluó mediante un ELISA específico IgE canina [18, 19]. Un ELISA semicuantitativo similares específico para zorro IgG fue desarrollado para este estudio con el fin de determinar el nivel relativo de anticuerpo IgG-ácaros específico en cada muestra de suero (KWL y MEM). Para el ensayo de IgG, tres veces diluciones en serie de sueros de zorro que van desde 1: 150 a 1: 36.450 se añadieron, por triplicado, a placas recubiertas con antígenos extraídos de los ácaros del oído homogeneizadas. Biotinilados anticuerpos anti-IgG monoclonales se utilizaron como el reactivo de sonda primaria, estreptavidina fosfatasa alcalina como enzima que contiene trazador secundaria, y p-nitrophenylphosphatase como el sustrato cromogénico [18].
Para normalizar los resultados del ensayo y permite la comparación homogénea de los resultados del ensayo, en las diferentes ejecuciones de ensayo y soluciones de suero de variables, todos los resultados se normalizaron a una calibración de cuatro puntos [20]. La cantidad relativa de IgG-ácaros específica se interpoló a partir de una curva de regresión de cuatro puntos creado por el trazado de la densidad óptica de fondo con corrección de la observada con cada uno de los calibradores frente a un valor de concentración asignado arbitrariamente basado en el esquema de dilución utilizado para la preparación de las soluciones de calibrador. El nivel de IgG relativa presente en la muestra de suero original es el producto del valor interpolado y el factor de dilución de suero que fue probado. Los sueros recogidos desde la isla de Santa Cruz (SCZ) zorros (n = 43) sirvió como comparaciones no infectadas ácaros del oído. Los zorros en esta isla son una subespecie separada y los ácaros del oído nunca han sido detectadas en el examen de los zorros SCZ vivos o muertos.
El análisis estadístico
Para determinar si o no tratadas y no tratadas fueron comparables zorros en el inicio del estudio, se comparó la edad, el sexo, la evaluación bruto canal auditivo (ácaros del oído, lesiones proliferativas, inflamación, engrosamiento nodular, pus), la evaluación del canal auditivo histológico (otitis externa, CGH, hiperplasia de la glándula sebácea, hiperplasia epidérmica, acantosis , hiperqueratosis, adenoma, carcinoma, o diagnóstico previo del tumor), y los niveles de IgG /IgE específica de ácaros utilizando el test corregido de Yates chi-cuadrado, de dos muestras t-test, y Mann-Whitney u test [21]. Recaptura éxito, que se define como la proporción de la muestra inicialmente zorros resampled en cada período de captura, se comparó con la prueba de chi-cuadrado de Pearson [21].
Para determinar si procede o no la carga de ácaros del oído disminuyó después de tratar a los zorros con acaricida , se evaluaron tanto la prevalencia de ácaros y la intensidad de la infección. La prevalencia se define como la proporción de zorros con una puntuación de ácaros y /o recuento de & gt; 0, y no infectados zorros se definieron como los que tienen tanto la puntuación de ácaros y cuentan igual a 0. La intensidad de la infección se evaluó utilizando tanto la puntuación de ácaros y contar, y se realizó la prueba de rangos de Spearman para evaluar la correlación entre las dos medidas [21]. Prevalencia e intensidad de la infección se compararon entre los grupos tratados y no tratados en cada período de captura mediante una prueba de chi-cuadrado de Pearson y la prueba de Mann-Whitney, respectivamente. Los cambios en la prevalencia y la intensidad de la infección de T
0 y t
3 fueron evaluados mediante una prueba de McNemar chi-cuadrado y la prueba de Friedman, respectivamente [21].
Para determinar si la otitis y CGH se redujera a la eliminación de los ácaros, los resultados de histopatología se compararon entre los grupos tratados y no tratados en t
3 mediante una prueba de Mann-Whitney. Los cambios en la patología del oído entre t
0 y t
3 fueron evaluados mediante una prueba de Friedman. Para determinar si los niveles de IgG e IgE se redujeron por la eliminación de ácaros, los valores se compararon entre los grupos tratados y no tratados en cada período de captura mediante una prueba de Mann-Whitney. Los cambios en los niveles de IgG e IgE entre t
0 y t
3 se compararon mediante una prueba de Friedman. los niveles de IgG e IgE se compararon entre los zorros SCA en cada período de captura y zorros SCZ utilizando una prueba de Mann-Whitney U
.
