Extracto
Objetivos
El objetivo fue determinar las asociaciones de polimorfismos genéticos de reparación por escisión de grupo de complementación cruzada 1 (
ERCC1
) rs11615, xeroderma pigmentoso grupo D (
XPD
/
ERCC2)
rs13181, cruz de reparación de rayos X complementando el grupo 1 (
XRCC1
) rs25487,
XRCC3
rs1799794, y la susceptibilidad al cáncer de mama gen 1 (
BRCA1
) rs1799966 de la vía de reparación del ADN y la resistencia a múltiples fármacos 1 (
MDR1 /ABCB1
) rs1045642 con la respuesta a la quimioterapia y la supervivencia del cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) en una población china.
Materiales y Métodos
un total de 352 pacientes con CPNM se inscribieron para evaluar las asociaciones de los seis SNPs con la respuesta a la quimioterapia y la supervivencia global. regresiones logísticas se aplicaron para poner a prueba las asociaciones de polimorfismos genéticos con la respuesta a la quimioterapia en 161 pacientes con CPNM avanzado. La supervivencia global fue analizado en 161 avanzado y 156 pacientes con CPNM etapas tempranas mediante el método de Kaplan-Meier con la prueba de log-rank, respectivamente. Multivariado de riesgos proporcionales de Cox modelo se realizó para determinar los factores asociados de forma independiente con NSCLC pronóstico.
Resultados
BRCA1
rs1799966 menor alelo C (TC + CC
vs.
TT, OR = 0,402; IC del 95% = 0,204 hasta 0,794, p = 0,008) y
MDR1 /ABCB1
rs1045642 alelo menor A (GA + AA
vs.
GG, OR = 0,478, IC del 95% = 0,244-,934, p = 0,030) se asociaron con una mejor respuesta a la quimioterapia en pacientes con CPNM avanzado. Los análisis de supervivencia indicó que
BRCA1
genotipos rs1799966 TC + CC se asociaron con un menor riesgo de muerte (HR = 0,617; IC del 95% = 0,402-0,948; p = 0,028) en pacientes con CPNM avanzado, y la asociación fue siendo significativa después del ajuste de las covariables. Multivariante de Cox análisis de regresión mostró que
genotipo ERCC1
rs11615 AA (
P
= 0,020) y el tabaquismo (p = 0,037) se asociaron con un mayor riesgo de muerte en pacientes con CPNM etapas tempranas después de la cirugía.
Conclusiones
Los polimorfismos de los genes en la vía de reparación del ADN y
MDR1
podría contribuir a la respuesta a la quimioterapia y la supervivencia de pacientes con CPNM
Visto:. Du y, Su T, Zhao L, Tan X, Chang W, Zhang H, et al. (2014) Asociaciones de polimorfismos en genes de reparación del ADN y MDR1 génica con quimioterapia respuesta y la supervivencia de células no pequeñas de cáncer de pulmón. PLoS ONE 9 (6): e99843. doi: 10.1371 /journal.pone.0099843
Editor: Xiaoping Miao, MOE clave Laboratorio de Medio Ambiente y Salud, Escuela de Salud Pública, Tongji Medical College, Universidad Huazhong de Ciencia y Tecnología, China
Recibido: April 17, 2014; Aceptado: 19-may de 2014; Publicado: 16 Junio 2014
Derechos de Autor © 2014 Du et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan
Disponibilidad de datos:. La autores confirman que todos los datos que se basan los resultados son totalmente disponible sin restricciones. Todos los datos relevantes se encuentran dentro del apoyo de sus archivos de información en papel y
Financiación:. Este estudio fue apoyado por el Proyecto Clave de Shanghai Ciencia y Tecnología Comité subvención (06DZ19503 a G. Cao) y la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China ( 81025015 a G. Cao). Los organismos de financiación no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito
Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia
Introducción
