Extracto
Aplicaciones
Para evaluar si el tiempo T
1 relajación de los tumores puede ser utilizado para evaluar la respuesta al bevacizumab terapia antiangiogénica. Procedimientos: 12 ratones hembra desnudos portadores de tumores de ovario SKOV3ip1-LC subcutáneas se administraron bevacizumab (6.25ug /g, n = 6) o PBS (control, n = 6), la terapia dos veces a la semana durante dos semanas. T
1 mapas de tumores se generaron antes, dos días y 2 semanas después de iniciar el tratamiento. El peso del tumor fue evaluada por RM y en la necropsia. Se realizó la histología de la densidad de los microvasos, proliferación y apoptosis
Resultados
tratamiento Bevacizumab resultó en la inhibición del crecimiento tumoral. (p & lt; 0,04, n = 6), confirmando la eficacia terapéutica. veces Tumor T
1 relajación aumentaron en los ratones tratados con bevacizumab 2 días y 2 semanas después de iniciar el tratamiento (p & lt; 0,05, n = 6). la densidad microvascular disminuyó 59% y la proliferación celular (Ki67 +) disminuyeron en un 50% en el grupo de tratamiento con bevacizumab (p & lt; 0,001, n = 6), pero no la apoptosis
Conclusiones
Los resultados sugieren que. aumento de tumores tiempo T
1 relajación se asocia con la respuesta al tratamiento con bevacizumab en el modelo de cáncer de ovario y puede servir como un indicador temprano de la respuesta
Visto:. Ravoori MK, Nishimura M, Singh SP, Lu C, Han L, Hobbs BP, et al. (2015) Tumor Tiempo T
1 Relajación para evaluar la respuesta al bevacizumab anti-angiogénico terapia en un modelo de cáncer de ovario de ratón. PLoS ONE 10 (6): e0131095. doi: 10.1371 /journal.pone.0131095
Editor: Chryso Kanthou, Universidad de Sheffield, Reino Unido
Recibido: 18 Julio, 2014; Aceptado: 28-may de 2015; Publicado: 22 Junio 2015
Derechos de Autor © 2015 Ravoori et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. Este trabajo fue apoyado por subvenciones del NIH (CA109298, CA159042, P50CA083639, U54CA151668, CA016672). Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
la angiogénesis es el proceso de crecimiento de nuevos vasos sangre de los vasos pre-existentes y es crucial para el crecimiento de células de cáncer. vasos angiogénicos tienden a ser anormal, por ejemplo, que tienen estructura heterogénea y desorganizado [1] y aumento de la permeabilidad. El proceso es regulado por un equilibrio de factores proangiogénicos y antiangiogénicos, que, en el interruptor de las células tumorales a un fenotipo angiogénico, conduce al crecimiento y progresión tumoral. El fundamento de la terapia anti-angiogénica se basa en el concepto de que la normalización de la vasculatura del tumor, la poda de los vasos anormales, y el bloqueo de nuevo la angiogénesis provoca la estabilización del tumor [2,3]. La familia del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) de las proteínas y los receptores juegan un papel clave en este proceso.
Bevacizumab (Genentech, Inc., South San Francisco, CA) es un anticuerpo anti-VEGF monoclonal IgG1 humanizado que inhibe la vía VEGF. Se aprobó por primera vez por la Food and Drug Administration de U.S (FDA) en 2004 para el tratamiento del cáncer colorrectal avanzado en combinación de la quimioterapia estándar. Posteriormente, se aprobó para el tratamiento del cáncer avanzado no microcítico de pulmón de células, el cáncer de riñón y glioblastoma [4-12].