Dado que el tratamiento no es más que un método para reducir los ácaros, y la presencia de ácaros y la intensidad son los factores de riesgo reales de interés, todos los análisis anteriores también se realizaron comparando zorros infectados y no infectados, independientemente del grupo de tratamiento. Todos los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SPSS (versión 20.0, IBM SPSS Statistics para Windows, Armonk, Nueva York) con un nivel alfa de 0,05.
Resultados
Ciento diecisiete zorros fueron inscritos en el estudiar: 59 fueron asignados al grupo tratado y 58 al grupo no tratado (Tabla S1). Durante el curso del estudio, dos zorros, tanto desde el grupo tratado, murieron a causa de trauma vehículo., No se observaron efectos adversos de la toma de muestras o el tratamiento durante los exámenes recaptura. Al comienzo del estudio, no se encontraron diferencias significativas entre los grupos tratados y no tratados en lo que respecta a la edad, el sexo, la evaluación bruto canal auditivo, la evaluación histológica canal del oído, o los niveles de IgG /IgE específica de ácaro (p ≥ 0,1). Recaptura éxito fue similar entre los zorros tratados y no tratados en t
1 (39/59 = 66% y 43/58 = 74%, respectivamente) y t
3 (40/59 = 68% y 37/58 = 64%, respectivamente) (p ≥ 0,3); Sin embargo, un menor número de zorros tratados fueron recapturados que los zorros no tratados en t
2 (25/59 = 42% y 36/58 = 62%, respectivamente) (p = 0,03) (S1 y S2 figuras).
Efecto de los ácaros de los prevalencia de ácaros y la intensidad de la infección
puntuación del oído ácaros y el recuento se correlacionaron significativamente (p & lt; 0,001), por lo tanto, el recuento de ácaros se utiliza para describir la intensidad de la infección. zorros tratados tenían significativamente menor prevalencia de ácaros y la intensidad de la infección cuando se compara con los zorros no tratados en t
1, t
2, y t
3 (p & lt; 0,001; Fig 2). prevalencia Mite se redujo significativamente en el grupo tratado (p & lt; 0,001), pero no dentro del grupo no tratado (p = 0,1) entre t
0 y t
3. Sin embargo, la intensidad de la infección por ácaro disminuyó significativamente tanto en el tratado (p & lt; 0,001) y no tratados grupos (p = 0,02) entre t
0 y t
3. Se estimó la duración de la eficacia acaricida mediante el examen de un subconjunto de los zorros que sólo fueron tratados una vez (en t
0), entonces reevaluados dos, cuatro o seis meses más tarde. Entre los zorros tratados, 10/39 se infectaron dos meses más tarde, 1/7 se infectaron cuatro meses más tarde, y 3/7 se infectaron seis meses después (Fig S1)
prevalencia. Número de zorros con los ácaros /número total de zorros. La intensidad de la infección: la oreja mediana del recuento de ácaros. Número de zorros tratados y no tratados (T
0: 59, 58; t
1: 39, 42; t
2: 24, 36; t
3: 40, 36). Rango de valores para la intensidad del ácaro se muestra entre paréntesis sobre cada barra. Zorros excluidas del análisis: uno zorro sin tratar en t
1 y T
2 (falta recuento de ácaros), un zorro sin tratar en t
3 (tratados por accidente en t
2).
a, b, c Diferencia significativa (prueba de chi-cuadrado de Pearson, p & lt; 0,001).
d Diferencia significativa (prueba de chi-cuadrado de McNemar, p & lt; 0,001).
e, f, g Diferencia significativa (prueba de Mann-Whitney, p & lt; 0,001).
h, i Diferencia significativa (prueba de Friedman, p & lt; 0,001, p = 0,02) guía empresas
Efecto de la eliminación de ácaros en la otitis y la hiperplasia
zorros tratadas mostraron significativamente menor. otitis y CGH puntuaciones que los zorros no tratados en t
3 (p & lt; 0,001; figura 3). Entre t
0 y t
3, otitis puntuaciones disminuyeron significativamente en el grupo tratado (p & lt; 0,001), mientras que no hubo ningún cambio significativo en el grupo no tratado (p = 0,5). puntuaciones de CGH también disminuyó significativamente en el grupo tratado (p = 0,007) entre t
0 y t
3, pero en contraste a la puntuación de otitis, las puntuaciones de CGH aumentaron significativamente en el grupo no tratado (p = 0,001) entre t
0 y t
3. Se observaron los mismos resultados cuando los zorros no infectadas se compararon con los zorros infectados.
Comparación entre zorros tratados y no tratados en t
3, y entre t
0 y t
3 dentro de cada grupo. Número de zorros tratados y no tratados en t
0 y t
3 (37, 33). Rango de valores para la otitis y CGH se muestra entre paréntesis sobre cada barra. Zorros excluidos del análisis: tres tratada y dos zorros no tratados en t
0, un zorro tratados y no tratados en t
3 (biopsia no diagnóstica), 18 tratados y 22 zorros no tratados en t
3 no ( recapturado).
a, b Diferencia significativa (prueba de Mann-Whitney, p & lt; 0,001).
c, d, e Diferencia significativa (prueba de Friedman, p ≤ 0,007).