el cáncer de pulmón es una de las principales causas de muerte por cáncer en todo el mundo [1]. cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) es el subtipo más común y representa el 85% de todos los cánceres de pulmón. La mayoría de los pacientes con CPNM se encuentran en el estadio tumoral avanzado desarrollado en el diagnóstico y pierden la oportunidad de la resección quirúrgica [2]. La combinación de quimioterapia basada en platino es un tratamiento estándar para el CPCNP avanzado. Sin embargo, el resultado y la supervivencia de CPNM avanzado son generalmente pobres, con una tasa de supervivencia a 5 años de sólo el 15%. Además, la tasa de supervivencia de CPNM avanzado varía mucho en diferentes poblaciones con diversos antecedentes genéticos [3], [4]. Además, la eficacia terapéutica de los regímenes basados en platino se vio afectada por la resistencia a fármacos. Los posibles mecanismos de la quimiorresistencia incluyen alteraciones en el eflujo de fármaco o afluencia, la capacidad de reparación del ADN, y otras rutas celulares necesarias para la respuesta al daño del ADN. Para los pacientes con NSCLC etapa temprana que puede ser extirpado quirúrgicamente, el pronóstico a largo plazo no es satisfactoria y la tasa de supervivencia a los 5 años después de la cirugía es menos de 50% [5]. El resultado de las primeras etapas de los pacientes con CPNM que reciben tratamiento quirúrgico también está estrechamente relacionado con las características genéticas individuales, ya que la variación y los niveles de expresión de ciertos genes pueden afectar a la respuesta de supervivencia y la quimioterapia adyuvante [6], [7]. análisis de la variación genética en las vías de candidatos ha demostrado que los antecedentes genéticos de un individuo desempeña un papel importante en el desarrollo de la enfermedad, la respuesta al tratamiento, y la supervivencia. Por ejemplo, los pacientes con CPCNP completamente resecado y la expresión negativa de reparación por escisión de grupo de complementación cruzada 1 (ERCC1) de proteína en los tumores se benefician más de la quimioterapia adyuvante basada en cisplatino que aquellos con expresión positiva ERCC1 [8]. Estudios anteriores han demostrado que el tumor-nódulo-metástasis (TNM) sistema de estadificación, la edad, el estado funcional y la pérdida de peso se asocian con NSCLC pronóstico; sin embargo, los poderes de predicción de estos factores no son óptimas. Por lo tanto, es crucial para identificar nuevos biomarcadores que pueden mejorar la precisión de la evaluación del pronóstico y predictivo para ayudar a desarrollar un tratamiento personalizado del cáncer y la quimioterapia del paciente a la medida, y, finalmente, lograr mejores resultados para los pacientes con CPNM.
capacidad de reparación del ADN (RDC) es una espada de doble filo en la etiología y el tratamiento del cáncer. Defectos en el sistema de reparación del ADN aumentan drásticamente el riesgo de cáncer [9]. Por otra parte, el mecanismo de reparación del ADN puede reducir la eficacia terapéutica de la quimioterapia al permitir que las células de cáncer para fijar daños del ADN causado por estos agentes [10]. la reparación del ADN implica la coordinación de muchos genes en cuatro principales vías de reparación del ADN, que son la reparación por escisión de nucleótidos (NER), la reparación por escisión de base (BER), reparación de roturas de doble cadena (DSBR), y las vías de reparación de genes (MMR). polimorfismos de nucleótido único (SNPs) en genes de reparación del ADN pueden modular la capacidad de reparación del ADN a través de influir en la expresión o actividad de proteínas, y por lo tanto afectando el riesgo de cáncer de pulmón [11] - [13]. ADN polimorfismos de genes de reparación pueden estar asociados con el riesgo y el pronóstico de NSCLC. xeroderma pigmentoso grupo D (
XPD
/
ERCC2)
polimorfismo puede alterar la estructura secundaria de ARNm [14]; y SNP en la cruz de reparación de rayos X grupo 1 complementando (
XRCC1
) de genes 5 'no traducida (UTR) mejoran en gran medida Sp1 trans-activador elemento de unión, por lo que disminuye la actividad del promotor y la disminución de expresión de la proteína [15]. Además, los polimorfismos en estos genes también pueden ser potenciales marcadores de pronóstico tanto para la respuesta a la quimioterapia y la supervivencia global de los pacientes con NSCLC [16] - [19].
resistencia a múltiples fármacos 1 (
MDR1
, también conocido como
ABCB1
) gen codifica la glicoproteína P (P-gp), un transportador transmembrana que pertenece a la familia de casete de unión a ATP, que puede bombear quimioterapéuticos intracelulares e inducir la resistencia a múltiples fármacos.