El cáncer de ovario es el más mortal de los cánceres ginecológicos y terapias más allá de la cirugía no son muy eficaces . Terapias de orientación el estroma, tales como inhibidores de la angiogénesis, representan nuevos enfoques. En el cáncer de ovario, los ensayos clínicos prospectivos han llevado a cabo utilizando bevacizumab [13-16]. Entre estos, el mayor ensayo de agente único, Gynecologic Oncology Group (GOG) 170D ensayo, se encontró una tasa de respuesta del 21% en pacientes con cáncer de ovario recurrente; y, el 40% de los pacientes estaban libres de progresión a los 6 meses [13]. La predicción de la respuesta sería la selección de pacientes para el ayudante de eficacia y evitar la terapia fútil y sus complicaciones. El mecanismo de bevacizumab es unir VEGF circulante, que inhibe su unión a sus receptores en las células endoteliales, por lo tanto, alterando su función y el crecimiento. Los cambios funcionales tales como disminución de la permeabilidad capilar y la reducción morfológica en el número de micro-vascular debe dar lugar a características de los tejidos alterados, como la constante de tiempo de relajación spin-red (T
1). La resonancia magnética (RM) ofrece una excelente resolución de imagen y contraste sin radiación ionizante. Se basa en la medición de la distribución espacial de los núcleos de hidrógeno, como ponderado por procesos de relajación que se basan en su entorno local y molecular en un campo magnético. T
1 caracteriza la tasa de retorno de la señal longitudinal al equilibrio. T imágenes
1 ponderados son comúnmente vistos clínicamente, pero por lo general no se obtienen cuantitativamente. En este trabajo, empleamos cuantitativa T
1 evaluación. Los tejidos tienen constantes de tiempo de relajación característicos que pueden ser alterados o fisiológicamente por la enfermedad [17-19]. Así, la terapia también tiene potencial para alterar T
1. El uso de T
1 para predecir la respuesta a la terapia angiogénica está bajo investigación [20, 21]. Si el T
1 tiempos de relajación de los tumores se pueden utilizar para evaluar la respuesta a la terapia angiogénica con bevacizumab no se conoce para el cáncer de ovario. Se evaluó si el T
1-valor de los tumores podría ser utilizado para evaluar la respuesta al bevacizumab tratamiento antiangiogénico en un modelo de xenoinjerto de cáncer de ovario humano.
Material y Métodos
Cultivo celular
La línea celular de cáncer de ovario SKOV3ip1-LC derivada de adenocarcinoma de ovario se cultivó en medio RPMI-1640 suplementado con 10% de FBS y antibióticos (50? g /ml de sulfato de gentamicina, Cellglo, Medlatech, Inc. Manassas VA) a 37 ° C en una atmósfera de dióxido de carbono al 5%.
Animales
ratones desnudos atímicos hembra (NCR-nu) fueron adquiridos por el Instituto Nacional del cáncer, Cancer Research Center Frederick y Desarrollo (Frederick, MD ) y se mantuvieron en condiciones libres de patógenos específicos. Los animales fueron atendidos de acuerdo con las directrices establecidas por la Asociación Americana para la Acreditación de Laboratorio Animal Care y la Política de Servicio de Salud Pública del cuidado humano y Uso de Animales de Laboratorio. Todos los estudios con ratones fueron aprobados y supervisados por la Universidad de Texas-M.D. Comité Institucional Animal Anderson Cuidado y Uso (protocolo 01-12-01331). El protocolo incluyó sacrificio de animales moribundos o que tienen exceso de carga tumoral.
1x10
6 células fueron inyectadas por vía subcutánea en ratones desnudos hembra 12 en el flanco cerca de la columna vertebral para mitigar el movimiento en la RM posterior. Dos semanas más tarde, la RM se realizó para evaluar el tamaño del tumor y para obtener T
1 Mapas pre-terapia. Posteriormente, los animales se dividieron aleatoriamente en dos grupos de seis cada uno. El grupo de tratamiento recibió una inyección intraperitoneal de bevacizumab (6.25ug /g en 200uL de solución salina tamponada con fosfato, PBS) dos veces a la semana durante dos semanas. El grupo control recibió inyecciones intraperitoneales de PBS en el mismo horario. La RM también se realizó dos días y dos semanas después de iniciar el tratamiento. Dos semanas después del inicio del tratamiento, los ratones fueron sacrificados, el peso del tumor fue registrado, y el tejido divididos para la fijación en formol o se congelaron en los medios de temperatura óptima de corte (OCT).