Efecto de la eliminación de ácaros en los niveles de IgG e IgE
Los grupos tratados y no tratados no tenía significativamente diferentes niveles de IgG en t
1 (p = 0,08), t
2 (p = 0,3), o t
3 (p = 0,06), pero no hubo una disminución significativa en los niveles de IgG en tanto grupos entre t
0 y t
3 (p & lt; 0,001; figura 4). Ambos grupos de zorros SCA en t
0 tenían niveles significativamente más altos de IgG que los zorros SCZ no infectadas (p & lt; 0,001). Los zorros tratada SCA mantienen los niveles de IgG significativamente más altos que SCZ zorros en t
1 (p & lt; 0,001) y t
2 (p = 0,01), pero su IgG se redujeron a niveles similares a los zorros SCZ en t
3 (p = 0,6). Por el contrario, SCA zorros no tratados mantienen los niveles de IgG significativamente más altos que los zorros SCZ en absoluto recaptura períodos (t
1 y t
2: p & lt; 0,001, t
3: p = 0,004)
.
nivel de IgG: una cantidad relativa de anticuerpo-ácaros específica (determinada por interpolación a partir de una curva de calibración de cuatro puntos, véase el texto para más explicaciones). Número de zorros tratados y no tratados (T
0: 59, 57; t
1: 38, 42; t
2: 24, 36 t
3: 40, 36); número de zorros infectados y no infectados (t
0: 116; t
1: 31, 49; t
2: 25, 35 t
3: 42, 35); número de zorros SCZ (43). Rango de valores de IgG se muestra entre paréntesis sobre cada barra. Zorros excluidos del análisis: uno zorro sin tratar /infectados en t
0 y uno tratado de zorro /no infectada en t
1 (faltante nivel de IgG).
a, b Diferencia significativa (prueba de Friedman, p & lt; 0,001).
c Diferencia significativa entre SCZ zorros vs. SCA tratados y no tratados zorros en todos los eventos de captura (Mann-Whitney U test, p ≤ 0,01), a excepción de los zorros tratados SCA en t
3 (p = 0,6).
d, e, f Diferencia significativa (prueba de Mann-Whitney, p ≤ 0,01).
g, h Diferencia significativa (prueba de Friedman, p ≤ 0,004).
i Diferencia significativa entre SCZ zorros vs. SCA infectados y no infectados zorros en todos los eventos de captura (Mann-Whitney U test, p ≤ 0,001), a excepción de SCA zorros infectados en t
2 (p = 0,1) yt
3 (p = 0,9).
Cuando los niveles de IgG entre zorros SCA se compararon con base en el estado de infección, los zorros no infectados tenían niveles significativamente más bajos de IgG que los zorros infectados en t
1 (p & lt; 0,001), t
2 (p = 0,01), y t
3 (p = 0,01; figura 4). Entre t
0 y t
3, hubo una disminución significativa en los niveles de IgG dentro de ambos zorros no infectados e infectados (p & lt; 0,001, 0,004). SCA zorros no infectados tenían niveles significativamente más altos de IgG que SCZ zorros no infectadas en t
1 (p & lt; 0,001); Sin embargo, los niveles de IgG fueron similares en t
2 (p = 0,1) y t
3 (p = 0,9). Por el contrario, SCA infectados zorros mantienen los niveles de IgG que fueron significativamente más altos que los zorros SCZ en absoluto recuperar eventos (t
1 y t
2: p & lt; 0,001, t
3: p = 0,001). Los niveles de IgE para SCA y SCZ zorros estaban por debajo del límite de detección del ensayo; Por lo tanto, los datos no fueron analizados.