/ABCB1
C3435T (rs1045642) polimorfismo MDR1 se asocia con el nivel de expresión y función de MDR1 [20], por lo tanto puede afectar a las respuestas al tratamiento contra el cáncer de drogas.
En este estudio, se seleccionaron seis SNPs previamente estudiada, se encuentra ya sea en la proteína regiones o en regiones reguladoras de los genes, incluyendo
ERCC1
rs11615,
XPD /ERCC2
rs13181 y la susceptibilidad al cáncer de mama gen 1 (
BRCA1 codificación
) rs1799966 de la vía NER;
XRCC1
rs25487 de la vía de REC,
XRCC3
rs1799794 de la vía DSBR, así como
MDR1 /ABCB1
rs1045642 (Tabla S1). en primer lugar se investigó la asociación entre estos SNPs y respuesta a la quimioterapia en pacientes con CPNM avanzado, entonces evaluado sus relaciones con la supervivencia de los pacientes con CPNM que recibieron tratamiento quirúrgico o quimioterapia.
Materiales y Métodos
Estudio de población
los participantes fueron reclutados en el hospital Changhai de la Segunda Universidad médica Militar. Un total de 352 pacientes con CPNM primarios diagnosticados a partir de julio 1997-octubre 2008 se inscribieron (conjunto de datos S1). Todos los pacientes fueron confirmados histopatológicamente como NSCLC. Los datos clínicos e histopatológicos de los pacientes se extrajeron de sus registros médicos. Todos los pacientes eran de origen étnico chino Han. El protocolo de estudio se ajusta a las directrices éticas de la Declaración de Helsinki (2000), y fue aprobado por la Junta de Revisión Institucional de esta universidad. Todos los participantes proporcionaron su consentimiento informado por escrito.
Recogida de datos y de seguimiento
De los 352 pacientes con CPNM, 161 (45,7%) pacientes con NSCLC avanzado recibieron quimioterapia basada en platino evaluables. Además de cisplatino (DDP) o carboplatino (CBP), regímenes de quimioterapia también incluyen gemcitabina (GEM), paclitaxel (TAX), docetaxel (DOC), vinorelbina (NVB), o pemetrexed disódico (PEM). dosis de los fármacos fueron: DDP 75 mg /m
2 el día 1; área de CBP bajo la curva (AUC) = 5-6 g en el día 1; GEM 1250 mg /m
2 en los días 1 y 8; IMPUESTOS 135~175 mg /m
2 el día 1 más de 3 horas; DOC 75 mg /m
2 el día 1 durante 1 hora; NVB 25 mg /m
2 en los días 1 y 8; PEM 500 mg /m
2 el día 1. Todos los fármacos fueron administrados por infusión intravenosa cada 3-4 semanas para un ciclo de tratamiento. La respuesta tumoral se evaluó después de 2 ciclos de tratamiento de acuerdo a los criterios de evaluación de respuesta en tumores sólidos [21]. Las respuestas fueron clasificadas en respuesta completa (RC), respuesta parcial (RP), enfermedad estable (SD) o enfermedad progresiva (PD). Los pacientes con CR, PR o SD se definieron como "beneficio clínico", y los pacientes con EP se definieron como "pacientes sin beneficio clínico" [22].
El seguimiento se iniciado hace 2 meses después de la definitiva diagnóstico. El seguimiento se realiza por teléfono o entrevista en persona en el departamento de pacientes externos en un intervalo de 3 meses de acuerdo con nuestro procedimiento estándar epidemiológica. La mediana de tiempo de seguimiento fue de 20,8 meses (rango: 1,0 a 178,6 meses).