Imagen de Resonancia Magnética
imágenes de RM se realizó antes de la terapia y luego dos días y dos semanas después del tratamiento inicial. Todos los estudios de RM se realizaron utilizando un escáner 4.7T (Bruker Biospec, 47/40 USR, Bruker Biospin, Billerica, MA) con un inserto de gradiente de 60-mm y un resonador de volumen con un diámetro interno 35 mm. Los animales fueron anestesiados con 2% de isofluorano y la cabeza colocan primero y propenso en un trineo de posicionamiento. exploraciones explorador 3 planos ortogonales fueron adquiridos inicialmente para confirmar el posicionamiento de los animales. la colocación de los animales y la localización del tumor se confirmaron utilizando imágenes axiales y coronales ponderadas en T2 (tiempo de repetición = 2750 ms, tiempo de eco efectiva (TE) = 50 ms, el eco de tren = 8; campo de visión (FOV) = 4cm x 3 cm, grosor de corte = 1 mm, matriz de la imagen = 128 x128, número de promedios de señal = 2). T cuantitativa se realizó
1 evaluación. Una secuencia de saturación de recuperación de espín-eco rápido (TR = 110-10,000 ms [110 ms, 200 ms, 400 ms, 600 ms, 1,000ms, 2,000ms, 4,000ms, 6,000ms, 10,000ms]; TE = 50 ms; eco de tren = 8 ; campo de visión (FOV) = 4 cm x 3 cm, la imagen de la matriz = 128 x128; número de promedios de señal = 1) se utilizó para medir la T
1 de tejido tumoral utilizando las regiones de interés (ROI) que abarca todo el tumor. T
2 imágenes ponderadas-se utilizaron para la identificación ayudante de los márgenes del tumor. Paravision versión 4 se utilizó para calcular la T valores
1 de relajación por exponencialmente apropiado de la señal como una función de TR. regiones extraídas manualmente de interés en cada tumor que contiene la imagen ponderada en T2 fueron utilizados para obtener el peso del tumor como se describe anteriormente [22]. Brevemente, usando el software Image J (Institutos Nacionales de Salud, EE.UU.), en cada imagen que contiene un tumor, la periferia de la masa fue rastreado y se calculó el área de la región dibujado. Las áreas fueron multiplicados por el grosor de corte más omitir hasta obtener el volumen del tumor en cada rebanada y estos volúmenes añadidos. Suponiendo una densidad de tejido de 1 g /ml, para derivar el peso, el volumen en mm
3 se multiplicó por 0,001 g de tejido /mm
3.
Inmunohistoquímica
inmunohistoquímica se realizó la tinción de Ki67 y CD31. Para la tinción de Ki67, muestras de tejido incluidas en parafina fijadas con formalina se cortaron en secciones de 5 micras. Después de desparafinación, recuperación de antígeno se llevó a cabo mediante el calentamiento de la corredera en una cocina de vapor durante 10 minutos en 0,2 M tampón Tris, pH 9,0. CD31 se tiñó [23] utilizando diapositivas congeladas. peróxido endógena fue bloqueada con 3% de H
2O
2 en metanol durante 12 minutos. Después del bloque de proteínas con el caballo normal y suero de cabra, los portaobjetos se incubaron con el anticuerpo primario a Ki67 (Thermo científica, Fremont, CA) o CD31 (PECAM-1, 1: 800 de IgG de rata, Pharmingen, San Diego, CA) en solución de bloqueo durante la noche a 4 ° C. Después de lavar con PBS tres veces, se añadió el anti-ratón anticuerpo secundario conjugado con HRP (DAKO, Carpinteria, CA) en solución de bloqueo durante una hora a temperatura ambiente. Los portaobjetos se tiñeron con sustrato DAB (Phoenix Biotecnologías, Huntsville, AL) y contratinción con hematoxilina Gils Nº 3 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Para cuantificar la densidad de micro-buque (MVD), los microvasos dentro de los cinco seleccionados al azar 0,159 mm
2 campos de 100X se contaron. Un micro-recipiente único se definió como un grupo discreto o al menos tres células teñidas positivas para CD31. se requerirá la presencia de un lumen al eliminar como un micro-recipiente. El índice de marcaje Ki67 se determinó contando un mínimo de 1.000 células tumorales y el índice se calcula como un porcentaje. TUNEL ensayo se realizó como se describe [23].