Canal auditivo ocurrencia de tumores
La prevalencia del tumor inicial en toda la población de estudio de zorros SCA fue del 21% (23/111). Seis zorros fueron excluidos de este análisis debido a la insuficiencia de biopsias recogidas al comienzo del estudio. La gran mayoría de los tumores en t
0 se detectaron en zorras maduras, donde el 51% (22/43) de los zorros ≥ 4 años de edad tumores del conducto auditivo expuestas. A pesar de que el 79% (88/111) de los zorros eran inicialmente sin tumores, un número considerable de estos zorros desarrollado nuevos tumores durante el ensayo de seis meses. Durante el período de captura final (t
3), 53 de los zorros inicialmente exento tumorales fueron atrapados y examinado, y 12 de estos zorros eran ≥ 4 años de edad. No se observaron nuevos tumores canal auditivo en cinco zorros (5/53), tres de los cuales estaban infectados no tratados (todos) y dos de las cuales fueron tratadas no infectadas (uno, uno no tratado). Una vez más, se han detectado la mayoría de los tumores en los zorros maduros, en 33% (4/12) de los zorros ≥ 4 años nuevos tumores en el conducto auditivo expuestas.
Discusión
Los resultados de este estudio proporcionar pruebas convincentes de que el tratamiento acaricida es un medio eficaz de reducir los ácaros del oído, y que la eliminación de ácaros reduce los factores de riesgo conocidos para la formación de tumores de la glándula ceruminous en los zorros SCA. eliminación Mite parece disminuir la irritación del canal auditivo crónica y la producción excesiva de cerumen, probablemente disminuyendo cambios patológicos en el oído que podría conducir a la formación de tumores. El hecho de que el CGH en realidad aumentó en un corto período de tiempo dentro de los zorros infectados persistentemente proporciona una fuerte evidencia de que la presencia a largo plazo de los ácaros probablemente se asocie con hiperplasia epitelial. la división de células con el tiempo aumenta la posibilidad de contraer una mutación oncogénica, dando lugar a un crecimiento incontrolado y el desarrollo de tumores epiteliales igual que los adenomas y carcinomas ceruminous [22]. Sin intervención, la hiperplasia en el canal auditivo continuará avanzando en los zorros de ácaros infectados, probablemente aumentando el riesgo de desarrollo de tumores.
La disminución en la prevalencia del ácaro y la intensidad de la infección es compatible con el uso continuado de la ivermectina u otros acaricidas auditivamente para reducir las infecciones de ácaros del oído en los zorros SCA. Un pequeño número de zorros en el grupo tratado fueron infectados con ácaros en t
3; esto puede ser atribuible a la eliminación incompleta de la infección inicial, o la reinfección. recuento Mite disminuyó en ambos grupos tratados y no tratados durante el estudio de seis meses, y aunque la disminución fue mucho más sustancial en el grupo tratado, la reducción de ácaros en el grupo no tratado fue inesperado. Sospechamos que la eliminación mecánica de ácaros y alteración del ambiente sonoro durante los procedimientos de toma de muestras de biopsia y podría haber contribuido a este descenso general. La administración de lidocaína y la aplicación de polvo astringente a los sitios de biopsia, así como exudado o suero producido por el proceso de curación, puede haber contribuido a una reducción temporal de la carga de ácaros en los dos grupos inmediatamente después de la biopsia. Cualquier proceso que aumenta la inflamación y exudado en el conducto auditivo puede crear un ambiente inhóspito para los ácaros del oído, causando a menudo ácaros de abandonar el canal auditivo o morir, disminuyendo así la carga de ácaros en general [12]. Este "efecto de lavado" de suero o exudado También se ha sugerido en los zorros SCA con canales auditivos gravemente enfermas donde pocos ácaros están presentes [10]. También es posible que mediante la reducción de la carga de ácaros en una proporción de la población, que disminuyó la tasa de reinfección, que se produce casi exclusivamente a través del contacto directo con los zorros infectados [12]. Los cambios estacionales en la carga de ácaros es poco probable porque el clima de la isla SCA es seco y cálido, con sólo leves fluctuaciones en la temperatura y las precipitaciones [23],
O
.
cynotis
es un ectoparásito obligatorio que complete todas las etapas de la vida de su huésped [24], una alta prevalencia del ácaro se ha detectado en los zorros SCA durante todo el año, y el estado general del cuerpo del zorro no parece cambiar con las estaciones ( JKL, comunicación personal).
en la actualidad, los zorros de la isla son una especie de manejo intensivo, y serán en el futuro previsible. Durante la captura censo anual en toda la isla en la isla de SCA, un número sustancial de zorros son examinados, identificada con una etiqueta de transpondedor integrado pasivo, y vacunados contra el moquillo y la rabia.