Genotipado
Se extrajo ADN genómico a partir de sangre periférica usando kits de extracción de ADN QIAmp (QIAGEN, Hilden, Alemania). SNPs se genotipo utilizando sonda fluorescente-PCR en tiempo real cuantitativa (qPCR) en un LightCycler
TM480 (Roche, Basilea, Suiza). Los cebadores y sondas TaqMan (o surco menor Carpeta [MGB]) fueron diseñados y sintetizados por GeneCore biotecnologías (Shanghai, China). Las secuencias de cebadores y sondas están disponibles en la Tabla S1. Cada mezcla de reacción contenía 0,2 mol /L de cebadores, 0,2 mol /L de sondas, 0.1 g-0,5 g plantillas purificadas en el sistema de reacción Premezcla Ex Taq (Takara, Dalian, China). Las reacciones fueron programadas a 95 ° C durante 10 s y seguido por 40 ciclos de 95 ° C durante 10 s y 60 ° C durante 30 s. Todas las muestras fueron genotipo con éxito (conjunto de datos S1). Para el control de calidad, 5% de las muestras fueron seleccionadas al azar y directamente secuenciados, y se obtuvieron 100% idénticos resultados.
El análisis estadístico
Se realizó un análisis de regresión logística para obtener las odds ratio (OR) y su intervalos de confianza del 95% (95% IC) para las relaciones de los polimorfismos genéticos con respuesta a la quimioterapia en 161 pacientes con CPNM avanzado. La supervivencia global (OS) se analizó mediante el método de Kaplan-Meier en 161 avanzado y 156 pacientes con CPNM etapas tempranas por separado. Se utilizó la prueba de log-rank para comparar las curvas de supervivencia. Adelante multivariante por pasos modelo proporcional de Cox (
P
ingreso = 0,05,
P
Eliminación = 0,10) se llevó a cabo para determinar los factores que contribuyen de forma independiente a NSCLC pronóstico y estimar la los cocientes de riesgos instantáneos (CRI) y su IC del 95%. Los análisis de subgrupos adicionales estratificar por la histología, el tabaquismo, también se llevaron a cabo del Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) estado funcional, y el escenario. Covariables se ajustaron para obtener los CRI y la correspondiente IC del 95% en el análisis de subgrupos. Todas las pruebas estadísticas fueron de dos caras y llevan a cabo mediante el programa estadístico para Ciencias Sociales (SPSS 16.0 para Windows, SPSS, Chicago, IL).
P Hotel & lt; 0,05 fue considerado estadísticamente significativo
Resultados
Características de los pacientes
Las características demográficas y clínicas de los pacientes se muestran en la Tabla 1. . de los casos de NSCLC 352, 156 (44,3%) eran pacientes en fase inicial que se sometieron a tratamiento quirúrgico, 161 (45,7%) eran pacientes de avanzada en una etapa inoperable y recibieron quimioterapia basada en platino, 10 (2,8%) pacientes rechazaron cualquier tratamiento para motivos personales, y 25 (7,1%) pacientes perdidos durante el seguimiento después del primer tratamiento en el hospital Changhai. La mayoría de los pacientes (120/156, 76,9%) etapa temprana CPNM que se sometieron a cirugía recibieron quimioterapia preoperatoria o adyuvante postoperatoria. pacientes con CPNM avanzado tenían más probabilidades de recibir radioterapia en comparación con los pacientes en etapa temprana (44,1%
vs
20,5%, p. & lt; 0,0001). Otras características demográficas y clínicas fueron similares entre fase temprana y pacientes con CPNM avanzado (p & gt; 0,05 para todos). Tabla S2 presenta las distribuciones de genotipo de estos seis SNPs en diferentes categorías de los pacientes con CPNM.
Asociaciones de SNPs con respuesta a la quimioterapia
De los 161 pacientes con CPNM avanzado que recibieron platino evaluables quimioterapia basada en el número de pacientes con CR, PR, SD o DP fue de 0, 44, 65 y 52, respectivamente. El beneficio clínico global (CR + PR + SD) tasa fue de 67,7% (109/161).
BRCA1
rs1799966,
MDR1 /ABCB1
rs1045642 y estadio clínico estaban significativamente asociados con un beneficio clínico (Tabla 2). Los pacientes portadores de
BRCA1
menor alelo C (TC + CC) tenían significativamente más posibilidades de lograr un beneficio clínico de los pacientes portadores del genotipo TT rs1799966 (75,2%
vs.