El análisis estadístico
Para comparar grupos, 2 de cola pruebas t se realizaron utilizando el software de hoja de cálculo (Microsoft Office Excel 2003, Microsoft, Seattle, WA) . Se utilizó de mínimos cuadrados de regresión lineal para evaluar el grado de dependencia lineal entre la RM deriva el peso del tumor y el peso del tumor extirpado. Las medidas repetidas ANOVA se utilizó para comparar la magnitud del cambio relativo en T
1 tiempo de relajación (pre-tratamiento para el seguimiento de las exploraciones a las 48 horas y 2 semanas) entre los ratones con bevacizumab y control. intercepta al azar se utilizaron para ajustar la inferencia para la heterogeneidad inter-ratón al tener en cuenta la interdependencia entre las tres exploraciones repetidas intra-ratón. Dos caras Wald pone a prueba utilizando el método de estimación robusta descrito por Koller y Stahel [24] se aplicaron a los efectos fijos que caracterizan la diferencia media entre bevacizumab y el control de la extensión del cambio relativo en T 1 vez
relajación en cada uno de los dos el seguimiento de las exploraciones. Esta prueba no asume una distribución de Gauss que permite la evaluación de los datos incluso con no normal, sesgada distribución. corrección de Bonferroni se utilizó para controlar la tasa de error de tipo I familywise en el nivel de significancia de 0.05 entre las dos pruebas para las diferencias en la magnitud del cambio relativo en cada exploración de seguimiento, la inducción de un umbral de significación de 0,025 para cada prueba. ANOVA se llevó a cabo utilizando la versión 3.0 del software estadístico R (R equipo de desarrollo, http://www.r-project.org) utilizando el
robustlmm
paquete.
Resultados
el tamaño del tumor
Se evaluó el efecto de bevacizumab en el crecimiento del tumor. inhibe el crecimiento tumoral tratamiento Bevacizumab comparación con el control, como se ve por RM (Fig 1). Antes de la terapia, no hubo diferencia estadísticamente significativa en el peso del tumor entre los dos grupos como se mide en las imágenes de RM. Dos días y dos semanas después del tratamiento, los ratones tratados con bevacizumab tenían tumores significativamente más pequeños que los ratones de control (P & lt; 0,04, n = 6) por tanto in vivo medición MR y ex vivo en la necropsia (Fig 2). No se observaron diferencias en los pesos del tumor en los grupos de tratamiento pre-terapia frente a 2 días o 2 semanas después del inicio del tratamiento con bevacizumab. pesos de los tumores derivados de formación de imágenes MR in vivo correlacionan altamente con los pesos de los tumores extirpados (r
2 = 0,99, p & lt; 0,001, n = 12, Fig 3).
representativos imágenes de RM axiales de ratones pre -terapia (A, B) o dos semanas después del inicio del tratamiento (C, D) con vehículo (A, C) o bevacizumab (B, D). mapas T1 axial de los mismos tumores (E, F, G, H). Representativos imágenes axiales de RM de ratones pre-tratamiento (E, F) o dos semanas después de la iniciación de la terapia (G, H) con vehículo (E, G) o bevacizumab (F, H).
El peso del tumor derivado de las imágenes de RM antes y dos semanas después del inicio de la terapia, y, por necropsia dos semanas después del inicio de la terapia. *, P & lt; 0,05. Las barras de error representan la desviación estándar.