55,0%, OR = 0,402 , IC del 95% = 0,204 a 0,794, p = 0,008). Del mismo modo, los pacientes llevar a
MDR1 /ABCB1
rs1045642 alelo menor A (GA + AA) tenía ventaja más clínico que los pacientes portadores del genotipo GG rs1045642 (74,5%
vs.
58,2%, OR = 0,478, IC del 95% = 0,244-0,934, p = 0,030). Además, los pacientes con estadio clínico IV tuvieron significativamente menos posibilidades de lograr un beneficio clínico que aquellos con estadio clínico III (61,3%
vs.
80,0%, OR = 2,523; IC del 95% = 1,171 a 5,437, p = 0,016). Por otra parte, las asociaciones siguieron siendo significativas en el análisis de regresión logística multivariante, lo que sugiere que
BRCA1
rs1799966 (TC + CC
vs.
TT),
MDR1 /ABCB1
rs1045642 (GA + AA
vs
GG.) y el estadio clínico fueron factores independientes que afectan la respuesta a la quimioterapia (
BRCA1
rs1799966 (IV
vs
III.): OR ajustada = 0,410 , IC del 95% = desde 0,203 hasta 0,831, ajustado p = 0,013;
MDR1 /ABCB1
rs1045642: OR ajustada = 0,488; IC del 95% = 0,242 a 0,984, ajustado p = 0,045; estadio clínico: OR ajustada = 2.698 , IC del 95% = 1,214-5,996, ajustado p = 0,015). No se observaron asociaciones significativas entre los otros cuatro SNPs (
ERCC1
rs11615,
XPD /ERCC2
rs13181,
XRCC1
rs25487,
XRCC3
rs1799794) o otras características (edad, sexo, la histología, los regímenes de quimioterapia, el estado funcional, el tabaquismo, y la radioterapia) y un beneficio clínico (p & gt; 0,05 para todos).
Asociaciones de SNPs con sistema operativo de los pacientes con NSCLC avanzado
univariante análisis mediante curvas de Kaplan-Meier y log-rank pruebas indicaron que
BRCA1
rs1799966 (TC + CC
vs.
genotipos TT), radioterapia (nunca
vs.
nunca más), y ser fumador (nunca
vs.
nunca) se asociaron significativamente con un aumento de la SG de los pacientes con CPNM avanzado con valores de log-rank p = 0,042, 0,049, y 0,042, respectivamente (Fig. 1). El análisis por pasos multivariante de Cox mostró que
BRCA1
rs1799966 (TC + CC
vs
TT:. HR = 0,617; IC del 95% = 0,402 a 0,948, p = 0,028), radioterapia (nunca
HR = 0,611; IC del 95% = 0,396-0,944; p = 0,027), y el tabaquismo (nunca
vs nunca::
frente a nunca.. HR = 0,574; IC del 95% = 0.373 -0,882, p = 0,011) predijeron independientemente la supervivencia favorable de los pacientes con CPNM avanzado. No se observaron asociaciones significativas entre los otros SNPs u otras características y OS (log-rank p & gt; 0,05 para todos).
(A) radioterapia
BRCA1
rs1799966, (B), ( C) el consumo de tabaco.
además, examinó la asociación de
BRCA1
rs1799966 con la supervivencia en los análisis de subgrupos mediante la categorización de los pacientes en función de la histología, el tabaquismo, el estado funcional ECOG, y la etapa . En un carcinoma de células escamosas, los que nunca fumaron, aquellos con estado funcional ECOG de 1, o los que están en la etapa III,
BRCA1
rs1799966 TC + CC genotipos predijo un sistema operativo más largo que el genotipo TT (log-rank p & lt; 0,05 para todos) (Fig. 2). Después de ajustar por la edad, el sexo, la histología, estadio, estado funcional ECOG, el tabaquismo, y la terapia de radiación en el modelo de Cox,
genotipos BRCA1
rs1799966 TC + CC se asociaron con un menor riesgo de muerte en pacientes con escamosas El carcinoma de células (HR = 0,324; IC del 95% = 0,137 hasta 0,765, p = 0,010), los pacientes nunca fumó (HR = 0,406; IC del 95% = 0,221 a 0,743, p = 0,004), o aquellos con estado funcional ECOG de 1 ( HR = 0,563; IC del 95% = 0,353-0,898; p = 0,016).
(A) escamosas grupo de carcinoma de células, (B) nunca fumadores grupo, (C) estado funcional del ECOG = 1 grupo, (D ) fase de grupos III. Número entre paréntesis, el número de muertes /número de casos.
Asociaciones de SNPs con OS postoperatorio de pacientes con NSCLC etapa temprana
ERCC1
rs11615 y ser fumador fueron estadísticamente significativa asociada con el sistema operativo de los pacientes con CPNM en etapa temprana (log-rank p = 0,009 y 0,013, respectivamente) (Fig. 3). En el análisis por pasos multivariante de Cox, los pacientes con
genotipo AA ERCC1
rs11615 tenido un mayor riesgo de mortalidad (muertes /casos: 5/9 para AA
vs
44/147 para GG + GA. , HR = 3,087; IC del 95% = 1,197 a 7,961, p = 0,020,). El tabaco también se asocia a una peor supervivencia (muertes /casos:. 30/76 por los siglos de los fumadores
vs
19/80 que nunca han fumado, HR = 1,896; IC del 95% = 1,040 a 3,455, p = 0,037). No se observó ninguna asociación significativa de los otros SNPs u otras características con OS (log-rank p & gt; 0,05 para todos)
(A)
ERCC1
rs11615, (B) la condición de fumador. .
Además analiza la estratificación de los pacientes con CPNM etapas tempranas indicaron que
genotipo AA ERCC1
rs11615 predijo una SG más significativa que los genotipos GG + GA en pacientes con carcinoma de células escamosas (log-rank p = 0,004), los fumado alguna vez (log-rank p = 0,018), los que tienen el estado funcional ECOG de 1 (log-rank p = 0,007), o aquellos que no reciben terapia de radiación (log-rank p & lt; 0,001) (fig. 4). Después de ajustar por la edad, el sexo, la histología, estadio, estado funcional ECOG, el tabaquismo, la radioterapia y la quimioterapia adyuvante en el modelo de Cox,
ERCC1
rs11615 genotipo AA predice un mayor riesgo de muerte en pacientes en etapa temprana con El carcinoma de células escamosas (HR = 6,633; IC del 95% = 1,184 a 37,164, p = 0,031), los fumado alguna vez (HR = 3,324; IC del 95% = 1,040 a 10,627, p = 0,043), los que tienen el estado funcional ECOG de 1 ( HR = 2,835; IC del 95% = 1,063 a 7,560, p = 0,037), o aquellos que no reciben terapia de radiación (HR = 5,381; IC del 95% = 1,857 a 15,593, p = 0,002).
(A) grupo de carcinoma de células escamosas, (B) jamás grupo de los fumadores, estado = 1 grupo (C) ECOG, (D) sin recibir nunca grupo de radioterapia. Número entre paréntesis, el número de muertes /número de casos.
Discusión
En este estudio se evaluaron las relaciones entre los seis SNPs con respuesta a la quimioterapia y la supervivencia de NSCLC en una población china Han . Hemos observado que el alelo menor de C
BRCA1
rs1799966 de la vía DSBR se asoció con una mejor respuesta al tratamiento y una mayor supervivencia en pacientes con CPNM avanzado fueron sometidos a quimioterapia basada en platino. Además, menor alelo A de
MDR1 /ABCB1
rs1045642 se asoció significativamente con el beneficio clínico de la quimioterapia en pacientes con CPNM avanzado. Para los pacientes con CPNM primeros, los portadores de
genotipo ERCC1
rs11615 AA tenían un mayor riesgo de muerte.
BRCA1
gen pertenece al sistema TNM [23], que es el sistema de reparación importante que reduce el daño del ADN inducido por platino.