T
1 Valores
El T
1 tiempo de relajación fue significativamente mayor en el grupo tratado con bevacizumab en comparación con los controles, tanto dos días (2302 ± 567, media ± desviación estándar, vs 1.729 ± 209) y dos semanas (2146 ± 276 vs 1.847 ± 112) después de la iniciación de la terapia (p & lt; 0,05, n = 6, Fig 4). Hubo variación en el T
1 valores (S1 FIG); Por lo tanto, para ajustar la asimetría potencial en estas comparaciones, de dos caras Wald pruebas utilizando el método de estimación robusta descrito por Koller y Stahel [24] se aplicaron. Las diferencias significativas en el grado de T
1 hora de modificación de relajación fueron evidentes entre bevacizumab y controlar las cohortes en cada exploración de seguimiento después de ajustar por la multiplicidad. Estadísticamente, la inferencia robusta estima que la magnitud del cambio relativo en el tiempo T
1 de relajación era 16,1% (p≤0.011) más grande en promedio para los ratones tratados con bevacizumab en comparación con los ratones de control después de 48 horas. El resultado mantuvo la significación estadística después de 2 semanas, donde el tiempo T
1 relajación se incrementó en un 14,5% (p-value≤0.021) en promedio para los ratones tratados con bevacizumab. Antes del tratamiento, el tiempo T
1 relajación era 1,877 ± 60 para los tumores de los ratones que fueron tratados posteriormente con bevacizumab. En comparación, el T
1 Valor no cambió respecto a los niveles pre-terapia (1875 ± 57) en el grupo control a pesar de aumento en el tamaño del tumor.
Los valores T1 de tumores pre, de 48 horas, y dos semanas después de la terapia. *, P & lt; 0,05. Las barras de error representan la desviación estándar.
Histología
Mean densidad de los vasos, la proliferación y la apoptosis se evaluaron como biomarcadores histológicos de los efectos de bevacizumab en dos semanas después del inicio del tratamiento. CD31 tinción se utiliza para marcar los vasos. La densidad de los vasos media promedio se redujo en un 59% en el grupo de tratamiento bevacizumab comparación con el grupo control (p & lt; 0,001, n = 6, la figura 5A). Ki67 se utilizó como un marcador de proliferación celular. índice de marcaje Ki67 se redujo en un 50% en el grupo de tratamiento bevacizumab (p & lt; 0,0001, Figura 5B) en comparación con el grupo control. Por otro lado, el índice apoptótico, evaluada mediante la tinción de TUNEL, no fue diferente entre los dos grupos (Fig 5C).
A) La tinción inmunohistoquímica para CD31 (izquierda) y la densidad de microvasos (derecha). B) La tinción inmunohistoquímica para Ki67 (izquierda) y el índice de marcaje Ki67 (derecha). tinción C) TUNEL (izquierda) y el índice de apoptosis (derecha). Las barras de error representan la desviación estándar.
Discusión
La terapia anti-angiogénico con bevacizumab resultados en la respuesta al tratamiento en un subgrupo de pacientes con cáncer de ovario. Se necesitan marcadores de respuesta para analizar aquellos pacientes que podrían beneficiarse de la terapia frente a la terapia inútil para los pacientes que estarían en riesgo de complicaciones y sin beneficio terapéutico. La terapia anti-angiogénica altera la función y la morfología de los vasos sanguíneos dentro del tejido del tumor. Nuestros datos sugieren que el aumento de la T
1 tiempo de relajación del tejido tumoral proporciona una indicación temprana de la respuesta al bevacizumab terapia anti-angiogénica. Este es el primer informe que somos conscientes de que evalúa el tiempo T
1 relajación en el contexto de la terapia anti-angiogénicos tumor de ovario.
El examen histológico del tejido tumoral mostró disminución en la densidad de microvasos y la proliferación en el bevacizumab grupo de tratamiento. El crecimiento del tumor también se inhibió. Estos resultados son consistentes con la arquitectura tumoral alterado y cambio funcional en el crecimiento tumoral. En contraste, la tasa de apoptosis no se cambió. Estos resultado son consistentes con los datos de Rapisarda et al. [25] que informó de que la densidad de los microvasos se redujo y la expresión inducible factor 1 (HIF-1) de genes dependiente de la hipoxia se aumentó después del tratamiento de U251 (glioblastoma) tumores con bevacizumab, pero no se indujo apoptosis.
anormal vasos sanguíneos y linfáticos, incluida la mala selectividad permeabilidad debido a la alta permeabilidad vascular resultado en un aumento de la presión del fluido intersticial del tumor (IFP) [26]. los resultados del tratamiento anti-angiogénicos en una disminución de la densidad de los microvasos, la permeabilidad vascular y la presión intersticial de fluido (IFP) [27]. En pacientes con cáncer de recto, en general significa IFP disminuyó 15,0 mm Hg después del tratamiento con bevacizumab [28]. Esto puede afectar a los parámetros sensibles al fluido T
1 [26], ya que el IFP está relacionada con líquido en el espacio extracelular-extravascular.
Anti-angiogénesis terapia ha sido evaluado en varios ensayos clínicos con contraste dinámico mejorado RM y estos han demostrado comúnmente disminución en el coeficiente de transferencia direccional hacia adelante, k
trans, y la inicial del área bajo la curva, IAUC, y en algunos estudios, la afluencia unidireccional constante K
i, pero pocos se han relacionado a una mayor progresión de la supervivencia general o sin [29]. Para bevacizumab, disminución de k
trans se ha observado [30] y aunque este es un parámetro complejo, el hallazgo sugiere que la disminución de la permeabilidad. Esto parece ser un hallazgo común y también se ha sugerido en varios modelos tumorales [31-33].
Así, la terapia bevacizumab tiene efectos sobre varios parámetros vasculares que la estructura y el comportamiento del tumor efecto. Esto puede afectar a las características de imagen de tumores. Por ejemplo, en pacientes que reciben terapia citotóxica más bevacizumab durante 2-3 meses, el tumor de cambio de la morfología de la TC, incluyendo una baja atenuación homogénea y bordes afilados de las metástasis hepáticas de cáncer colorrectal correspondió con una disminución de tumor residual [34]. MR tiene un mayor contraste de tejidos blandos que la TC. La mayoría de los tumores que afectan al hígado ya tienen una T
1 de hígado normal, por lo tanto, la mayoría de las metástasis parecen ser de señal inferior en T
1 ponderados por MR. Standard T
1 de formación de imágenes ponderada es cualitativa y puede estar influenciada por un número de parámetros tales como los efectos relacionados con el hardware, los parámetros de carga de la bobina y de secuencia, por otra parte, la percepción del cambio depende de ventanas y nivelación de imágenes; en comparación, T
1 relaxometría da resultados más cuantitativos y puede resultar en una mejor sensibilidad a los cambios bioquímicos y estructurales del tejido con la patología [35]. T
1 mapeo evalúa tejido T
1 efectos, la eliminación de la contaminación tales como la densidad de protones, T
2, y la sensibilidad de la bobina que influyen T
1 de formación de imágenes ponderada estándar [35].
La diferencia en T
1 de relajación del tejido permite la diferenciación de diferentes tipos de tejidos. Enfermedad de un tejido puede alterar T Tiempo
1 relajación, por ejemplo, se incrementa en pacientes con cirrosis en comparación con hígado normal o hepatitis crónica [36], lo que sugiere que el cambio de arquitectura fibrótico en el hígado alarga este valor. T
1 tiempo de relajación se ha usado en pacientes para derivar el contenido de agua en el cerebro [19] y el aumento de T se encontró
1 tiempo de relajación para que se corresponda con un aumento de edema en el miocardio [37], es decir, aumento de líquido en el extravascular extracelular espacio. En teoría, por la disminución de la presión intersticial, la cantidad de líquido en el espacio extravascular extracelular debe disminuir con el tratamiento con bevacizumab que resulta en la disminución de T
1 tiempo de relajación. Sin embargo, el bevacizumab tiene varios otros efectos tales como la poda buque y la normalización, y, como hemos señalado, disminución de la proliferación de células tumorales. Hemos observado un aumento en el tiempo T
1 relajación en dos días y dos semanas después de la terapia, lo que sugiere que otros efectos de bevacizumab en parámetros del tejido, como en el flujo sanguíneo, celularidad, la arquitectura y el drenaje linfático pueden haber contribuido al aumento de la T
1 tiempo de relajación que colmó el descenso teórico en el tiempo T
1 relajación esperado de la inhibición de la permeabilidad vascular solo.