BRCA1
involucra en muchas actividades, entre ellas la recombinación homóloga, recombinación no homóloga, y la reparación de apareamientos erróneos [24]. proteína BRCA1 es una fosfoproteína nuclear con múltiples funciones no sólo en la reparación del daño en el ADN, sino también en punto de control o de la maquinaria de muerte celular [24], [25].
in vitro
estudios han informado de que el BRCA1 puede regular la sensibilidad agente de quimioterapia; por ejemplo, la ausencia de BRCA1 causa una alta sensibilidad a cisplatino [24]. BRCA1 expresión es un indicador fiable de la quimio-resistencia en pacientes con CPNM que reciben tratamiento por agentes que dañan el ADN, tales como platino [26] - [28]. Los pacientes con baja expresión de BRCA1 tienen una mejor supervivencia en la quimioterapia neoadyuvante basada en platino [26] - [28], que se ve confirmado por un reciente meta-análisis [29]. Los polimorfismos genéticos pueden afectar a la expresión de la proteína, la estructura y /o función; Sin embargo, estudios previos han investigado rara vez las asociaciones entre los
BRCA1
polimorfismos con la supervivencia NSCLC. Un estudio realizado en una población de Corea informó que no hubo asociación entre el
BRCA1
rs1799966 y la supervivencia CPNM; sin embargo, se encontró
BRCA1
haplotipo AACC (rs1799966-rs8176199-rs8067269-rs2070833) predijo una supervivencia más corta entre los pacientes con CPNM avanzado que reciben quimioterapia basada en platino [18]. En nuestro análisis, observamos
BRCA1
rs1799966 menor alelo C se asoció significativamente con una mejor respuesta a la quimioterapia y la supervivencia en pacientes con CPNM avanzado. rs1799966 SNP es un nonsynonymous en la región codificante del dominio COOH-terminal, denominado como BRCT, que es esencial para la recombinación homóloga en la reparación de ADN roturas bicatenarias [30]. El cambio de aminoácidos de prolina a leucina en la posición 871 de rs799917 conduce a un cambio no conservadora de las propiedades estructurales únicas de la proteína BRCA1. Además, este SNP está en desequilibrio de ligamiento con rs799917, que se encuentra en medio de una región muy conservada del
BRCA1
de genes [31].
ERCC1 es otra enzima importante en la TNE vía de reparación del ADN, y es responsable de la "incisión 5 de ADN dañado [32]. Estudios previos han demostrado que la expresión de ERCC1 se relaciona con el beneficio clínico de la quimioterapia basada en platino [5], [8], [33], [34], y podría ser utilizado como un marcador biológico para el tratamiento de NSCLC. El genotipo variante en la
ERCC1
polimorfismos pueden destruir o alterar las funciones de reparación, posiblemente mediante el cambio de los niveles de expresión. rs11615 es un SNP sinónimo situado en el codón 118 de la
ERCC1
gen, que codifica la asparagina de aminoácidos. El alelo variante de rs11615 puede que consiga la alteración del nivel de ARNm [35]. Los estudios realizados en diferentes poblaciones mostraron que el genotipo GG de
ERCC1
rs11615 se asoció con una mejor supervivencia en pacientes con CPNM avanzado [36], [37]. Por el contrario, un estudio realizado en Japón no se encontró una asociación significativa entre
ERCC1
rs11615 y la supervivencia [38]. Además, un meta-análisis de 17 estudios incluidos no pudo confirmar la asociación de
ERCC1
rs11615 con la supervivencia, ni en los análisis estratificados en general ni étnicos [39]. Los resultados inconsistentes de los estudios anteriores pueden ser debido a las diferencias étnicas, la etapa de la enfermedad, y /o variaciones terapéuticas. Pocos estudios nunca investigaron la asociación entre rs11615 y supervivencia de las primeras etapas NSCLC. En el presente estudio, hemos detectado que el genotipo AA de rs11615 se asoció con una SG más baja en pacientes con CPNM etapa temprana. Un meta-análisis concluyó que importante ERCC1 alta se asoció significativamente con una SG peor en pacientes con CPNM tratados con platino [40]. Estas evidencias indican que el genotipo alelo variante (AA) de rs11615 está relacionada con una alta expresión de ERCC1. Sin embargo, los efectos de la terapia de radiación son complejos. Una fracción de los pacientes con CPNM en etapa temprana (32/156, 20,5%) recibieron radioterapia, por lo tanto, no podemos descartar la posible influencia de la radioterapia en la asociación de
ERCC1
rs11615 con la supervivencia.