T
1 tiempo de relajación se ha evaluado en estudios previos de ratón en el entorno de la quimioterapia. McSheehy et al. evaluado varios agentes quimioterapéuticos que causan la reducción de los tumores y se encontró disminución en el tiempo T
1 relajación con la respuesta, que incluye un inhibidor de la angiogénesis PTK /ZK en tumores de melanoma B16 murino /BL6 [38]. Weidensteiner et al. Del mismo grupo también encontrado disminución de la T
1 tiempo de relajación en respuesta a un inhibidor de mTOR en RIF-1 tumores de fibrosarcoma y disminución de Ki67, pero no significa densidad de los vasos [39]. Estudios previos han observado aumento o disminución de T
1 tiempo de relajación con el tratamiento [40-43]. Las diferencias pueden deberse a la, modelo animal terapéutico, y diferentes métodos de cálculo de T
1 tiempo de relajación. Además, el aumento de los resultados de contenido de agua tumorales fraccional en tiempo T
1, y aunque las correlaciones no son muy fuertes, necrosis puede resultar en más cortos T
1 que se cree que es debido a la liberación de iones paramagnéticos complejados /proteínas con desarrollo de necrosis [43,44]. No se observó diferencia en el tamaño del tumor o tiempos T
1 de relajación entre los grupos tratados y no tratados previamente terapia y sin terapia, el T
1 tiempo de relajación no cambió a pesar de los tumores ampliación. Con el tratamiento con bevacizumab, el crecimiento tumoral se inhibió; y, en estos tumores, tan pronto como dos días después de la terapia, T
1 tiempo de relajación aumenta. A las dos semanas, el crecimiento todavía era inhibida en comparación con el grupo sin tratamiento y T todavía se aumentó el tiempo
1 relajación. Mecánica, el aumento de la T
1 tiempo de relajación se corresponde con la disminución de la proliferación y la disminución de la densidad de vasos significa, como se ve en la figura 5, lo que sugiere que el espacio extravascular extracelular más llegó a estar disponible para el fluido. Una limitación de este trabajo es que el espacio extravascular extracelular no se midió directamente, sin embargo, los informes anteriores también sugieren que el aumento de T
1 sugiere aumento del volumen extracelular [45]. Una posible limitación de este trabajo es el uso de los tumores subcutáneos. Aunque los modelos ortotópico son comúnmente utilizados, por lo que son los modelos subcutáneos [46-49]. Un problema para la imagen intra-abdominal del ratón por MR es que es propenso a un artefacto de movimiento debido a la respiración. Debido a los tiempos de adquisición relativamente largos necesarios para T
1 mapeo, hemos querido limitar el potencial de los artefactos de movimiento que interfieren con el T
1 cálculo. Por lo tanto, se utilizó un modelo subcutáneo en el que el tumor podría ser colocado cerca de la columna vertebral para mitigar movimiento. Los métodos para T
1 mapeo en tiempos clínicamente factibles se acercaron [50].
En el futuro, esto proporciona la posibilidad de formación de imágenes multiparamétrico que incluye imágenes de contraste dinámico para evaluar la permeabilidad vascular, formación de imágenes de difusión ponderada para evaluar el movimiento molecular, y T
1 mapeo para evaluar T
1-relajación para predecir la respuesta a la terapia antiangiogénica. Los métodos para la cuantificación simultánea de densidad de protones relativa, T
1, y T
2 en los marcos de tiempo accesible para su uso clínico [50] sugieren el potencial de ampliación multiparamétrico RM cuantitativa, incluyendo T mediciones de tiempo
1 de relajación, que debe aplicarse a los pacientes con cáncer de ovario.
Conclusión
Los resultados sugieren que el aumento de tumores T
1 tiempo de relajación se asocia con la respuesta al tratamiento con bevacizumab en el modelo de cáncer de ovario y puede servir como una indicador temprano de la respuesta.
Apoyo a la Información
S1 Fig. Diferencia en T1-mapa de valor 2 días o una semana 2 vs pre-terapia para los tumores individuales en los grupos de tratamiento de la figura 4.
doi: 10.1371 /journal.pone.0131095.s001 gratis (TIF)