Una razón del fracaso del tratamiento en pacientes con cáncer es la resistencia a fármacos, que puede ser influenciado por factores que afectan al flujo de salida y afluencia de agentes quimioterapéuticos a través de la membrana celular. MDR1 /ABCB1 es responsable de la flujo de salida de muchos agentes quimioterapéuticos a través de la membrana celular de la hidrólisis de ATP [41]. rs1045642 tiene un G & gt; Un cambio en la posición de ADNc de 3435 en el exón 26 y juega un papel en la función de P-gp [20]. Sin embargo, los resultados de los estudios de
MDR1 /ABCB1
rs1045642 y respuesta a la quimioterapia basada en platino del NSCLC son inconsistentes en diferentes poblaciones [36], [42]. Meta-análisis recientes han confirmado este SNP se asoció con la respuesta a la quimioterapia en las poblaciones generales y de Asia [39], [43]. Sin embargo, se obtuvieron resultados opuestos a partir de los resultados del metanálisis, mostrando
MDR1 /ABCB1
portadores del alelo variante tenían más beneficios clínicos de la quimioterapia. La discrepancia puede posiblemente explicarse por posibles factores de confusión como la radioterapia.
No es sorprendente que el tabaquismo se asoció con NSCLC pronóstico tanto en pacientes en fase inicial y avanzado. Fumar provoca deterioro de la función pulmonar, y es el factor de riesgo bien establecido de NSCLC ocurrencia y de mal pronóstico. Fumar puede causar daños al ADN tales como aductos de ADN y las lesiones de rotura de ADN de doble cadena [44]. También puede interferir con la función de reparación del ADN, lo que afecta en gran medida los resultados del paciente.
El presente estudio tiene varias limitaciones. En primer lugar son el tamaño de la muestra relativamente pequeña y un corto período de seguimiento, especialmente en los análisis de subgrupos, por lo tanto, plantear la cuestión de resultados falsos positivos. Nuestros resultados no alcanzaron significación estadística después de la corrección para comparaciones múltiples, y estos resultados deben ser validados más. En segundo lugar, se recogieron los datos de SO en lugar de la supervivencia específica de la enfermedad, ya que es difícil confirmar la verdadera causa de la muerte en algunos pacientes. En tercer lugar, sólo se seleccionaron número limitado de SNPs en base a sus funciones, mientras que otros polimorfismos en estos genes pueden afectar la respuesta de la quimioterapia y el pronóstico de NSCLC. Por último, el CPCNP es un grupo heterogéneo de neoplasias, y múltiples mecanismos pueden determinar la respuesta y el pronóstico, no hemos podido dar cuenta todos los factores en el análisis actual.
En conclusión, nuestro estudio proporcionado más evidencias de que los polimorfismos en el ADN genes de la vía de reparación y
MDR1
gen podría influir en la respuesta al tratamiento y la supervivencia de los pacientes con CPNM. Los mecanismos de cómo las diferencias en las secuencias de nucleótidos de SNP o repeticiones en tándem pueden afectar a la transcripción de genes permanecen en gran medida poco clara. Se necesitan más estudios a gran escala para dilucidar las funciones y mecanismos que pueden ayudar en la mejora de los resultados de los pacientes con CPNM.
Apoyo a la Información sobre Table S1.
polimorfismo de información, cebadores y sondas para el genotipado
doi: 10.1371. /journal.pone.0099843.s001 gratis (DOC) sobre Table S2. distribuciones
genotipo del SNP en pacientes con CPNM
doi: 10.1371. /journal.pone.0099843.s002 gratis (DOC)
conjunto de datos S1.
doi: 10.1371 /journal.pone.0099843.s003 gratis (XLS)